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MilliporeSigma

SFLCKB

Roche

KAPA SYBR® FAST

suitable for qPCR, 2 ×, for LightCycler®480

Sinónimos:

LightCycler, qPCR

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About This Item

UNSPSC Code:
41106300
NACRES:
NA.55

Quality Level

usage

sufficient for 100 reactions
sufficient for 1000 reactions
sufficient for 500 reactions

shelf life

≤12 mo.

feature

dNTPs included
hotstart

packaging

kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4609)
kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4611)
kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4610)

manufacturer/tradename

Roche

concentration

2 ×

technique(s)

qPCR: suitable

input

purified DNA

compatibility

for use with Bio-Rad CFX96
for use with Bio-Rad Chromo4 (Real-Time Detector)
for use with Bio-Rad DNA Engine Opticon
for use with Bio-Rad Opticon 2
for use with Eppendorf® Mastercycler (ep realplex )
for use with Illumina Eco
for use with Roche LightCycler 1.5/2.0
for use with Roche LightCycler 480
for use with Roche LightCycler 96
for use with Roche LightCycler Nano
for use with Rotor-Gene®
for use with Smart Cycler®

detection method

SYBR® Green

storage temp.

−20°C

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General description

Los kits para PCR KAPA SYBR FAST contienen la primera ADN polimerasa creada mediante ingeniería genética a través de evolución directa para ser más tolerante a la inhibición del colorante SYBR Green I.

La robustez, procesividad y velocidad mejoradas de los kits para PCR KAPA SYBR FAST tienen como consecuencia eficiencias de amplificación uniformemente elevadas que permiten una cuantificación relativa más precisa para el análisis de la expresión génica. Los kits para qPCR KAPA SYBR FAST, desarrollados para un rendimiento óptimo en las estrictas condiciones de reacción de PCR en tiempo real, exhiben notables mejoras en la relación señal-ruido (fluorescencia), el ciclo de cuantificación (Cq), la linealidad y la sensibilidad.

Application

KAPA SYBR® FAST para LightCycler®480 se ha utilizado para:
  • Expresión génica
  • Validación de la atenuación génica
  • Validación de micromatrices
  • Análisis de genochips
  • Detección de pocas copias
  • Cuantificación absoluta de las genotecas de SNG (secuenciación de nueva generación)
  • PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR)

Features and Benefits

Cuantificar los cambios en la expresión génica con más precisión
  • Una elevada eficiencia de reacción, de entre el 95 y el 105 %, mejora la precisión y la reproducibilidad.
  • Eficiencia no sesgada a través de una amplia variedad de contenidos de GC y longitudes de amplicón.

Detecta de manera uniforme dianas difíciles y con pocas copias
  • Mejores resultados de procesividad dan lugar a Cq anteriores.
  • Mayor detección de fluorescencia entre diversas dianas ricas en AT y GC.
  • La enzima nueva es resistente a la inhibición por SYBR®.

Se realiza una PCR en tiempo real completa en solo 40 minutos
  • Tiempos de ejecución un 55 % más cortos con un protocolo de ciclado rápido.
  • Mantiene un elevado rendimiento al cambiar de los protocolos convencionales a los rápidos.

Notas rápidas:
  • Este kit contiene una enzima biotecnológica optimizada para qPCR utilizando el colorante SYBR Green I.
  • La mezcla maestra 2X contiene un tampón patentado. Junto con la nueva enzima, esto mejora la eficiencia de amplificación de dianas ricas en GC y en AT.
  • Basta una desnaturalización inicial de 20 segundos a 95 °C para la activación de la enzima. Cuando se trabaja con muestras complejas, se recomienda una desnaturalización inicial de 3 minutos.
  • Para el ciclado en 3 etapas, utilice 20 segundos para hibridación del cebador y 1 segundo para la extensión/adquisición de los datos a 72°C.
  • No hay que superar los volúmenes de reacción de 25 μl.

Quality

Todos los componentes del kit están sometidos a un estricto control de calidad funcional, carecen de actividad exonucleasa y endonucleasa contaminante detectable y cumplen estrictos requisitos con respecto a la contaminación del ADN.

Preparation Note

Asegúrese siempre de que los componentes se han descongelado por completo y se han mezclado bien antes de usarlos. La mezcla maestra para qPCR KAPA SYBR® FAST (2X) puede que no llegue a congelarse sólidamente, aunque se conserve a -20°C.

El colorante SYBR Green I contenido en la mezcla maestra para qPCR KAPA SYBR FAST (2X) y los colorantes ROX/fluoresceína (dependiendo de la configuración del kit) son sensibles a la luz. La exposición a la luz directa durante un tiempo prolongado producirá pérdida de intensidad de la señal fluorescente.

La mezcla maestra para qPCR KAPA SYBR FAST (2X) es estable durante 30 ciclos de congelación-descongelación. Hay que asegurarse de que todos los reactivos se conservan protegidos de la luz a -20°C cuando no se estén utilizando. Cuando están protegidos de la luz, los reactivos son estables en oscuridad a 4°C al menos durante una semana y pueden conservarse a esta temperatura para su utilización a corto plazo, siempre que no se contaminen con microbios o nucleasas.

Other Notes

*Para uso exclusivo en investigación. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Legal Information

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG
LightCycler is a registered trademark of Roche
Rotor-Gene is a registered trademark of Qiagen GmbH
SYBR is a registered trademark of Life Technologies
SmartCycler is a registered trademark of Cepheid, Inc.

Solo componentes del kit

Referencia del producto
Descripción

  • KAPA SYBR® FAST DNA Polymerase

  • reaction buffer

  • dNTPs

  • SYBR® Green I dye

  • MgCl2 2.5 mM

pictograms

Health hazard

signalword

Warning

hcodes

Hazard Classifications

STOT SE 2

Storage Class

12 - Non Combustible Liquids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

does not flash

flash_point_c

does not flash


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