RAP-RO

rAPid碱性磷酸酶

1 units/μg protein, optimum reaction temp. 37 °C

• 同義詞: 碱性磷酸酶，dna片段克隆
• 酶委員會編號: 3.1.3.1 (BRENDA, IUBMB)
• 分類程式碼代碼: 12352204
• NACRES: NA.21

屬性

• 生物源: bovine intestine
• 品質等級: 100
• 重組細胞: expressed in Pichia pastoris
• 形狀: liquid
• 比活性: 1 units/μg protein
• 分子量: monomer 56 kDa by SDS-PAGE
• 包裝: pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl]); pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])
• 製造商／商標名: Roche
• 濃度: <0.1 % (w/w)
• 參數: 37 °C optimum reaction temp.
• 技術: molecular cloning: suitable
• 顏色: colorless
• pH值: 7.6-8.5 (68 °F)
• 溶解度: water: miscible
• 適合性: suitable for molecular biology
• NCBI登錄號: QBZ39068
• UniProt登錄號: P09487; ; P09487
• 應用: life science and biopharma
• 異物活動: Nicking activity, none detected (up to 20 µl enzyme using pBR322-DNA/ 16h / 37°C); unspecific endonuclease, none detected (up to 20 µl enzyme using Lambda-DNA 16 h/37 °C)
• 儲存溫度: −20°C
• 基因資訊: bovine ... ALPI(280993)

描述

一般說明

rAPid碱性磷酸酶是从牛肠中分离的碱性磷酸酶，作为在毕赤酵母（Pichia Pastoris）中表达的56kD重组酶提供。重组形式确保了一致性和安全性。rAPid碱性磷酸酶能够催化DNA和RNA、核苷酸和蛋白质的5′磷酸盐的去磷酸化。碱性磷酸酶处理可去除连接酶所需的5′-磷酰基末端，从而防止DNA片段的自我连接；该特性能够减少载体背景，对于克隆策略非常重要。与小牛肠道磷酸酶不同，rAPid碱性磷酸酶在+75 °C下热处理2分钟，可快速、完全且不可逆地灭活。因此，它是虾碱性磷酸酶的出色替代品。此外，该酶在限制酶缓冲液中具有活性。因此，无需纯化步骤，即可完成限制酶消化、去磷酸化、酶失活、连接或5′-末端标记。

特異性

碱性磷酸酶可以催化许多磷酸酯的水解，如伯醇和仲醇、糖、环醇、酚和胺的酯。与磷酸二酯不反应。该酶能水解无机焦磷酸盐。酶的动力学性质取决于许多因素，如酶的纯度、测定中酶的浓度、缓冲液、pH等。
热灭活：通过在75℃温育2分钟，可以灭活rAPid碱性磷酸酶。

應用

• rAPid碱性磷酸酶可用于许多应用，包括：从核酸中去除5′-磷酰基
• 制备用于5′-末端标记的模板
• 去除dNTP，净化PCR产物
• 蛋白质的去磷酸化

注意：通过在75℃温育2分钟，可以非常快速地灭活rAPid碱性磷酸酶。在限制性酶切和去磷酸化后不需要其他纯化步骤。去磷酸化的DNA可直接用于连接反应。
注意：快速DNA去磷酸化和连接试剂盒也包含rAPid碱性磷酸酶，该试剂盒能够快速有效地完成去磷酸化并连接粘性或钝端DNA片段。使用这种方便的试剂盒，在+37 °C下可在10分钟内对钝端和粘性5′-突出末端进行去磷酸化，并在+15–25 °C下仅需5分钟即可内完成连接。

特點和優勢

• 消除污染风险：重组表达以及可靠且灵敏的质量控制测试确保了高纯度。
• 用经济的解决方案替代当前的磷酸酶：rAPid碱性磷酸酶和虾碱性磷酸酶或牛碱性磷酸酶等价。
• 消除动物源性疾病的风险：在毕赤酵母（Pichia pastoris ）中表达，可确保一致性和安全性。
• 快速热灭活的优势：仅需在75℃温育2分钟，即可灭活rAPid碱性磷酸酶。
• 获得一致的性能：与其他碱性磷酸酶相比，rAPid碱性磷酸酶在储存期间具有出色的稳定性。

包裝

1个试剂盒包含2个组分

品質

根据当前的质量控制程序，对所有批次的rAPid碱性磷酸酶进行测试，确保其不含脱氧核糖核酸酶和切割活性。

單位定義

一个rAPid碱性磷酸酶活性单位是指在检测条件下，在+ 37℃，1分钟内水解1 mol 4-硝基苯基磷酸酶所需的酶量。

体积活度：1 U/μl

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

僅套裝組件

• rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated
• rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl

安全資訊

• 儲存類別代碼: 12 - Non Combustible Liquids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 閃點（°F）: does not flash
• 閃點（°C）: does not flash