PEFBSC-RO
Roche
Pefabloc® SC
powder, solubility: 100 mg/mL in aqueous buffer, suitable for blocking, suitable for protein purification
Synonyme(s) :
Pefabloc® SC, Fluorure de 4-(2-aminoéthyl)-benzène-sulfonyle, aebsf, fluorure d’aminoéthyl-benzène-sulfonyle, 4-2-, inhibiteur de protéinase K
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About This Item
Code UNSPSC :
12352204
Forme
powder
Niveau de qualité
Poids mol.
Mr 239.5
Conditionnement
pkg of 1 g (11429876001)
pkg of 100 mg (11429868001)
pkg of 500 mg (11585916001)
Fabricant/nom de marque
Roche
Technique(s)
blocking: suitable
protein purification: suitable
Pf
175-185 °C
Solubilité
aqueous buffer: 100 mg/mL
Température de stockage
2-8°C
Catégories apparentées
Description générale
Pefabloc SC est un inhibiteur spécifique, puissant et irréversible des protéases à sérine. Son activité inhibitrice est comparable à celle du PMSF ou du DFP, mais il est non toxique.
Spécificité
Pefabloc SC fait partie de la famille des fluorures de sulfonyle qui bloque de manière irréversible les protéases à sérine. Pefabloc SC a également été décrit comme un inhibiteur puissant de sérine/thréonine phosphatase.
Application
- Pefabloc SC sert à inhiber les effets délétères des protéases durant la purification préparative des protéines.
- Du fait de sa faible toxicité vis-à-vis des cellules eucaryotes, ce produit peut être utilisé lors de la production de protéines recombinantes, lors de la fermentation de cellules transformées, lorsque la digestion protéolytique peut réduire le rendement du produit recherché.
- Pefabloc SC permet d′inactiver complètement la protéinase K pendant la préparation d′ADN chromosomique dans des blocs d′agarose (« agarose plugs »). Pour ce faire, les cellules sont incluses dans de l′agarose puis digérées avec de la protéinase K pour dégrader la totalité des protéines. Avant ajout d′une endonucléase de restriction spécifique, la protéinase K est inactivée par incubation des blocs d′agarose dans du Pefabloc SC 1-5 mM dans un milieu contenant du Tris-HCl 10 mM et de l′EDTA 1 mM à pH 7 et +37 °C pendant 2 heures ou bien toute la nuit.
- Contrairement au PMSF, Pefabloc SC est un excellent bloqueur de l′activité de la thrombine dans le sérum ou le plasma. Dans ces fluides biologiques, le PMSF interagit de manière réversible avec l′albumine, ce qui réduit sa concentration sous forme libre et retarde l′inactivation de la thrombine. Pefabloc SC, quant à lui, ne réagit pas avec l′albumine sérique, et présente une capacité d′inactivation de la thrombine trois fois supérieure en conditions similaires.
- Pefabloc SC peut être utilisé sur les cellules vivantes.
- Utilisez Pefabloc SC pour inactiver la protéinase K, par exemple durant une électrophorèse sur gel en champ pulsé (ECP). Avec cette technique, l′isolement d′ADN génomique requiert de la protéinase K pour dégrader les constituants cellulaires, et cette protéase extrêmement résistante est difficile à inactiver. Pefabloc SC inhibe la protéinase K et protège la stabilité des enzymes de restriction utilisées pour poursuivre l′analyse de l′ADN.
Caractéristiques et avantages
- Profitez d′un inhibiteur facile à utiliser. Hydrosoluble, Pefabloc SC peut être ajouté directement dans les tampons aqueux.
- Évitez les composés dangereux. Inhibez de manière non toxique vos protéases, sans risque pour vous ou ceux qui vous entourent (voir Figure 1).
- Obtenez une protection garantie avec une stabilité améliorée. L′inhibition des protéases est uniforme, même aux pH supérieurs à 7,0 et aux températures supérieures à +4 °C (voir Figure 2).
- Maximisez l′inhibition. Ayez la certitude que le taux de votre inhibiteur actif est suffisamment élevé en utilisant un produit réellement soluble et stable.
Qualité
A fait l′objet d′un contrôle fonctionnel ; homogène en CCM (TLC)
Notes préparatoires
Concentration de travail : 0,1 à 1 mg/ml (0,4 à 4 mM)
Solution de travail : Il est recommandé d′ajouter un solvant dans les tampons aqueux ou l′eau distillée jusqu′à 100 mg/ml.
Conditions de stockage (solution de travail) : de -15 à -25 °C (solution mère).
La stabilité de Pefabloc SC en solution aqueuse est affectée par le pH et la température. Conservées en aliquotes, les solutions mères concentrées (par exemple 100 mM) préparées dans de l′eau distillée sont acides et stables 1 à 2 mois entre -15 et -25 °C.
Remarque : Conservez Pefabloc SC en milieu acide et ajoutez-le aux échantillons biologiques juste avant utilisation, afin de réduire au minimum l′hydrolyse.
Solution de travail : Il est recommandé d′ajouter un solvant dans les tampons aqueux ou l′eau distillée jusqu′à 100 mg/ml.
Conditions de stockage (solution de travail) : de -15 à -25 °C (solution mère).
La stabilité de Pefabloc SC en solution aqueuse est affectée par le pH et la température. Conservées en aliquotes, les solutions mères concentrées (par exemple 100 mM) préparées dans de l′eau distillée sont acides et stables 1 à 2 mois entre -15 et -25 °C.
Remarque : Conservez Pefabloc SC en milieu acide et ajoutez-le aux échantillons biologiques juste avant utilisation, afin de réduire au minimum l′hydrolyse.
Reconstitution
Produit soluble dans l′eau et les tampons aqueux jusqu′à 100 mg/ml. Produit stable en aliquotes à une température de -15 à -25 °C pendant 1 à 2 mois. Seule une légère hydrolyse se produit en conditions faiblement basiques (pH 8,0 à 9,0).
Autres remarques
Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.
Informations légales
Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Classification des risques
Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1B
Code de la classe de stockage
8A - Combustible, corrosive hazardous materials
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Certificats d'analyse (COA)
Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".
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