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C5894

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

non-sterile; 0.2 μm filtered, Type IA-S, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

同義詞:

梭菌肽酶 A

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About This Item

CAS號碼:
酶委員會編號:
EC號碼:
MDL號碼:
分類程式碼代碼:
12352204
NACRES:
NA.54

品質等級

無菌

non-sterile; 0.2 μm filtered

形狀

lyophilized powder

比活性

≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量

68-130 kDa

儲存溫度

−20°C

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應用

胶原酶已用于动脉组织的制备,用于晚期糖基化终产物 (AGE) 的研究。这种酶还与其他蛋白酶一起用于人类肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮和许多其他组织的解聚。也用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺的消化和非实质肝细胞的分离。检测浓度约为 1 mg/mL(每只大鼠肝脏总体积为 100 mL)时该酶对肝细胞的释放。

生化/生理作用

从组织中有效释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca 2 + ) 激活胶原酶。培养滤液被认为含有至少 7 种不同的蛋白酶,分子量范围为 68-130 kDa。最佳 pH 值为 6.3-8.8。这种酶通常用于消化组织样本中的连接成分,以释放单个细胞。胶原酶处理可使部分细胞死亡。通常使用 0.1 至 5 mg/mL 的浓度进行消化。反应的持续时间从 15 分钟到数小时不等,可产生令人满意的细胞解离,且不会引起太多的细胞死亡。首选含钙和 BSA 的 Krebs Ringer 缓冲液,活性需要 Zn 2 +
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

注意

供应时,本品在-20°C 下可稳定保存一年。在 37°C、50°C 和-20°C 条件下储存 30 天,FALGPA 或蛋白酶活性没有损失。如果快速冷冻 (10 mg/mL) 并在-20°C 下冷冻,粗胶原酶溶液是稳定的。进一步冻融循环将破坏溶液。置于冰上 7 小时后,产品仍保持 100% 活性。

單位定義

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。

準備報告

溶液通常在 37°C 下用 TESCA 缓冲液(含 50 mM TES,0.36 mM 氯化钙,pH 7.4)制备,浓度为 1-2 mg/mL。

象形圖

Health hazardExclamation mark

訊號詞

Danger

危險分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

標靶器官

Respiratory system

儲存類別代碼

11 - Combustible Solids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable

個人防護裝備

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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