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17-285

Sigma-Aldrich

Kit plasmide rapporteur TCF

Set of transfection grade T cell factor (TCF) reporter plasmids for use in TOPFlash and FOPFlash wnt/b-catenin activity assays.

Synonyme(s) :

TOPFlash/FOPFlash, TOPFlash plasmid, FOPFlash plasmid

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About This Item

Code UNSPSC :
12161503
eCl@ss :
32161000
Nomenclature NACRES :
NA.51

Niveau de qualité

Fabricant/nom de marque

Upstate®

Technique(s)

transfection: suitable

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Application(s)

genomic analysis

Conditions d'expédition

dry ice

Description générale

FOPflash : Plasmide rapporteur du facteur des lymphocytes T (TCF) de qualité transfection contenant deux copies complètes et une copie incomplète du site de liaison au TCF (muté) suivies de trois copies en sens inverse, en amont du promoteur minimal des thymidines kinases (TK) et du cadre de lecture ouvert de la luciférase. Ce plasmide sert de témoin négatif à TOPflash qui contient des sites de liaison au TCF de type sauvage.

TOPflash : Plasmide rapporteur du facteur des lymphocytes T (TCF) de qualité transfection contenant deux jeux (avec le second jeu en sens inverse) de trois copies du site de liaison au TCF (type sauvage) en amont du promoteur minimal des thymidines kinases (TK) et du cadre de lecture ouvert de la luciférase. FOPflash contenant des sites de liaison au TCF muté est également disponible en tant que témoin négatif.

La famille Wnt code pour des glycoprotéines sécrétées impliquées dans la régulation de la croissance cellulaire, la détermination du destin cellulaire, l'organogenèse et l'oncogenèse. D'après l'analyse génétique de la signalisation wingless (wg) chez la drosophile, dans des cellules de mammifères, le signal des Wnt passe par les récepteurs de la famille "Frizzled", pour atteindre la famille "Dishevelled". Les cellules "dishevelled" (ébouriffées) régulent à la baisse l'activité de la glycogène synthase kinase-3ß (GSK-3ß). Il en résulte une stabilisation et une accumulation de la ß-caténine cytosolique, un substrat de la GSK-3ß qui, lorsqu'elle est phosphorylée par la GSK-3ß, est la cible d'une protéolyse médiée par l'ubiquitine. ßLa ß-caténine se déplace ensuite vers le noyau, où elle s'associe à des membres de la famille des régulateurs de transcription TCF/LEF, activant ainsi la transcription des gènes répondant au TCF. Ce plasmide rapporteur du TCF, avec FOPflash (réf. 21-169), permet de quantifier la signalisation Wnt/Wg dans des cellules transfectées avec ces construits.

Application

Jeu de plasmides rapporteurs du facteur des lymphocytes T (TCF) de qualité transfection pour utilisation dans les tests d'activité wnt/b-caténine TOPflash et FOPflash.

Composants

FOPflash (sites de liaison au TCF mutant) (réf. 21-169)

TOPflash (Plasmide rapporteur du TCF) (réf. 21-170)

Qualité

Produit évalué en routine par analyse de la séquence d'ADN pour confirmer l'identité des sites de liaison au TCF.

Forme physique

FOPflash, réf. 21-169, Nº de lot 30860, 5,5 kb. 5 μgADN purifié par affinité, élué et conditionné aseptiquement dans 50 μl de Tris-HCl 10 mM à pH 8,0, et de l'EDTA 1 mM. Solution congelée.

TOPflash, réf. 21-170, Nº de lot 27752, 5,5 kb. 5 μgADN purifié par affinité, élué et conditionné aseptiquement dans 50 μl de Tris-HCl 10 mM à pH 8,0, et de l'EDTA 1 mM. Solution congelée.

Stockage et stabilité

Stable 2 ans à -20 °C à partir de la date d′expédition. Pour récupérer le maximum de produit, centrifuger les flacons d'origine après décongélation et avant de retirer le capuchon.

Informations légales

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids


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Kazumi Take et al.
Scientific reports, 7(1), 7326-7326 (2017-08-06)
CDK5 Regulatory Subunit-Associated Protein 1-like 1 (CDKAL1) was identified as a susceptibility gene for type 2 diabetes and body mass index in genome-wide association studies. Although it was reported that CDKAL1 is a methylthiotransferase essential for tRNALys(UUU) and faithful translation
F J Staal et al.
International immunology, 11(3), 317-323 (1999-04-30)
Beta-catenin is the vertebrate homolog of the Drosophila segment polarity gene Armadillo and plays roles in both cell-cell adhesion and transduction of the Wnt signaling cascade. Recently, members of the Lef/Tcf transcription factor family have been identified as protein partners
M P Coghlan et al.
Chemistry & biology, 7(10), 793-803 (2000-10-18)
Glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) is a serine/threonine protein kinase, the activity of which is inhibited by a variety of extracellular stimuli including insulin, growth factors, cell specification factors and cell adhesion. Consequently, inhibition of GSK-3 activity has been proposed to
J Roose et al.
Nature, 395(6702), 608-612 (1998-10-23)
Tcf/Lef transcription factors mediate signalling from Wingless/Wnt proteins by recruiting Armadillo/beta-catenin as a transcriptional co-activator. However, studies of Drosophila, Xenopus and Caenorhabditis elegans have indicated that Tcf factors may also be transcriptional repressors. Here we show that Tcf factors physically
M van de Wetering et al.
Cell, 88(6), 789-799 (1997-03-21)
The vertebrate transcription factors TCF (T cell factor) and LEF (lymphocyte enhancer binding factor) interact with beta-catenin and are hypothesized to mediate Wingless/Wnt signaling. We have cloned a maternally expressed Drosophila TCF family member, dTCF. dTCF binds a canonical TCF

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