TAQL-RO

ADN polimerasa Taq, 1 U/μl

suitable for PCR, hotstart: no, dNTPs included: no

• Sinónimos: amplificación del adn, extensión del cebador, pcr, polimerasa
• Comisión internacional de enzimas: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC Code: 41106300

Propiedades

• biological source: bacterial (Thermus aquaticus BM)
• Quality Level: 100
• recombinant: expressed in E. coli
• form: liquid
• usage: sufficient for ≤2,000 reactions (11647687001); sufficient for ≤500 reactions (11647679001)
• specific activity: 1 U/μL
• mol wt: ~95 kDa
• feature: dNTPs included: no; hotstart: no
• packaging: pkg of 1,000 U (11647687001 [4 x 250 U]); pkg of 250 U (11647679001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 25 U/mL; 30 U/mL
• parameter: 72 °C optimum reaction temp.
• technique(s): PCR: suitable
• color: colorless
• input: purified DNA
• optimum pH: ~9.0 (20 °C)
• solubility: water: miscible
• suitability: suitable for PCR; suitable for molecular biology
• NCBI accession no.: AAA27507; ; ; AAA27507
• UniProt accession no.: P19821
• application(s): genomic analysis; life science and biopharma
• foreign activity: Endonucleases 20 units, none detected; Nicking activity 20 units, none detected
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

La enzima se clonó en E.coli y se aisló para que no tuviera endonucleasas ni exonucleasas inespecíficas según los procedimientos actuales de control de calidad. La ADN polimerasa Taq es una ADN polimerasa 5′-3′ con gran capacidad de procesamiento que carece de actividad exonucleasa 3′-5′. Consiste en un polipéptido monocatenario con un peso molecular de aproximadamente 95 kDa. La enzima exhibe la mayor actividad a un pH de alrededor de 9 (ajustado a 20 °C) y a temperaturas de entorno a +75 °C. La ADN polimerasa Taq también acepta trifosfatos de desoxirribonucleósidos modificados como sustratos, y pueden ser utilizados para marcar fragmentos de ADN con radionucleótidos, digoxigenina, fluoresceína o biotina.
La elevada procesividad, la ausencia de actividad exonucleasa y la temperatura óptima de la ADN polimerasa Taq permite la utilización de esta enzima en la secuenciación del ADN, en especial cuando la resolución de las estructuras secundarias desempeña un papel principal.

Application

Esta menor concentración de nuestra ADN polimerasa Taq permite el pipeteo de pequeñas cantidades de la polimerasa con gran precisión y comodidad. En todos los demás aspectos, esta preparación es idéntica a nuestra preparación de mayor concentración (5 Uμl) y puede utilizarse para:

• PCR
• RT-PCR
• Otras reacciones de ampliación de cebador, como la secuenciación y el marcaje

Packaging

1 kit que contiene 4 componentes

Unit Definition

Una unidad de ADN polimerasa Taq se define como la cantidad de enzima que incorpora 10 nmol de trifosfatos de desoxirribonucleósidos totales en ADN precipitable en ácido en 60 min a + 65 °C bajo las condiciones de ensayo indicadas antes.

Valoración unitaria: Disolución tampón de incubación:
67 mM Tris/HCl; pH 8,3/25 °C, 5 mM de MgCl₂, 10 mM mercaptoetanol, polidocanol al 0,2 %, 0,2 mg/ml de gelatina, 0,2 mM de dATP, dGTP y dTTP, y 0,1 mM de dCTP.

Procedimiento de incubación:
Se incuban M13mp9ss, cebador M13 (17mer) y 1 μCi (α^-32P) de dCTP con diluciones adecuadas de ADN polimerasa Taq en 50 μl de tampón de incubación a +65 °C durante 60 minutos. La cantidad de dNTP incorporados se determina mediante precipitación con ácido tricloroacético.

Volumen de actividad: 1 U/μl

Other Notes

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Legal Information

El uso de este producto está cubierto por reivindicaciones de patentes en Estados Unidos y las correspondientes reivindicaciones fuera de los Estados Unidos. La adquisición de este producto incluye una inmunidad limitada intransferible contra pleitos según las reivindicaciones de patentes anteriores para utilizar sólo esta cantidad de producto para la propia investigación interna del comprador. No se transfiere expresamente, por implicación ni por estoppel derecho alguno sobre otra reivindicación de patente, ni derecho de ejecución de ningún método patentado ni derecho de realización de servicios comerciales de ningún tipo, entre otros, informar de los resultados de las actividades del comprador por un precio u otra consideración comercial. Este producto está indicado solo para investigación. Los usos diagnósticos bajo patente de Roche requiere una licencia aparte de Roche. Para más información sobre las licencias de compra, contacte con el Director de Licencias, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, EE.UU.

Solo componentes del kit

• Taq DNA Polymerase 1 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Información de seguridad

• hcodes: H412
• pcodes: P273 - P501
• Hazard Classifications: Aquatic Chronic 3
• Storage Class: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk_germany: WGK 2
• flash_point_f: does not flash
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