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MilliporeSigma

RPROTKSOL-RO

Roche

Proteinasa K recombinante, calidad PCR

Solution from Pichia pastoris

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About This Item

Comisión internacional de enzimas:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.21

recombinant

expressed in Pichia pastoris

Quality Level

form

buffered aqueous solution (18 ± mg/mL; pH 7.5)

specific activity

~2.5 units/mg protein

packaging

pkg of 1.25 mL (03115887001)
pkg of 25 mL (03115844001)
pkg of 5 mL (03115828001)

manufacturer/tradename

Roche

optimum pH

6.5 and 9.5

pH range

4.0-12.5

storage temp.

2-8°C

General description

Approximately 2.5 U/mg (Chromozym assay); ≥30 U/mg hemoglobin assay. Refer to the Certificate of Analysis for specific values for the present lot.

Application

  • Esta proteinasa K de calidad para PCR es extremadamente eficaz en proteínas nativas y, por tanto, puede utilizarse para inactivar rápidamente las nucleasas endógenas como las ARNasas y las ADNasas. Esta propiedad hace que la proteinasa K sea particularmente adecuada para el aislamiento de ARN y ADN nativos de tejidos y líneas celulares.
  • La enzima promueve la lisis celular al activar un factor autolítico bacteriano.
  • La proteinasa K se utiliza también para el análisis de las estructuras de membrana al modificar las proteínas y las glucoproteínas de las superficies celulares.
  • La enzima es particularmente idónea para el aislamiento de los ácidos nucleicos para reacciones de amplificación.
  • La proteinasa K puede utilizarse también para eliminar los restos durante la preparación de la transferencia de colonias, y para tratar cortes de tejidos para asegurar la infiltración eficiente de la sonda durante la hibridación in situ.

Features and Benefits

La proteinasa K rompe las proteínas entres los aminoácidos X e Y (X--Y) cuando X = un aminoácidos alifático, aromático o hidrófobo e Y = cualquier aminoácido. La enzima es extremadamente eficaz en proteínas nativas y, por tanto, puede utilizarse para inactivar rápidamente las nucleasas endógenas como las ARNasas y las ADNasas.
  • Elija una herramienta efectiva para la preparación de la muestra. Inactiva las ADNasas y las ARNasas de muchas especies.
  • Cuente con una calidad y un rendimiento constantes. Estrictas pruebas de calidad aseguran una estabilidad óptima y un elevado rendimiento entre lotes.
  • Prepare muestras en un amplio espectro de condiciones. La robusta enzima es estable a lo largo de un amplio espectro de pH y es ideal para diversas aplicaciones.
  • Aproveche una enzima carente de contaminación. Se ha probado la ausencia de ARNasas y ADNasas en la enzima, y está prácticamente exenta de ADN. Es especialmente adecuada para el aislamiento de muestras para PCR.

Quality

Esta preparación carece de ARNasas, ADNasas y ADN, según los procedimientos de control de calidad vigentes.
Ausencia de nucleasas: Cada lote se analiza en varios sustratos para asegurar la ausencia de actividad endonucleasa, exonucleasa, ribonucleasa y melladora.
Contenida de ADN: ≤10 pg/mg de enzima (determinada por el Umbral)
Grado de contaminación microbiológica: ≤5 ufc/g (determinados mediante la prueba más estricta de la Farmacopea Europea, que permite identificar el número total de bacterias aerobias viables, levaduras y hongos)

Unit Definition

Volumen de actividad: Aproximadamente 50 U/mg de disolución (ensayo de cromozima); aproximadamente 600 U/mg de disolución (ensayo de hemoglobina). Una unidad es la actividad enzimática que hidroliza a +25 °C en 1 min, 18 mmol de Chromozym TRY (equivalente a 600 U/ml con el ensayo de hemoglobina). Consulte los valores específicos del presente lote en el Certificado de Análisis.

Preparation Note

Activador: Para estimular la actividad proteinasa K, pueden añadirse agentes desnaturalizantes (SDS y urea). Por ejemplo, el SDS a una concentración final del 2 % puede aumentar significativamente la actividad de la proteinasa K. La optimización utilizando agentes desnaturalizantes puede aumentar la actividad proteinasa en hasta siete veces.

Disolución de trabajo: Disoluciones tampón sugeridas:
El tampón más apropiado para la proteinasa K variará de una aplicación a otra. Siga siempre las directrices de pH y temperatura del campo parámetros. Como norma general, la proteinasa K es estable y muy activa en tampones que contienen reactivos desnaturalizantes como la urea, el dodecilsulfatosódico (SDS) y las sales de guanidina.

Inhibidores: La enzima es inactivada por Pefabloc® SC. Sin embargo, no es inactivada por iones metálicos, agentes quelantes (como el EDTA), reactivos sulfhidrilo o inhibidores de la tripsina y la quimiotripsina.

Other Notes

Para la inactivación rápida de las ARNasas y ADNasas.
La enzima puede reducir las proteínas a aminoácidos libres si se encuentra en gran exceso durante largos periodo de incubación.
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Legal Information

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

Storage Class

12 - Non Combustible Liquids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

No data available

flash_point_c

No data available


Certificados de análisis (COA)

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