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一般說明
RNA 上样缓冲液在 RNA 电泳期间用作追踪染料。这种染料带有轻微的负电荷,会向与 RNA 相同的方向迁移,使用户能够监测分子在凝胶中移动的进程。迁移速率因凝胶组成而异。用样品按 1:3 至 1:6 稀释,加热至 65℃,持续 10 分钟,上样前置于冰上冷却。
應用
RNA 样品上样缓冲液特别适用于在甲醛-琼脂糖凝胶(含有或不含溴化乙锭)上进行 RNA 电泳。在 Northern 印迹检测之前,不推荐使用溴化乙锭进行凝胶染色,因为琼脂糖凝胶或上样缓冲液中存在溴化乙锭会导致转移效率低下。
适合与甲醛琼脂糖凝胶一起用于 Northern 印迹实验。
成分
RNA 上样缓冲液含 62.5% 去离子甲酰胺、1.14M 甲醛、200μg/ml 溴酚蓝,200μg/ml 二甲苯蓝,溶于 1.25 倍工作浓度的 MOPS-EDTA-乙酸钠中。
去离子甲酰胺 62.5%(v/v)、甲醛 1.14M、溴酚蓝 μg/mL、二甲苯氰基 200 μg/mL、MOPS-EDTA-乙酸钠、1.25× 工作浓度。
數量
推荐用法:将 1 个体积的样品加入 2 至 5 倍的样品上样缓冲液中,混合均匀。将样品加热至 65°C,10 分钟,然后,在进行凝胶上样之前立刻在冰上冷却。
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