07-360

Anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys27)

serum, Upstate^®

• Sinónimos: H3K27Ac, Histone H3 (acetyl K27)
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• antibody form: serum
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: human, vertebrates, Saccharomyces cerevisiae
• species reactivity (predicted by homology): yeast (based on 100% sequence homology)
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable (ChIP-seq); dot blot: suitable; western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: P61830
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: acetylation (Lys27)
• Gene Information: human ... HIST1H3F(8968)

Descripción

General description

La histona H3 (UniProt: P61830) está codificado por el gen HHT1 (también conocido como YBR010W, YBR0201, HHT2, SIN2, YNL031C, N2749) (ID del gen: 852295) en levadura. La histona H3 es un componente central del nucleosoma. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN en la cromatina, limitando la accesibilidad del ADN a las maquinarias celulares que requieren ADN como plantilla. La histona H3 puede experimentar varias modificaciones postraduccionales que o bien activan o bien reprimen la expresión génica. La histona H3 puede experimentar mono, di o trimetilación. Se ha demostrado que la H3K27 trimetilada está estrechamente asociado con promotores génicos inactivos y que la H3K27 monometilada está asociada con promotores activos. La H3K27 dimetilada tiene un patrón de distribución similar al de la H3K27. La histona H3 también puede experimentar acetilación en la Lys9, 14, 18, 23, 27 y 56. La acetilación de la histona H3 induce activación de la transcripción. La acetilación de la histona define la apertura de la cromatina ya que las histonas acetiladas no pueden empaquetarse tan bien como las histonas desacetiladas. La H3K27ac como marca potenciadora importante que puede distinguir entre elementos potenciadores activos y estables y genes potenciadores proximales que carecen de enriquecimiento con H3K27ac muestran menores niveles de expresión en comparación con el gen potenciador proximal promedio. Se ha demostrado que las cantidades de H3K27ac disminuyen gradualmente desde la fase pronuclear más temprana hasta el estadio de 8 células, que corresponde a la principal activación del genoma embrionario (EGA), seguida por la reacetilación de la H3K27 desde el estadio de mórula en adelante que acompaña a la especificación del primer de linaje celular en embriones obtenidos mediante FIV. En Drosophila, la H3K27ac está presente en elevadas concentraciones en embriones tempranos y disminuye después de 4 horas a medida que aumenta el nivel de H3K27 trimetilada. (Ref.: Creyghton, MP et al. ( ). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 107(50); 21931-21936; Tie, F et al (2009). Dvelopment 136 (18); 3131-3141)..

Specificity

Reconoce la histona H3 acetilada en la lisina 27.

Immunogen

Epítopo: Lys27

Péptido lineal conjugado con KLH que corresponde a 11 aminoácidos de la región N-terminal de la histona H3 humana acetilada en la lisina 27.

Application

Análisis mediante secuenciación ChIP: La inmunoprecipitación de la cromatina se realizó con el kit Magna Chip HiSens (nº ref. 17-10460), 2 µl de anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys27) (nº ref. 07-360), 20 µl de microesferas de proteína A/G y cromatina de células HeLa entrecruzada 1e6 seguida de purificación del ADN con microesferas magnéticas. Los bancos se prepararon a partir de muestras de ADN de entrada y ChIP utilizando protocolos estándar con adaptadores con código de barras Illumina y se analizaron en el instrumento Illumina HiSeq. Se cartografió un exceso de catorce millones de lecturas de archivos FastQ utilizando Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) siguiendo la eliminación de etiquetas TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/). Los picos se identificaron mediante MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/), y los picos y las lecturas se visualizaron como una traza personalizada en UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) a partir de archivos Bigwig y BED. El 25 % más alto de los picos identificados en el conjunto de datos 07-360 demostró un solapamiento del 96 % con los picos identificados en la pista de histona ENCODE H3K27Ac BROAD para HeLa S3.

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

El anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys27) es un anticuerpo policlonal de conejo para la detección de la histona H3 acetilada en la lisina 27. También conocido como anti-H3K27ac, este anticuerpo se ha publicado en revistas revisadas por expertos y su especificidad se ha verificado mediante inmunotransferencia por puntos (dot blot) (DB), y se ha validado en ChIP, ChIP-seq, WB, DB, Mplex.

Subcategoría de investigación
Histonas

Quality

Evaluada mediante inmunoelectrotransferencia en extractos ácidos de células HeLa tratadas con butirato de sodio 5 mM.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Una dilución 1:5 000 de este anticuerpo detectó la acetil-histona H3 (Lys27) en extracto ácido de células HeLa tratadas con butirato de sodio 5 mM.

Target description

17 kDa

Physical form

Antisuero policlonal de conejo con azida sódica al 0,05 % y glicerol al 30 %.

Sin purificar

Storage and Stability

Mantener durante 2 años a -20°C desde la fecha de envío. Distribuir en alícuotas para evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Para la recuperación máxima del producto, debe centrifugarse el vial original después de descongelar y antes de retirar la tapa.

Analysis Note

Control
Proteínas extraídas con ácido de las células HeLa tratadas con butirato de sodio

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

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