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Merck

17-10245

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ Histon H3.3 - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from rabbit, purified by affinity chromatography

Synonym(e):

Histone H3.3

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

Biologische Quelle

rabbit

Qualitätsniveau

Klon

polyclonal

Aufgereinigt durch

affinity chromatography

Speziesreaktivität

mouse, human

Hersteller/Markenname

ChIPAb+
Upstate®

Methode(n)

ChIP: suitable
dot blot: suitable
western blot: suitable

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

dry ice

Angaben zum Gen

human ... H3F3B(3021)

Allgemeine Beschreibung

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-Histon H3.3-Set enthält den Histon H3.3-Antikörper, ein normales Kaninchen-IgG und Kontrollprimer, die eine 87-bp-Region der ChIP-Primer, GAPDH-Kodierungsregion D2, human, amplifizieren. Histon H3.3 und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von Histon H3.3-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Spezifität

Aufgrund der Sequenzhomologie von 100 % ist eine weitreichende artenübergreifende Kreuzreaktivität zu erwarten.
Dieser Antikörper erkennt humanes Histon H3.

Immunogen

Epitop: A.S. 85-105
KLH-konjugiertes lineares Peptid, das humanem Histon H3.3 entspricht.

Anwendung

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG oder 2 µg Anti-Histon H3.3 und dem Magna ChIP A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Histon H3.3 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, GAPDH-Kodierungsregion D2 als positiver Stelle und Beta-Aktin-Promotor-Primern als negative Stelle verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
HeLa-Säureextrakt wurde mit Anti-Histon H3.3 (1 µg/ml) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG-Sekundärantikörper vom Esel und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.
Der Pfeil zeigt Histon H3.3 (~17 kDa). (Abbildung 3).
Dot Blot:
Daten einer repräsentativen Charge.
Auf PVDF getropftes rekombinantes H3.2 und H3.3 (1, 10, 100, 1000 ng Histon je Platz). Nachweis mit 0,5 µg/ml eines H3.3-Antikörpers in TBS-T, 5 % Milch. (Abbildung 4)
Bild mit freundlicher Genehmigung von Simon Elsässer aus dem Labor von David Allis, Rockefeller University, New York, USA.
Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-Histon H3.3-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.
Forschungs-Unterkategorie
Histone
Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Verpackung

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: ~2 μg Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Qualität

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG oder 2 µg Anti-Histon H3.3-Antikörper und dem Magna ChIP® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Histon H3.3-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, GAPDH-Kodierungsregion D2, verifiziert (Abbildung 1).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ ChIP (Katalognr. 17-371).

Zielbeschreibung

~17 kDa gemessen

Physikalische Form

Affinitätsgereinigt
Anti-Histon H3.3 (Kaninchen, polyklonal). Ein Fläschchen mit 50 µg aufgereinigtem polyklonalem Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl und 0,05 % Natriumazid vor der Zugabe von Glycerin zu 30 %. Bei -20 °C aufbewahren.
Konzentration: 0,7 mg/ml
Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 µg Kaninchen-IgG in 125 µl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
Kontrollprimer, GAPDH-Kodierungsregion D2, human. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für die humane GAPDH-Kodierungsregion. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: GCC ATG TAG ACC CCT TGA AGA G
REV: ACT GGT TGA GCA CAG GGT ACT TTA T

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis: Ein Abfall der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchen-IgG und für die humane GAPDH-Kodierungsregion spezifische Primer.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 2

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


Analysenzertifikate (COA)

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