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Merck

经典培养基和缓冲液

细胞培养基包括DMEM、RPMI、MEM、Medium 199和Ham’s制剂

现有的细胞培养基波动因子已针对各种哺乳动物细胞培养生理相关环境需求反复改良。这些培养基及其所含的盐及其成分已经过细胞培养应用反复检验,并在我们一流䣌生产设施中生产。现可基于以下指标选择适合您的应用的培养基:

  • 高或低葡萄糖浓度
  • 补充L-谷氨酰胺或Stable Glutamine
    (Ala-Gln),或不含谷氨酰胺
  • 含/不含酚红pH指示剂
  • 粉末或液体形式

DMEM(杜氏改良Eagle培养基)

在细胞和组织培养应用中,DMEM(杜氏改良Eagle培养基)是多种贴壁细胞表型最广泛使用的明确成分培养基之一。杜氏改良培养基是一种增强补剂制剂,将原Eagle培养基中的某些氨基酸和维生素含量提高了四倍。我们为此提供了一系列葡萄糖浓度及含/不含L-谷氨酰胺制剂选择。现可针对雌激素敏感应用提供不含pH指示剂酚红的产品,同时我们全面的产品线还涵盖了各种便捷的即用型液体制剂形式,以及易于存储、保质期更久的经济型粉末培养基。

RPMI 1640培养基

RPMI 1640是因为由Moore人在Roswell Park研究所开发而得名,更宜用于各类非贴壁细胞类型培养,如淋巴细胞和其他血细胞。该制剂基于采用碳酸氢盐缓冲体系的RPMI 1630系列培养基,并调整了氨基酸和维生素含量。RPMI 1640培养基现已用于培养人类正常和恶性白细胞。该制剂补充适当成分后,经证可广泛支持多种类型的培养细胞生长,包括72小时植物血凝素(PHA)刺激实验中的新鲜人淋巴细胞。

含酚红细胞培养基

DMEM/F12培养基制剂

近年来,研究人员陆续报道了采用营养素、生长因子和激素取代血清,在无血清培养基中培养各种细胞系的方法。Mather和Sato(BBRC, 1985)报道在含有胰岛素、转铁蛋白、表皮生长因子、亮氨酸激素或促卵泡激素、生长调节素和生长激素的无血清培养基中,成功培养了Leydig和Sertoli细胞。尽管其中的激素及其浓度专用于特定的细胞类型,但人们还是发现杜氏改良Eagle培养基(DMEM)与Ham‘s F-12营养混合液的1:1混合物最适于这类研究。制剂之中可加入HEPES缓冲液至终浓度15 mM,以补偿无血清造成的缓冲能力损失。

采用Stericup过滤装置无菌过滤的细胞培养基

MEM(最低必需培养基)

由NIH的Harry Eagle研发的的最低必需培养基(MEM)含有多个物种通用的必需氨基酸,是使用最广泛的合成细胞培养基之一。他在早期尝试培养正常的哺乳动物成纤维细胞和HeLa细胞的某些亚型时发现,Eagle基础培养基(BME)无法满足这类应用的特殊营养成分需求。随后对更多细胞的培养发现,在BME培养基添加特定的营养成分能够帮助更多种类要求苛刻的细胞生长。MEM培养基融合了这些改良,包括更高浓度的氨基酸,使得培养基更接近于哺乳动物细胞的蛋白组分。

MEM已广泛用于培养各种类型的单层培养细胞。通过在含有Hanks或Eagle盐的配方中选择性添加非必需氨基酸,进一步扩大了这种培养基的用途。此外,配方还进行了进一步改良,通过选择性去除钙离子以适合悬浮细胞生长。

Ham F-10和F-12培养基制剂

Ham营养混合物最初为支持中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、HeLa细胞和小鼠L细胞等多种克隆的生长而开发,但也适用于肝细胞培养、病毒融合和毒性测定。根据所培养的细胞类型,这些混合物可配制成含/不含血清补剂的制剂。

  • Ham F-10经证可支持人二倍体细胞、白细胞以及大鼠、兔和鸡组织的原始外植体生长。
  • Ham F-12已用于支持原代大鼠肝细胞和大鼠前列腺上皮细胞生长。据报道,Ham F-12还可补充25 mM HEPES缓冲液以在最适pH 7.2-7.4下提供更有效的缓冲作用,从而进行克隆毒性测定。
  • 为培养由病毒融合产生的杂交细胞,现已开发出了Ham F-12的Coon改良版。改良之处在于含有两倍氨基酸和丙酮酸,并加入了抗坏血酸并调整了盐浓度。Coon制剂中含有0.863 mg/L硫酸锌,因此可能不适合培养小鼠L细胞。
  • Ham F-12的Kaighn改良版(又称为Ham F-12K)具有更高的氨基酸和丙酮酸浓度,并改良了盐浓度(Konigsbergs制剂)。该培养基专用于支持支持分化的大鼠和鸡细胞以及原代人类肝细胞生长。

199培养基(M199)

早期组织培养基主要由动物产品和/或组织提取物配制。1950年,Morgan及其同事们报道了他们的工作——为细胞培养生产成分完全明确的营养来源培养液。他们的实验采用经证利于体外组织生长、数量可测的各类维生素、氨基酸和其他因子组合,也就是后来广为人知的199培养基。该培养基现已被广泛用于病毒学、疫苗生产、原代组织外植体培养以及小鼠胰腺上皮细胞和大鼠晶状体组织的体外培养。

研究人员最终发现,长期培养的细胞还需向培养液中添加血清补充剂。适当添加补充成分后,199培养基适用物种广泛,尤其适合培养非转化的细胞。

细胞培养基础盐混合物

D-PBS、Hanks、Earle、Tyrode─ 最全面的平衡盐组合,让您始终可找到适合自身培养应用的正确制剂。

其他经典细胞培养基

还可查找其他专用制剂,包括Ames、Iscove和Glasgow改良版本,以及Click、Fischer、L-15、McCoy、NCTC等。




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