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ABN1727

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-CASZ1

from guinea pig

Synonyme(s) :

Zinc finger protein castor homolog 1, Castor-related protein, CASZ1V1, CASZ1V2, Putative survival-related protein, Zinc finger protein 693

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702

Source biologique

guinea pig

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

unpurified

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

polyclonal

Espèces réactives

mouse, human

Technique(s)

immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

ambient

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... CASZ1(54897)
mouse ... Casz1(69743)

Description générale

L'homologue 1 de la protéine Castor à doigts de zinc (UniProt Q9CWL2 ; également nommée protéine associée à Castor, protéine putative associée à la survie, protéine 693 à doigt de zinc) est codée par le gène Casz1 (également nommé Cst, D4Ertd432e, Kiaa3026, Srg, Znf693) (identifiant du gène 69742) chez les espèces murines. Initialement identifiée comme un produit du gène Drosophila caster impliqué dans la détermination du devenir neural, la protéine CASZ1 des mammifères joue un rôle crucial dans le développement de divers types de cellules et tissus, y compris du cerveau et du cœur. La protéine CASZ1 cible et promeut directement la transcription d'EGFL7 dans les cellules endothéliales, stimulant l'assemblage et la morphogenèse des vaisseaux médiés par EGFL7/RhoA. Les cellules humaines et murines expriment deux isoformes/variants épissés de CASZ1 (CASZ1a/CASZ1V1 et CASZ1b/CASZ1V2 ; également nommés hCASZ11 et hCASZ5 chez l'être humain) ; la plus grande isoforme comporte huit doigts de zinc de type C2H2, tandis que l'isoforme courte ne contient que les quatre premiers doigts de zinc. La perte d'expression de CASZ1 est observée dans les tumeurs de type neuroblastome chez des patients ayant un pronostic défavorable ; à l'inverse, la restauration de l'expression de CASZ1a/CASZ1V1 ou CASZ1b/CASZ1V2 supprime la croissance tumorale des neuroblastomes dans les cultures. De plus, il a été démontré que CASZ1b/CASZ1V2 se lie aux histones et interagit avec le complexe NuRD (remodelage des nucléosomes et désacétylase) et avec les protéines de réparation de l'ADN. L'inactivation de la liaison des protéines H3/de réparation de l'ADN ou du complexe NuRD à CASZ1b/CASZ1V2 a fortement réduit son activité transcriptionnelle.

Spécificité

Cet antisérum polyclonal de cochon d'Inde a marqué uniquement les cellules exprimant CASZ1, et non les cellules avec inactivation du gène Casz1, dans des coupes de tissu de rétine d'embryons de souris E17.5 [avec la permission de Pierre Mattar, Christine Jolicœur et Michel Cayouette, Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), Canada]. Des régions de l'épitope sont présentes dans les deux isoformes/variants épissés de CASZ1 (CASZ1V1 et CASZ1V2) de la protéine humaine et de souris décrite par UniProt (Q86V15 et Q9CWL2). Les isoformes/variants épissés humains 1 et 2 sont également appelés hCASZ11 et hCASZ5, respectivement.

Immunogène

Un mélange de trois peptides représentant deux séquences internes N-terminales du premier doigt de zinc et une troisième séquence dans la région située entre le troisième et le quatrième doigt de zinc.

Application

Analyse par immunocytochimie : une dilution au 1/1 000e d'un lot représentatif a permis de marquer des cellules NIH/3T3 transfectées fixées au paraformaldéhyde 4 % et perméabilisées avec 0,4 % de Triton X-100 pour exprimer l'un des deux variants épissés de CASZ1 de souris par immunocytochimie par fluorescence [avec la permission de Pierre Mattar, Christine Jolicœur et Michel Cayouette, Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), Canada].

Analyse par immunofluorescence : une dilution au 1/1 000e d'un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité de CASZ1 uniquement parmi les cellules négatives pour EYFP, mais pas dans les cellules avec inactivation de Casz1 positives pour EYFP, par coloration immunohistochimique à fluorescence dans des cryocoupes de rétine fixées au paraformaldéhyde 4 % d'embryons de souris transgéniques E17.5 porteuses des allèles Casz1 floxés et d'un allèle rapporteur stop::EYFP floxé au niveau de ROSA26, ainsi que l'expression de la CRE recombinase induite par le promoteur Pax6 pour permettre l'inactivation de Casz1 spécifique au tissu (conditionnelle) [avec la permission de Pierre Mattar, Christine Jolicœur et Michel Cayouette, Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), Canada].

Analyse par immunoprécipitation : 5 µl d'un lot représentatif ont permis d'immunoprécipiter CASZ1 dans 1 mg d'extrait de rétine de souris [avec la permission de Pierre Mattar, Christine Jolicœur et Michel Cayouette, Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), Canada].

Analyse par western blotting : une dilution au 1/1 000e d'un lot représentatif a permis de détecter les deux variants épissés de CASZ1 (CASZ1V1 et CASZ1V2) d'origine humaine ou de souris dans 20 µg de lysat des transfectants HEK293T respectifs [avec la permission de Pierre Mattar, Christine Jolicœur et Michel Cayouette, Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), Canada].

Analyse par western blotting : une dilution au 1/500e d'un lot représentatif a permis de détecter une bande immunoréactive de CASZ1 dans de l'extrait de rétine embryonnaire de souris E17.5, mais pas dans un lysat de cellules HEK293 non transfectées [avec la permission de Pierre Mattar, Christine Jolicœur et Michel Cayouette, Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), Canada].
Domaine de recherche
Neurosciences
L'anti-CASZ1, réf. ABN1727, est un anticorps polyclonal de cochon d'Inde hautement spécifique qui cible l'homologue 1 de la protéine Castor à doigts de zinc, testé en immunocytochimie, immunofluorescence et western blotting.

Qualité

Produit évalué par analyse par western blotting de CASZ1 d'être humain et de souris.

Analyse par western blotting : une dilution au 1/5 000e de cet antisérum a permis de détecter les deux variants épissés de CASZ1 (CASZ1V1 et CASZ1V2) d'origine humaine ou de souris dans 10 µg de lysat des transfectants HEK293T respectifs.

Description de la cible

Poids réel (observé) : env. 190/125 kDa. Poids théorique (calculé) : 190,1/124,8 kDa (isoforme humaine 1/2), 191,2/125,6 kDa (isoforme de souris 1/2). Des bandes non caractérisées peuvent être observées avec certains lysats.

Forme physique

Anticorps polyclonal de cochon d'Inde contenant 0,05 % d'azoture de sodium
Format : produit non purifié
Produit non purifié.

Stockage et stabilité

Stable à -20 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.
Recommandations relatives à la manipulation du produit : dès réception, et avant le retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


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