H6380

Hexokinase aus Saccharomyces cerevisiae

lyophilized powder, ≥350 units/mg protein, Protein ≥10 % by biuret

• Synonym(e): ATP:D-Hexose-6-phosphotransferase, Hexokinase aus Hefe
• CAS-Nummer: 9001-51-8
• EC-Nummer: 2.7.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-611-5
• MDL-Nummer: MFCD00131321
• UNSPSC-Code: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Saccharomyces cerevisiae
• Qualitätsniveau: 200
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥350 units/mg protein
• Mol-Gew.: dimer 110 kDa
• Zusammensetzung: Protein, ≥10% biuret
• Hersteller/Markenname: Sigma-Aldrich
• Methode(n): activity assay: suitable
• Farbe: white
• pH-Wert: 6
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P04806; P04807
• Anwendung(en): life science and biopharma
• Fremdaktivität: L-Glutamic dehydrogenase ≤0.05%; Creatine phosphokinase, myokinase, 6-phosphogluconic dehydrogenase and alcohol dehydrogenase ≤0.001%; Glucose-6-phosphate dehydrogenase ≤0.005%; Glutathione reductase ≤0.005%; Phosphoglucose isomerase ≤0.002%
• Lagertemp.: 2-8°C
• Angaben zum Gen: bakers yeast ... HXK1(850614) , HXK2(852639)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Forschungsbereich: Zellsignalisierung. Hexokinase (HK) aus Hefe ist ein Enzym mit 486 Aminosäuren und einer α/β-Faltung. Sie umfasst eine große und eine kleine Domäne, die durch eine aktive Furche getrennt sind. Konservierte Glycinreste sind wesentlich für die ATP- und Glucosebindung. Die zwei Isoformen sind HKI und HKII, die vom HXK1- bzw. HXK2-Gen codiert werden.

Anwendung

Hexokinase aus Saccharomyces cerevisiae wurde wie folgt verwendet:

• zur Untersuchung ihrer Amyloidfibrillen-bildenden Tendenz mittels biologisch-physikalischer Verfahren
• zur Nachverfolgung des ATP-Abbaus in Peroxisomen und Retikulozytenlysaten in Import-Assays
• bei der Synthese von Mg-ADP-Aktin aus Mg-ATP-Aktinmonomeren

Biochem./physiol. Wirkung

Hexokinase ist ein wesentliches Enzym für den Glucosemetabolismus. Das Entfernen des Gens in S. cerevisiae in Gegenwart eines hohen Glucosegehalts zeigt ein oxidatives Wachstum und führt zur Produktion von einer großen Menge Biomasse sowie einer verkürzten Diauxie. Hexokinase II ist auch an der Glucoserepression beteiligt.

Katalysiert die Phosphorylierung von D-Hexose-Zuckern an der C6-Position unter Verwendung von ATP als Phosphatquelle.

Die Phosphorylierungsrate unterscheidet sich je nach den Hexosen (pH 7,5, 30 °C).
D-Fructose K_M: 0,33 mM
D-Glucose K_M: 0,12 mM
D-Mannose K_M: 0,05 mM

Hefe-Hexokinase existiert als zwei ähnliche Isoformen, PI und PII (A und B), mit einem isoelektrischen Punkt von 5,25 bzw. 4.

Molekülmasse: ~ 54 kDa (Monomer)
~ 110 kDa (Dimer)
Optimaler pH-Wert: 7,5 bis 9,0
Extinktionskoeffizient: E^1 % = 8,85 (PI) und 9,47 (PII) bei 280 nm

Aktivatoren: Hexokinase erfordert Mg²⁺-Ionen (K_M = 2,6 mM) für die Aktivität. Hexokinase wird von Katecholaminen und damit verbundenen Verbindungen aktiviert.

Inhibitoren: Sorbose-1-Phosphat, Polyphosphate, 6-Deoxy-6-fluorglucose, 2-C-Hydroxymethylglucose, Xylose, Lyxose und thiolreaktive Verbindungen (Hg²⁺ und 4-Chlormercuribenzoat)

Einheitendefinition

Eine Einheit phosphoryliert je Min. bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C 1,0 μmol D-Glucose, sofern nachstehend nicht anders angegeben.

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver, das Phosphat/Citrat enthält, pH-Wert etwa 7,0.

Sonstige Hinweise

Hauptsächlich in der PII-Isoform; hergestellt aus einem überexprimierenden Hefestamm.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)