04716728001
Roche
ADNasa I recombinante, sin ARNasa
from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
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About This Item
Productos recomendados
biological source
bovine pancreas
Quality Level
recombinant
expressed in Pichia pastoris
form
solution
mol wt
~39 kDa
packaging
pkg of 10,000 U
manufacturer/tradename
Roche
optimum pH
7.0-8.0
General description
La ADNasa I recombinante es una endonucleasa específica del ADN. La enzima cataliza la degradación aleatoria de ADN bicatenario y monocatenario hidrolizando los enlaces fosfodiéster del ADN, lo que produce una mezcla de oligonucleótidos y mononucleótidos. Todo el material utilizado durante el proceso de producción de la ADNasa I recombinante es de origen no animal, por lo que es un producto no procedente de animales.
Contenido
Contenido
- ADNasa I recombinante, sin ARNasa, 10 U/μl
- Tampón de incubación, concentrado x10
Specificity
Inactivación por calor: Una unidad de ADNasa I recombinante, sin ARNasa, se inactiva por calor durante 10 minutos de incubación a 75 °C.
Nota importante: La ADNasa I recombinante, sin ARNasa, también puede inactivarse y eliminarse mediante extracción con fenol de acuerdo con los protocolos normalizados, por ejemplo , los protocolos vigentes en biología molecular.
Nota importante: La ADNasa I recombinante, sin ARNasa, también puede inactivarse y eliminarse mediante extracción con fenol de acuerdo con los protocolos normalizados, por ejemplo , los protocolos vigentes en biología molecular.
Application
La ADNasa I recombinante sin ARNasa puede utilizarse para degradar el ADN en aplicaciones sensibles a la presencia de ARNasa. Por ejemplo, la ADNasa I suele utilizarse para:
- Retirar el ADN genómico de las preparaciones de ARN antes de una RT-PCR
- Aislar el ARN sin ADN después de las reacciones de transcripción in vitro
- Realizar desplazamiento de muescas
- Cartografiar regiones sensibles a la ADNasa en el ADN eucariótico
Features and Benefits
- Elimina la contaminación del ADN procedente de cualquier muestra de ARN
- No contiene actividad ARNasa ni proteasa detectable
- Puede ser termoinactivada, eliminando así la necesidad de extracción orgánica
- Se entrega con un tampón de incubación optimizado, que admite la máxima actividad ADNasa
- Se produce mediante un proceso totalmente libre de animales para eliminar cualquier riesgo asociado con los materiales de origen animal
Packaging
1 kit que contiene 2 componentes
Quality
Ausencia de contaminantes: Cada lote se analiza para garantizar la ausencia de ARNasas y proteasas de acuerdo con los procedimientos de control de calidad vigentes.
Specifications
Forma glucosilada
La ADNasa I recombinante está heterogéneamente N-glucosilada, por lo que aparece como dos bandas en la electroforesis en gel.
Requisito de iones divalentes
La ADNasa I requiere cationes divalentes para su máxima actividad. Iones como el magnesio activan la endonucleasa específica del ADN y los iones calcio la estimulan. Por consiguiente, la enzima es inhibida por quelantes metálicos como el EDTA.
La ADNasa I recombinante está heterogéneamente N-glucosilada, por lo que aparece como dos bandas en la electroforesis en gel.
Requisito de iones divalentes
La ADNasa I requiere cationes divalentes para su máxima actividad. Iones como el magnesio activan la endonucleasa específica del ADN y los iones calcio la estimulan. Por consiguiente, la enzima es inhibida por quelantes metálicos como el EDTA.
Unit Definition
Una unidad es la actividad enzimática que afecta a un aumento de la absorbancia de 0,001/minuto en condiciones de ensayo en 1 ml a 260 nm.
Condiciones de ensayo:
La actividad volumétrica se determina de acuerdo con la siguiente mezcla del ensayo. Se incuban 100 μg de ADN de timo de ternero en 2,5 ml 1x de tampón de incubación con 40 a 70 unidades de ADNasa I recombinante, sin ARNasa a +25 °C. El aumento de la absorbancia se mide a 260 nm.
Condiciones de ensayo:
La actividad volumétrica se determina de acuerdo con la siguiente mezcla del ensayo. Se incuban 100 μg de ADN de timo de ternero en 2,5 ml 1x de tampón de incubación con 40 a 70 unidades de ADNasa I recombinante, sin ARNasa a +25 °C. El aumento de la absorbancia se mide a 260 nm.
Preparation Note
Activador: Iones metálicos bivalentes
Disolución de trabajo: Tampón de almacenamiento: Tris-HCl 20 mM, NaCl 50 mM, CaCl2 2 mM, MgCl2 2 mM, ditioeritritol 1 mM, 0,1 mg/ml de Pefabloc SC, glicerol al 50 % (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Tampón de incubación (x10): Tris-HCl 400 mM , NaCl 100 mM, MgCl2 60 mM, CaCl2 10 mM, pH 7.9.
Tampón de dilución enzimática: Tris-HCl 25 mM, glicerol al 50 % (v/v), pH 7.6 (a 4 °C).
Disolución de trabajo: Tampón de almacenamiento: Tris-HCl 20 mM, NaCl 50 mM, CaCl2 2 mM, MgCl2 2 mM, ditioeritritol 1 mM, 0,1 mg/ml de Pefabloc SC, glicerol al 50 % (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Tampón de incubación (x10): Tris-HCl 400 mM , NaCl 100 mM, MgCl2 60 mM, CaCl2 10 mM, pH 7.9.
Tampón de dilución enzimática: Tris-HCl 25 mM, glicerol al 50 % (v/v), pH 7.6 (a 4 °C).
Storage and Stability
Almacene la disolución enzimática sin diluir a una temperatura de -15 a -25°C; el tampón de almacenamiento a 4 °C.
Other Notes
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos de diagnóstico.
Storage Class
12 - Non Combustible Liquids
wgk_germany
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
Certificados de análisis (COA)
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DNase I from bovine pancreas is a glycoprotein of Mr 37000. A special procedure is used to remove RNases from the DNase preparation.
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