PFHYS1008

Millicell^® HY Matraz para cultivo multicapa

T-1000, 5 layer, 200-300 mL, sterile, vented cap, Tissue Culture (TC)-treated surface

• Sinónimos: cultivo celular, cultivo de tejido, matraz multicapas, matraz para cultivo celular
• UNSPSC Code: 41104923
• eCl@ss: 32011202
• NACRES: NB.22

Propiedades

• material: high-density polyethylene cap; polystyrene flask
• Quality Level: 200
• sterility: sterile; γ-irradiated
• feature: 5 layer
• packaging: pack of 8
• manufacturer/tradename: Millicell^®
• parameter: 45 °C max. temp.
• technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• H: 51 mm , excluding cap; 74 mm , including cap
• L: 22.2 cm
• W: 12 cm
• surface area: 1000 cm²
• working volume: 200-300 mL
• binding type: Tissue Culture (TC)-treated surface
• shipped in: ambient

Descripción

Preparation Note

1. Para sembrar las células, rellene el matraz Millicell HYT-1000 con el medio de crecimiento deseado.
2. Agregue el número de células deseado para conseguir la densidad de siembra típica.
3. Mezcle las células y los medios elevando el extremo del matraz y pipeteando la disolución varias veces hacia arriba y hacia abajo hasta conseguir una suspensión homogénea. Nota: si no se consigue mezclar las células adecuadamente en una suspensión homogénea puede producirse una distribución desigual de las células a través de las capas del matraz Millicell HY.
4. Coloque brevemente el matraz de lado para equilibrar el volumen de líquido por igual entre las capas del matraz.
5. Incline el matraz sobre su extremo para dividir el volumen de líquido para cada capa del matraz.
6. Coloque el matraz para distribuir la suspensión celular uniformemente por toda la superficie de cada capa.
7. Dependiendo del volumen, puede ser necesario mecer el matraz en las cuatro esquinas para asegurar que toda la superficie se moje. Nota: si el volumen de líquido en cualquiera de las capas cambia durante el procedimiento de humectación (por ejemplo, derrame de líquido de la capa superior a las capas inferiores), repita los pasos 4–6 para garantizar una distribución uniforme del líquido entre todas las capas.
8. Devuelva el matraz a una posición vertical cuando lo transporte a la incubadora. Coloque el matraz plano en la incubadora (como en el paso 6) y cultive las células en las condiciones apropiadas.
9. Si se precisa cambiar los medios, aspire o vierta los medios del matraz Millicell HY T-1000. Nota: debido a la mayor superficie de los matraces Millicell, puede ser necesario dejar el matraz de lado durante varios minutos después de cada aspiración para que todo el líquido residual se acumule en un punto común, lo que permitirá una segunda aspiración para eliminar por completo el líquido restante.
10. Agregue el volumen apropiado de medio reciente y repita los pasos 4–8.
11. Para recolectar las células, retire los medios como en el paso 9.
12. Agregue la cantidad deseada de la disolución de lavado adecuada (por ejemplo, PBS o EDTA al 0,02 %) al matraz y repita los pasos 4–7.
13. Retire la disolución de lavado como en el paso 9.
14. Agregue la cantidad deseada de enzima de disociación (por ejemplo, tripsina al 0,25 %/EDTA o equivalente) según el protocolo preferido, repita los pasos 4–8 e incube. No es necesario alterar el volumen de la enzima de disociación requerida por cm² del protocolo matraz-T. Nota: asegúrese de que todas las células se hayan disociado por completo de la superficie del matraz mediante observación al microscopio. Si no se consigue la disociación completa de las células de la superficie de cultivo (de tal manera que todas las células están flotando libremente) puede que haya una reducción de los rendimientos celulares.
15. Si está utilizando tripsina, agregue el volumen deseado de disolución inactivadora, como los medios que contienen suero.
16. Recolecte las células ya sea aspirando o vertiendo, como en el paso 9.

Legal Information

Millicell is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Información de seguridad

• Storage Class: 10-13 - German Storage Class 10 to 13