T4674
Tripsina solution from porcine pancreas
sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 25 g porcine trypsin per liter in Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red
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About This Item
Productos recomendados
biological source
Porcine pancreas
Quality Level
sterility
sterile-filtered
product line
BioReagent
form
solution
mol wt
23.4 kDa
technique(s)
cell culture | mammalian: suitable
impurities
Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)
pH
7.6
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
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Application
Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.
Biochem/physiol Actions
La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.
Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.
Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.
Caution
Este producto debe conservarse congelado a -20°C.
Unit Definition
Una unidad BAEE producirá un A253 de 0,001 por minuto a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato.
Preparation Note
Se trata de una disolución de tripsina porcina 25 g/l en la disolución salina equilibrada de Hank con rojo fenol.
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signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Skin Sens. 1
Storage Class
10 - Combustible liquids
wgk_germany
WGK 3
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
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Protocolos
Trypsin may be used to remove adherent cells from a culture surface. Cells are most commonly removed from the culture substrate by treatment with trypsin or trypsin/EDTA solutions.
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Trypsin is an enzyme in the serine protease class that consists of a polypeptide chain of 223 amino acid residues. Multiple sources, grades and formulations of trypsin specifically designed for research applications are available.
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