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MilliporeSigma

T1005

Sigma-Aldrich

Tripsina from bovine pancreas

Type XI, lyophilized powder, ≥6,000 BAEE units/mg protein

Sinónimos:

Serine Protease 1

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About This Item

Número de CAS:
Comisión internacional de enzimas:
EC Number:
MDL number:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.78

biological source

bovine pancreas

Quality Level

type

Type XI

form

lyophilized powder

specific activity

≥6,000 BAEE units/mg protein

mol wt

23.8 kDa

composition

protein, 90-100%

impurities

salt, essentially free

solubility

hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear

foreign activity

Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein

storage temp.

−20°C

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Application

Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.
Trypsin from bovine pancreas has been used:-
  • For Trypsinization, for eliminating the membrane bound alloantigen.
  • For incubating 20-kD amylase-binding component, to evaluate its Chemical nature.
  • To prepare lactoferrin degradation products for evaluating its antiadipogenic activity.

Biochem/physiol Actions

La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.

Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.

Components

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Caution

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca2+ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Unit Definition

Una unidad BAEE producirá un A253 de 0,001 por minuto a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato.

Preparation Note

This product is from pancreas sourced from New Zealand. It is soluble in 1 mM HCl at 1 mg/mL.

pictograms

Health hazardExclamation mark

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

Storage Class

11 - Combustible Solids

wgk_germany

WGK 1

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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H Wagner et al.
The Journal of experimental medicine, 148(6), 1523-1538 (1978-12-01)
Secondary murine cytotoxic T lymphocyte responses from alloantigen-primed T cells can be induced in vitro by apparently unrelated regimens, such as addition of either concanavalin A (Con A), conditioned medium from Con A stimulated lymphocyte cultures, conditioned medium from secondary
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Kenneth N Grisé et al.
Stem cell research & therapy, 12(1), 83-83 (2021-01-27)
Adult mammalian retinal stem cells (RSCs) readily proliferate, self-renew, and generate progeny that differentiate into all retinal cell types in vitro. RSC-derived progeny can be induced to differentiate into photoreceptors, making them a potential source for retinal cell transplant therapies.

Protocolos

This procedure is for products with a specification for Trypsin activity using Na-Benzoyl-L-arginine ethyl ester (BAEE) as a substrate. The procedure is a continuous spectrophotometric rate determination (A253, Light path = 1 cm).

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Trypsin is an enzyme in the serine protease class that consists of a polypeptide chain of 223 amino acid residues. Multiple sources, grades and formulations of trypsin specifically designed for research applications are available.

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