P7125

Pepsin aus Schweinemagenschleimhaut

powder, ≥400 units/mg protein

• Synonym(e): Pepsin A, Pepsin aus Schweinemagen
• CAS-Nummer: 9001-75-6
• EC-Nummer: 3.4.23.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-629-3
• MDL-Nummer: MFCD00081840
• UNSPSC-Code: 12352204
• eCl@ss: 42010127
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Porcine gastric mucosa
• Qualitätsniveau: 200
• Form: powder
• Spezifische Aktivität: ≥400 units/mg protein
• Mol-Gew.: 35 kDa
• Löslichkeit: 10 mM HCl: soluble 1.0 mg/mL, clear to faintly turbid, colorless
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P00791
• Lagertemp.: 2-8°C
• Angaben zum Gen: pig ... LOC396892(396892)

Beschreibung

Anwendung

Das Enzym von Sigma wurde verwendet, um den Gesamt-Vitamin-B12-Gehalt von Lebensmitteln vor dem Gebrauch von Immunaffinitätssäulen zu bestimmen Darüber hinaus wurde es eingesetzt, um zerkleinertes Weichgewebe von Schnecken vor der Isolierung des dritten Larvenstadiums (L3) zu verdauen.

Pepsin ist eine Peptidase zum Verdau von Proteinen und kommt häufig bei der Herstellung von Fab-Fragmenten aus Antikörpern zum Einsatz. Pepsin aus der Magenschleimhaut des Schweins wurde zur Hydrolyse trockener zervikaler Proben bei Mäusen verwendet. Produkt P7125 wird in Pulverform geliefert. Produkt P7125 wurde verwendet, um DNA aus Nierenzellen zu denaturieren und um Proben aus der Pathologie von Analkanalkarzinom(ACC)-Biopsien vor der Färbung des EGFR zu verdauen.

Pepsinspaltung kann zur Herstellung von F(ab′)₂-Antikörperfragmenten eingesetzt werden. Pepsin unter: www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Biochem./physiol. Wirkung

Es spaltet nicht an Valin-, Alanin oder Glycin-Verbindungen. Z-L-Tyrosyl-L-phenylalanin, Z-L-Glutamyl-L-tyrosin und Z-L-Methionyl-L-tyrosin können als Substrate für den Pepsinverdau eingesetzt werden. Pepsin wird durch mehrere phenylalaninhaltige Peptide gehemmt.

Pepsin hydrolysiert Peptidbindungen, nicht aber Amid- oder Ester-Verbindungen. Pepsin spaltet Peptide mit einer aromatischen Säure auf beiden Seiten der Peptidbindung. Schwefelhaltige Aminosäuren erhöhen die Empfindlichkeit gegenüber Hydrolyse, wenn sie sich in der Nähe der Peptidbindung befinden. Pepsin spaltet bevorzugt an der Carboxylseite von Phenylalanin und Leucin sowie an der Carboxylseite von Glutaminsäure-Resten auf. Spaltet Phe-Val-, Gln-His-, Glu-Ala-, Ala-Leu-, Leu-Tyr-, Tyr-Leu-, Gly-Phe-, Phe-Phe- und Phe-Tyr-Bindungen in der β-Insulinkette auf.
Pepsin ist das wichtigste im Magen produzierte proteolytische Enzym. Es verdaut Proteine durch Aufspaltung der inneren Peptidverbindungen.

Bevorzugte Spaltung: hydrophobe und aromatische Reste in den Positionen P1 und P1′. Spaltet Phe-Val-, Gln-His-, Glu-Ala-, Ala-Leu-, Leu-Tyr-, Tyr-Leu-, Gly-Phe-, Phe-Phe- und Phe-Tyr-Bindungen in der β-Insulinkette auf.

Einheitendefinition

Eine Einheit erzeugt ein ΔA₂₅₃ von 0,001 pro min bei einem pH-Wert von 2,0 und einer Temperatur von 37° C, gemessen als TCA-lösliche Produkte unter Verwendung von Hämoglobin als Substrat. (Endvolumen = 16 ml. Lichtweg = 1 cm.)

Hinweis zur Analyse

Der optimale pH-Wert beträgt 2–4. Aktiv in 4 M Harnstoff und 3 M Guanidin HCl. Stabil bei 60 °C. Pepsin wird bei pH-Werten zwischen 8,0 und 8,5 irreversibel inaktiviert.

Proteinbestimmung durch E1%/280

Sonstige Hinweise

Weitere Informationen über Pepsin finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08,GHS07
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H315,H319,H334,H335
• P-Sätze: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Zielorgane: Respiratory system
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves