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Merck
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文件

ORFPOOLWG

Sigma-Aldrich

MISSION® TRC3 人类全基因组慢病毒PRF库

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352200

包裝

pkg of 8x25 μL (vials)

品質等級

濃度

5x108  VP/ml (via p24 assay)

技術

capture ELISA: 5 × 108 TU/mL using p24

運輸包裝

dry ice

儲存溫度

−70°C

相關類別

一般說明

我们可以提供迄今为止最大的全测序和预克隆的人类开放阅读框(ORF)集合,并以混合慢病毒全基因形式提供。MISSION® TRC3人全基因组混合ORF文库(由Broad研究所开发)包含17,000多个独特的ORF克隆,可编码超过14,000个用于过表达筛选的基因。该独家文库包含与每个ORF克隆相关的独特的24个核苷酸条形码序列,可轻松进行目标鉴定和深度测序/反卷积。
该现成的MISSION TRC3人LentiORF混合库可帮助研究人员利用我们一流的慢病毒生产技术在难转染的细胞系中稳定整合、富集细胞并长期表达基因。 该系列为研究人员提供了独特的工具,通过调节基因和蛋白质表达来深入探索基因功能。

探索生物信号通路的经典遗传方法通常都从鉴定引起目标表型的突变开始。然而,野生型基因产物的过表达或错误表达也可能导致突变表型,从而为遗传学家提供了另一种强大的工具来鉴定可能无法使用传统的功能丧失分析法检测到的通路组分。整个基因组慢病毒ORF库填补了这一空白,为研究人员提供了进行重要生物学实验的强大研究工具。

无论是进行基因过表达研究还是验证RNAi或CRISPR实验的基因敲除/敲除结果,LentiORF都是蛋白质表达和基因分析工具的理想捷径。研究人员还需要从筛选中验证相关“匹配”,以消除假阳性。这意味着研究人员需要确认所观察到的表型是否归因于目标基因。通过lentiORF重新表达目的基因是验证基因靶标的最广泛接受的方法。

MISSION TRC3人LentiORF混合全基因组文库以8×25 μl等分试样的形式提供,最小滴度为5×108 TU/ml(通过p24测定法测定)。

應用

功能基因组学/过表达筛选/靶标验证

特點和優勢

  • 无需机器人或专用设备,即可在台式机上高效筛选整个人类基因组(14,000多个基因)
  • 预克隆、序列已确认的、直接可以用于表达的克隆
  • 蛋白质表达的理想捷径:使用混合的慢病毒ORF对蛋白编码基因进行表达以评估其功能
  • 简单反卷积:嘌呤霉素文库带有条形码,由位于V5标签和翻译终止序列下游的24个核苷酸序列组成。每个克隆均包含一个易于识别的独特条形码序列,可对混合的筛选实验进行简单的反卷积
  • EF1a启动子可驱动ORF构建体的表达,在某些细胞类型中CMV启动子不适用的情况下,可为其提供另一种选择
  • 嘌呤霉素抗性允许在含有新霉素或弹力霉素抗性的细胞中进行双重选择实验
  • 富集的细胞群:使用嘌呤霉素对转导后的细胞进行选择,以创建长期稳定的细胞系
  • V5表位标签可促进pull-down和免疫共沉淀实验,以确定蛋白间相互作用或通过免疫荧光对ORF进行标记和可视化
  • 已提供阳性和阴性选择对照(BFP和GFP),其可以让研究人员成功的对混合筛选实验进行评估
  • 慢病毒ORF可以通过转导感染多种哺乳动物细胞(包括难以转染的细胞或原代细胞系),以促进筛选目的的基因过表达
  • 通过Sigma-Aldrich′反卷积服务轻松、快速、经济地进行筛选
  • 节省时间:跳过PCR、克隆和DNA序列验证步骤

準備報告

Puro Kill曲线和每毫升CFU(菌落形成单位)的测定。在进行文库规模的筛选之前,必须进行两个预实验。访问Lentipools或参阅技术公告。

其他說明

该产品仅供研发使用,不可用作药物、家庭使用或其他用途。请查阅安全资料表,获取危险和安全操作规范信息。尽管生产的慢病毒转导颗粒是不可复制的,但仍然建议将其作为生物危害等级2级(RGL−2)生物体在实验室中进行处理。请遵循所有已发表的RGL-2指南,进行实验室废物处理和净化。

法律資訊

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 3

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


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文章

Our lentiviral vector systems are developed with enhanced safety features. Numerous precautions are in place in the design of our lentiviruses to prevent replication. Good handling practices are a must.

Successful targeting relies on optimizing key sensitive steps in the process, including lentiviral transduction. Below are some helpful handling and titration tips from our R&D lentiviral experts.

條款

You are not alone designing successful CRISPR, RNAi, and ORF experiments. Sigma-Aldrich was the first company to commercially offer lentivirus versions of targeted genome modification technologies and has the expertise and commitment to support new generations of scientists.

FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) provides a method for sorting a mixed population of cells into two or more groups, one cell at a time, based on the specific light scattering and fluorescence of each cell. This method provides fast, objective, and quantitative recording of fluorescent signals from individual cells.

我們的科學家團隊在所有研究領域都有豐富的經驗,包括生命科學、材料科學、化學合成、色譜、分析等.

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