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KAPA SYBR^® FAST One-Step

suitable for RT-PCR, 2 ×, Universal

• Sinónimos: SYBR, qPCR
• UNSPSC Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Propiedades

• Quality Level: 100
• usage: sufficient for 100 reactions; sufficient for 1000 reactions; sufficient for 500 reactions
• shelf life: ≤6 mo.
• feature: dNTPs included: no; hotstart: no
• packaging: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4650); kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4652); kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4651)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 2 ×
• technique(s): RT-PCR: suitable; qPCR: suitable
• input: purified DNA
• compatibility: for use with Agilent Mx3000P; for use with Agilent Mx3005P; for use with Agilent Mx4000; for use with Applied Biosystems^® 5700; for use with Applied Biosystems^® 7000; for use with Applied Biosystems^® 7300; for use with Applied Biosystems^® 7500; for use with Applied Biosystems^® 7700; for use with Applied Biosystems^® 7900HT; for use with Applied Biosystems^® ViiA 7; for use with QuantStudio^™; for use with StepOne^™; for use with StepOnePlus^™
• detection method: SYBR^® Green
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

Los kits para qRT-PCR en una etapa KAPA SYBR FAST están diseñados para conseguir un rendimiento óptimo en estrictas condiciones de reacción qRT-PCR, exhibiendo notables mejoras en la sensibilidad, la especificidad, la eficiencia de la reacción y la fluorescencia. El kit está optimizado para la cuantificación rápida del ARN en una etapa y un tubo, reduciendo así la variación y la contaminación experimental con un cómodo protocolo de PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR).

Los kits para qRT-PCR en una etapa KAPA SYBR FAST contienen la transcriptasa inversa M-MuLV, un inhibidor de la ARNasa y una nueva ADN polimerasa obtenida por evolución dirigida.

Application

KAPA SYBR^® FAST One-Step

• Análisis de la expresión génica.
• Detección de genes presentes en pocas copias
• Investigación de validación de micromatrices miRNA
• Validación de la atenuación génica
• PCR con transcripción inversa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR)
• Investigación de RNAi y el miRNA

Features and Benefits

Aumento de la señal y la eficiencia de la reacción

• Eficiencias de amplificación uniformemente más elevadas para una qPCR precisa.
• Valores de fluorescencia superiores, de Cq anteriores y mejores eficiencias de reacción.

Amplifica una amplia variedad de longitudes específicas.

• Rendimiento robusto e independiente del tamaño del amplicón.
• Mayor sensibilidad y reproducibilidad
• Interrogación precisa en una amplia variedad de concentraciones de muestras de ARN.

Notas rápidas:

• Este kit contiene el tipo natural de la M-MuLV y una enzima diseñada mediante ingeniería genética optimizada para qPCR utilizando el colorante químico SYBR Green I.
• La mezcla maestra 2X contiene un tampón patentado. Junto con la nueva enzima, esto mejora la eficiencia de amplificación de dianas ricas en GC y en AT.
• Utilice sólo celadores específicos de gen para la qRT-PCR en una etapa.
• Se consigue una síntesis óptima del ADNc a 42°C durante 5 minutos.
• Bastan 3 minutos a 95°C para la inactivación de la RT y la activación de la ADN polimerasa.
• Para el ciclado en 3 etapas, utilice 20 segundos para hibridación del cebador y 1 segundo para la extensión/adquisición de los datos a 72°C.
• No hay que superar los volúmenes de reacción de 25 μl.

Quality

Todos los componentes del kit son sometidos a un estricto control de calidad funcional, carecen de actividad exonucleasa y endonucleasa contaminante detectable y cumplen estrictos requisitos con respecto a la contaminación del ADN.

Preparation Note

Asegúrese siempre de que los componentes se han descongelado por completo y se han mezclado bien antes de usarlos. Puede que la mezcla maestra para qPCR KAPA SYBR^® FAST (2X) no llegue a solidificar al congelarse aunque se conserve a -20°C. La mezcla KAPA RT es sensible a la temperatura. Debe conservarse a -20°C y mantenerse en hielo durante su utilización.

El colorante SYBR Green I contenido en la mezcla maestra para qPCR KAPA SYBR FAST (2X) y los colorantes ROX/fluoresceína (dependiendo de la configuración del kit) son sensibles a la luz. La exposición a la luz directa durante un tiempo prolongado producirá pérdida de intensidad de la señal fluorescente.

La mezcla maestra para qPCR KAPA SYBR FAST (2X) es estable durante 30 ciclos de congelación-descongelación. Asegúrese de que todos los reactivos se conservan protegidos de la luz a -20°C cuando no se estén utilizando. Cuando están protegidos de la luz, los reactivos son estables en oscuridad a 4°C al menos durante una semana y pueden conservarse a esta temperatura para el uso a corto plazo, siempre que no se contaminen con microbios o nucleasas.

Other Notes

Para uso exclusivo en investigación. No indicado para procedimientos diagnósticos.

Legal Information

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Solo componentes del kit

• KAPA RT Mix
• dUTP
• KAPA SYBR^® FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^® Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Información de seguridad

• pictograms: GHS08
• signalword: Warning
• hcodes: H371
• pcodes: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Hazard Classifications: STOT SE 2
• Storage Class: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk_germany: WGK 1
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