S7803

Análisis PCR específico de metilación CpG WIZ^™ MGMT

The components of the CpG WIZ MGMT Amplification Kit include those required for PCR amplification after bisulfite modification of DNA samples. Sufficient reagents are provided to analyze 25 samples.

• Sinónimos: MGMT Methylation Assay, Methylation PCR Kit
• UNSPSC Code: 12161503
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.31

Propiedades

• Quality Level: 100
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: CPGWIZ^™; Chemicon^®
• technique(s): PCR: suitable
• NCBI accession no.: NM_002412.2
• application(s): genomic analysis

Descripción

General description

Se sabe que la metilación de citosinas localizadas 5′ con respecto a la guanosina tiene un efecto profundo en la expresión de varios genes eucariotas (Bird, 1992). En las células normales, la metilación se produce predominantemente en las regiones pobres en CG, mientras que las áreas ricas en CG, conocidas como islas CpG, permanecen sin metilar. Se ha documentado que la metilación aberrante de islas CpG normalmente no metiladas es un evento relativamente frecuente en células inmortalizadas y transformadas (Antequera, 1990) y se ha asociado con la inactivación transcripcional de genes supresores de tumores definidos en cánceres humanos (Merlo, 1995). O(6)-metilguanina ADN metiltransferasa (MGMT) es un ejemplo de un gen que exhibe hipermetilación característica.



La PCR específica de metilación (MSP) es una nueva tecnología para la detección sensible de la metilación génica anómala utilizando pequeñas cantidades de ADN (Herman, 1996). En este proceso se emplea una reacción inicial con bisulfito para modificar el ADN, seguida de amplificación por PCR con cebadores específicos diseñados para distinguir el ADN metilado del no metilado.

Se sabe que la metilación de citosinas situadas 5′ con respecto a la guanosina tiene un efecto profundo en la expresión de varios genes eucariotas (Bird, 1992). En las células sanas, la metilación se produce predominantemente en las regiones pobres en CG, mientras que las áreas ricas en CG, conocidas como islas CpG, permanecen sin metilar. Se ha documentado que la metilación aberrante de islas CpG normalmente no metiladas es un evento relativamente frecuente en células inmortalizadas y transformadas (Antequera, 1990) y se ha asociado con la inactivación transcripcional de genes supresores de tumores definidos en cánceres humanos (Merlo, 1995). La O(6)-metilguanina ADN metiltransferasa (MGMT) es un ejemplo de un gen que exhibe hipermetilación característica.



La PCR específica de metilación (MSP) es una nueva tecnología para la detección sensible de metilación génica anómala utilizando pequeñas cantidades de ADN (Herman, 1996). En este proceso se emplea una reacción inicial con bisulfito para modificar el ADN, seguida de amplificación por PCR con cebadores específicos diseñados para distinguir el ADN metilado del no metilado.

Application

Los componentes del kit de amplificación CpG WIZ MGMT incluyen los necesarios para la amplificación por PCR después de la modificación con bisulfito de muestras de ADN. Se proporcionan suficientes reactivos para analizar 25 muestras.

Los componentes del kit de amplificación CpG WIZ MGMT incluyen los necesarios para la amplificación por PCR después de la modificación por bisulfito de muestras de ADN. Se proporcionan suficientes reactivos para analizar 25 muestras.

Principios de la técnica

La utilización del kit de modificación de ADN CpGenome (Nº de ref. S7820) o el kit de modificación rápido de ADN CpGENOME (Nº de ref. S7824) facilita las reacciones iniciales con bisulfito, mientras que el kit de amplificación CpG WIZ MGMT contiene los reactivos necesarios para las reacciones de amplificación mediante PCR específicas de gen.

Components

Los componentes del kit de amplificación CpG WIZ MGMT incluyen los necesarios para la amplificación por PCR después de la modificación con bisulfito de muestras de ADN. Se proporcionan suficientes reactivos para analizar 25 muestras con los controles apropiados.

Juego de cebadores U 5 μM cada cebador (x25) 35 μl (tapa neutra) 90513 -15°C a -25°C

Juego de cebadores M 5 μM cada cebador (x25) 35 μl (tapa roja) 90514 -15°C a -25°C

Juego de cebadores W 5 μM cada cebador (x25) 35 μl (tapa verde) 90515 -15°C a -25°C

ADN control U 0,1 μg/μl 50 μl (tapa blanca) 90393 -15°C a -25°C

ADN control M 0,1 μg/μl 50 μl (tapa roja) 90394 -15°C a -25°C

ADN control W 0,05 μg/μl 50 μl (tapa verde) 90395 -15°C a -25°C

Tampón universal para PCR x10 265 μl (tapa azul) 90396 -15°C a -25°C.

Los componentes del kit de amplificación CpG WIZ MGMT incluyen los necesarios para la amplificación por PCR después de la modificación por bisulfito de muestras de ADN. Se proporcionan suficientes reactivos para analizar 25 muestras con los controles apropiados.

Juego de cebadores U 5 μM cada cebador (x25) 35 μl (tapa neutra) 90513 -15°C a -25Cjuego°C

Juego de cebadores M 5 μM cada cebador (x25) 35 μl (tapa roja) 90514 -15°C a -25Cjuego°C

Juego de cebadores W 5 μM cada cebador (x25) 35 μl (tapa verde) 90515 -15°C a -25°C

ADN control U 0,1 μg/μl 50 μl (tapa blanca) 90393 -15°C a -25°C

ADN control M 0,1 μg/μl 50 μl (tapa roja) 90394 -15°C a -25°C

ADN control W 0,05 μg/μl 50 μl (tapa verde) 90395 -15°C a -25Ctampón°C

Tampón universal para PCR x10 265 μl (tapa azul) 90396 -15°C a -25°C.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

CPGWIZ is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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