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Merck

MABE419

Sigma-Aldrich

Anti-m3G-Cap-m7G-Cap-Antikörper, Klon H-20

clone H-20, from mouse

Synonym(e):

Anti-m3G/m7G-cap, Clone H-20 Anti-m3G-cap, m7G-cap Detection Antibody

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Biologische Quelle

mouse

Qualitätsniveau

Antikörperform

purified immunoglobulin

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

H-20, monoclonal

Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie)

all

Methode(n)

dot blot: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

Isotyp

IgG1κ

Versandbedingung

wet ice

Posttranslationale Modifikation Target

unmodified

Allgemeine Beschreibung

Die Nukleotidstruktur mit der Bezeichnung 2,2,7-Trimethylguanosin(m3G)-enthaltende Cap-Struktur kleiner nukleärer Ribonukleoproteinpartikel bzw. UsnRNP ist ein wesentlicher Bestandteil der mRNA-Prozessierung. Jeder snRNP-Partikel besteht aus einem (U1, U2 und U5) oder zwei (U4/U6) snRNA-Molekülen, einen gemeinsamen Satz von acht Kernproteinen (B, B9, D1, D2, D3, E, F und G, auch bezeichnet als Sm-Proteine), die an jede der 2,2,7-Trimethylguanosin(m3G)-Cap enthaltenden snRNAs U1, U2, U4 und U5 gebunden sind, sowie mehreren Proteinen, die spezifisch mit den einzelnen UsnRNPs assoziiert sind. Mit Ausnahme von snRNP U6, das den Kern nicht verlässt, erfordert die Synthese dieser UsnRNPs den bidirektionalen Transport der snRNA durch die Kernhülle. Die snRNAs U1, U2, U4 und U5 werden im Zellkern mit einer 7-Monomethylguanosin(m7G)-Cap-Struktur synthetisiert, wohingegen die Sm-Proteine im Zytoplasma gespeichert werden und nicht in den Zellkern migrieren, wenn keine gebundene UsnRNA vorhanden ist. Stattdessen werden neu transkribierte UsnRNAs vorübergehend in das Zytoplasma exportiert, wo die Sm-Proteine die Sm-Stelle der snRNA binden und einen Ribonukleoprotein-Komplex bilden, der als Sm-Kern bezeichnet wird. Eine stabile Assoziation aller Sm-Proteine ist essenziell für die Hypermethylierung des m7G-Cap zur m3G-Cap-Struktur. Nach diesem Ereignis und der Prozessierung der snRNAs werden die reifen snRNP-Partikel rezeptor- und energieabhängig in den Zellkern zurücktransportiert und der vollständige Partikel wird gebildet. Monoklonaler H-20 erkennt sowohl m3G-Cap-haltige snRNPs als auch Strukturen mit m7G-Cap und sollte breite Anwendung finden, nicht nur bei molekularbiologischen und immunologischen Untersuchungen der UsnRNPs verschiedener Organismen, sondern auch bei der Charakterisierung und Isolierung von Transkripten mit m7G-Cap.

Immunogen

Humanes m3G-Cap und m7G-Cap

Anwendung

Der Anti-m3G-Cap-m7G-Cap-Antikörper (Klon H-20) ist ein monoklonaler Maus-Antikörper, der für die Verwendung in Dot Blot, IP, Western Blotting und ICC validiert wurde.
Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion
Forschungsunterkategorie
Chromatin-Biologie
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von Xenopus-EF-1a mit m3G-Cap und m7G-Cap durchgeführt , das 4 µg HeLa-Gesamt-RNA zugegeben wurde.

Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge aus einem unabhängigen Labor wurde m3G-Cap in m3G-Cap-snRNAs aus HeLa-Kernextrakten nachgewiesen (Bochnig, P., et al. (1987). Eur J Biochem. 168(2):461–467.).

Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge aus einem unabhängigen Labor wurde eine Immunpräzipitation von m3G-Cap aus präfraktionierten HeLa-S100-Extrakten durchgeführt (Huber, J., et al. (1998). EMBO J. 17(14):4114–4126.).

Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge aus einem unabhängigen Labor wurde m3G-Cap in m3G-Cap-U1-snRNPs aus Digotin-permeabilisierten HeLa-Zellen nachgewiesen (Bochnig, P., et al. (1987). Eur J Biochem. 168(2):461–467).

Qualität

Beurteilt mittels Dot Blot von in vitro transkribierter RNA ohne und mit m7G-Cap.

Dot-Blot-Analyse: Mit 1 µg/ml dieses Antikörpers wurde m7G-Cap in in vitro transkribierter m7G-Cap-haltiger RNA nachgewiesen.

Physikalische Form

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG1κ in Puffer mit PBS und 0,05 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt
Über Protein G aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.
Empfehlungen zur Handhabung: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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A monoclonal antibody against 2,2,7-trimethylguanosine that reacts with intact, class U, small nuclear ribonucleoproteins as well as with 7-methylguanosine-capped RNAs.
Bochnig, P, et al.
European Journal of Biochemistry, 168, 461-467 (1987)
Yasutoshi Akiyama et al.
RNA biology, 17(8), 1116-1124 (2020-03-03)
Recent transcriptome-wide studies have identified a diverse pool of transfer RNA (tRNA)-derived RNAs or tRNA-derived fragments (tRFs). Some of these RNAs have been demonstrated to be functional and involved in multiple biological processes ranging from the regulation of gene expression
Abhijit S Deshmukh et al.
Scientific reports, 6, 35288-35288 (2016-10-21)
Cyclin-dependent kinase 7 in conjunction with CyclinH and Mat1 activates cell cycle CDKs and is a part of the general transcription factor TFIIH. Role of Cdk7 is well characterized in model eukaryotes however its relevance in protozoan parasites has not
J Huber et al.
The EMBO journal, 17(14), 4114-4126 (1998-07-22)
The nuclear import of the spliceosomal snRNPs U1, U2, U4 and U5, is dependent on the presence of a complex nuclear localization signal (NLS). The latter is composed of the 5'-2,2,7-terminal trimethylguanosine (m3G) cap structure of the U snRNA and
Francesco Neri et al.
Nature, 543(7643), 72-77 (2017-02-23)
In mammals, DNA methylation occurs mainly at CpG dinucleotides. Methylation of the promoter suppresses gene expression, but the functional role of gene-body DNA methylation in highly expressed genes has yet to be clarified. Here we show that, in mouse embryonic

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