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Albúminas y proteínas transportadoras

La seroalbúmina bovina (BSA) es una importante proteína transportadora, patrón proteico y suplemento para cultivo celular

Muchas moléculas son inestables o insolubles cuando no están formando complejos. In vitro, las albúminas y otras proteínas transportadoras se utilizan a menudo para unir, secuestrar y estabilizar una serie de importantes moléculas pequeñas y proteínas. Las albúminas son proteínas hidrosolubles simples que se encuentran en los líquidos y tejidos animales, y en menor medida en las plantas. Las albúminas se utilizan en la biofabricación de anticuerpos monoclonales terapéuticos y proteínas recombinantes.

Proporcionamos albúminas para todos los requisitos de aplicación, como el cultivo celular, la cuantificación de proteínas, la estabilización enzimática, los ELISA y los procesos relacionados con los anticuerpos. Junto con albúminas de diversas procedencias, ofrecemos estas proteínas esenciales en diferentes formatos y formulaciones.


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Albúminas en cultivo celular

Las albúminas, en particular las del suero bovino (BSA), son un componente importante de muchos sistemas de cultivo celular sin suero, en particular los que utilizan hibridomas o células de ovario de hámster chino (CHO). En los medios de cultivo celular, la albúmina actúa uniéndose a, y suministrando, otras moléculas esenciales a las células en cultivo. Dado que todas las albúminas no tienen la misma eficacia en los medios de cultivo, es aconsejable elegir las que se han probado para aplicaciones de cultivo celular.

Seroalbúmina bovina (BSA)

La seroalbúmina bovina (BSA) es un reactivo esencial en el cultivo celular y en diversas aplicaciones proteicas.

La seroalbúmina bovina (BSA) es una proteína globular (PM de ~66 kDa) que se utiliza en numerosas aplicaciones bioquímicas debido a su estabilidad y a la ausencia de interferencias en las reacciones biológicas. La estructura de la BSA es una cadena polipeptídica única compuesta por unos 583 residuos de aminoácidos y sin carbohidratos. Obtenga más información sobre la estructura proteica, el peso molecular, las propiedades y las aplicaciones de la BSA en nuestra guía de propiedades físicas y aplicación de la BSA.

La BSA es el caballo de batalla clásico de las albúminas utilizadas en numerosas aplicaciones. Nuestros diversos formatos de seroalbúmina bovina tienen purezas que oscilan entre el 95 y el 99 %. Fabricamos y distribuimos seroalbúminas purificadas mediante una variedad de métodos primarios, como el verdadero método de fraccionamiento de Cohn, los métodos de fraccionamiento en etanol modificados, el fraccionamiento térmico y la cromatografía. Otras etapas de purificación pueden ser la cristalización o la filtración en carbón activado. Para mayor comodidad, nuestras BSA se definen por método de preparación:

 

  • La purificación cromatográfica de la albúmina suele producir una conformación proteica nativa mucho más conservada que los métodos de fraccionamiento con etanol y choque térmico.
  • El método de fraccionamiento en etanol y por choque térmico combina ambos procesos utilizando el fraccionamiento de Cohn para realizar la purificación inicial seguida de una etapa de calor para purificar aún más la albúmina hasta ≥ un 99 % mediante electroforesis en agarosa.
  • El fraccionamiento en etanol es un método de fraccionamiento que incluye el ajuste de la concentración, el pH y la temperatura del etanol. A diferencia del método de choque térmico, este proceso se mantiene a una temperatura baja, lo que garantiza unas condiciones no desnaturalizantes de las proteínas y conserva la estructura y la función de la albúmina nativa.
  • El proceso de fraccionamiento por choque térmico de ajuste del calor y el pH se basa en la adición de un estabilizador de proteínas. Este estabilizador permite que la albúmina tolere una temperatura de > 65 °C. La mayoría de las otras proteínas plasmáticas se desnaturalizan y precipitan durante este proceso, lo que produce una albúmina con mayor pureza.

Seroalbúmina humana (HSA)

La seroalbúmina humana (HSA) es la proteína más abundante en el plasma humano, con un peso molecular de ~66 kDa (en función de la composición de los aminoácidos). La seroalbúmina puede denominarse fracción V de Cohn. Esta convención de denominación se toma del método original de Cohn de fraccionamiento de las proteínas séricas mediante precipitación en etanol frío, ya que la albúmina sérica se encontró en la quinta fracción de etanol utilizando dicho método. Desde entonces, algunos han venido utilizando la expresión «Fracción V de Cohn» para describir la seroalbúmina, con independencia del método de preparación. Producimos seroalbúminas humanas utilizando un proceso de fraccionamiento en alcohol frío derivado del método tradicional de Cohn, así como del método de choque térmico, y ofrecemos versiones nativas y recombinantes de la HSA en polvo y en disolución.

Otras albúminas

Nuestra cartera de productos contiene otras albúminas para aplicaciones específicas que requieren proteínas humanas y otras no bovinas. Las albúminas recombinantes humanas y la albúmina sin componentes de origen animal (ACF) se suministran en tampones acuosos o en polvo liofilizado. Entre las albúminas de otras especies disponibles se cuentan las procedentes de las siguientes fuentes:

  • clara de huevo de pollo
  • suero de ratón
  • suero de rata
  • suero porcino
  • suero ovino

Nuestras albúminas son de gran pureza y solubilidad superior, lo que garantiza un bajo ruido de fondo en los análisis de cuantificación de proteínas y una reducción al mínimo de la interferencia en los bioprocesos.

Transferrinas y sustitutos de la transferrina

Las células necesitan hierro para captar el oxígeno presente en el entorno extracelular. Las transferrinas son glucoproteínas de cadena única presentes en el suero que facilitan la captación de hierro del medio de cultivo y su posterior transporte intracelular.  La transferrina es el método fisiológicamente óptimo para suministrar hierro a las células en cultivo y, por consiguiente, ha sido fundamental en la elaboración de productos biofarmacéuticos como los anticuerpos monoclonales. Sin embargo, los sistemas que no contienen productos de origen animal, de menor riesgo, han impulsado la adopción de moléculas pequeñas alternativas a la transferrina en la biofabricación. Muchas de esas alternativas a la transferrina son quelantes de hierro, que deben utilizarse con protocolos adecuados en los sistemas de cultivo, ya que muchas no gestionan el ciclo rédox del hierro y, por tanto, pueden contribuir al estrés oxidativo.  Nuestros reactivos para cultivo celular incluyen una selección completa de transferrinas y sustitutos de la transferrina. 




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