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MAB3560

Sigma-Aldrich

Anticuerpo anti-8-oxoguanina, clon 483,15

ascites fluid, clone 483.15, Chemicon®

Sinónimos:

8-oxoG

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About This Item

UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

biological source

mouse

Quality Level

antibody form

ascites fluid

antibody product type

primary antibodies

clone

483.15, monoclonal

species reactivity

monkey, human, primate

species reactivity (predicted by homology)

mouse, rat

manufacturer/tradename

Chemicon®

technique(s)

ChIP: suitable
ELISA: suitable
immunocytochemistry: suitable

isotype

IgM

shipped in

dry ice

target post-translational modification

unmodified

Gene Information

human ... OGG1(4968)

General description

La 8-oxoguanina es un producto la guanina causado por daño oxidativo mutágeno. La base oxidativamente dañada 8-oxoguanina se genera en el ADN de todos los organismos vivos debido a la presencia de especies de oxígeno reactivo en las células. El daño al ADN amenaza la salud de la información genética almacenada en cada molécula de ADN; sin embargo, existen enzimas en las células para proteger contra el efecto mutágeno de esta lesión. La 8-oxoguanina es una de las lesiones más abundantes y bien caracterizadas del ADN generadas por el estrés oxidativo. Se ha estimado que ~180 guaninas se oxidan a 8-oxoG por célula de mamífero al día. La 8-oxoG es una lesión de codificación errónea que puede causar las mutaciones de transversión G:C a T:A o T:A a G:C. Esta lesión se acumula en el ADN con la edad y se ha relacionado débilmente con varios tipos de cáncer y enfermedades, como el Alzheimer y el Parkinson.

Specificity

8-oxoguanina. Por ELISA competitivo, el anticuerpo monoclonal no mostró reactividad con el dGMP, dAMP, el dCMP o TMP en concentraciones micromolares. Sólo se observó competencia cuando las concentraciones se incrementaron hasta los milimoles.

Immunogen

8-oxoguanina adsorbida en alúmina

Application

El anticuerpo anti-8-oxoguanina, clon 483.15, detecta el nivel de 8-oxoguanina y se ha publicado y validado para utilizar en ELISA e IC.
Inmunocitoquímica:
en células HeLa y Cos7 fijadas con paraformaldehído. la 8-oxoguanina se ha localizado en el núcleo de las células desprovistas de nutrientes.

ELISA:
se extrajeron células cultivadas en portaobjetos dos veces durante 30 segundos con NaCl 560 nM frío; Triton X-100 al 1 % (v/v); SDS al 0,02 % (p/v); tampón fosfato 10 mM pH 7,4 y se fijaron con PFA al 4% recién preparado durante 5-20 minutos a temperatura ambiente. {Conlon, KA et al (2000) J. Histotechnology 23(1):37-44}. La tinción típica demuestra que los núcleos de las células extraídas tienen una periferia definida y áreas de cromatina condensada. La tinción del clon 483.15 demostró una tinción fluorescente nuclear específica pero débil en células incubadas en DMEM suplementado, pero en células incubadas en disolución salina definida sin nutrientes (NFDSS) {cloruro de calcio 1,8 mM, NaCl 110 mM, bicarbonato sódico 44 mM, pH 7,5} demostró una tinción fluorescente nuclear fuerte que aparecía punteada y con distribución general. La tinción fluorescente desaparece hasta niveles de fondo en las células incubadas en medios nutritivos incluso después de los tratamientos iniciales con NFDSS {Conlon et al}.

Se utilizó un lote anterior de este anticuerpo en un ELISA.

El usuario final debe determinar las diluciones óptimas.

Quality

Evaluada habitualmente por inmunocitoquímica en células NIH/3T3.

Inmunocitoquímica:
Análisis fluorescente confocal de células NIH/3T3 con anticuerpo anti-8-oxoguanina monoclonal de ratón.

Physical form

IgM monoclonal murina no purificada líquida en tampón que no contiene conservante.

Storage and Stability

Estable durante 6 meses a -20ºC en alícuotas no diluidas desde la fecha de recepción.
Recomendaciones de manipulación: Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgM y afectar al rendimiento del producto.

Analysis Note

Control
Células HeLa o Cos7 desprovistas de nutrientes

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Storage Class

10 - Combustible liquids

wgk_germany

nwg

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable


Certificados de análisis (COA)

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