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品質等級
形狀
liquid
製造商/商標名
Chemicon®
技術
cell culture | stem cell: suitable
輸入
sample type mesenchymal stem cell(s)
運輸包裝
dry ice
應用
细胞解冻:
1.在准备推荐的培养基和适当的塑料器皿和/或玻璃器皿之前,请勿解冻细胞。
2.从液氮中取出间充质干细胞小瓶,在37°C水浴中孵育。 密切监测直至细胞完全解冻。 最大的细胞活率取决于冷冻细胞的快速和完全解冻。 重要说明: 不要对细胞进行涡旋!
3.一旦细胞完全解冻,用70%乙醇对小瓶外部进行消毒。 立即进行下一步。
4.在层流罩中,使用1或2 mL移液器将细胞转移到无菌的15 mL锥形管中。 转移过程中注意不要引入任何气泡。
5.使用10 mL移液器,向15 mL锥形管中缓慢滴加9 mL间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)。 重要说明: 不要立即向细胞中加入全部体积的培养基。 由于渗透性休克,这可能导致细胞活率降低。
6.缓慢上下吹打两次,轻轻混匀细胞悬液。 注意不要引入任何气泡。 重要说明: 不要对细胞进行涡旋!
7.将锥形管以300 x g离心2-3分钟,使细胞沉淀。
8.尽可能多地倾去上清液。 步骤4-8是去除残留冷冻保存剂(DMSO)所必需的。
9.将细胞重悬于总体积为10 mL的间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)中。
10.将细胞混合物铺在10-cm组织培养板上。
11.在37°C、5%CO2加湿培养箱中培养细胞。
12.第二天,用新鲜的间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)交换培养基。 此后每两到三天与新鲜培养基交换一次。
13.当细胞约80%融合时,可以用Accutase®将其解离并传代,或者冷冻以备后用。
传代培养:
1.小心地从含有间充质干细胞融合层的10-cm组织培养板中取出培养基。
2.应用3-5 mL Accutase,并在37°C培养箱中培养3分钟。
3.检查平板,用手掌轻轻敲击平板侧面,确保细胞完全分离。4.在平板上应用5 mL间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)。
5.将解离的细胞转移至15 mL锥形管中。
6.将锥形管以300 x g离心2-3分钟,使细胞沉淀。
7.弃去上清液
8.向锥形管中加入2 mL间充质干细胞扩增培养基,彻底重悬细胞。重要说明: 不可涡旋。
9.使用血细胞计数仪计数细胞量。
10.将细胞以所需密度铺板于间充质干细胞扩增中适当的烧瓶、板或孔中。 我们通常以每10厘米平板或T75烧瓶约200万个细胞的速度铺板细胞。
品質
测试每批培养基的最佳细胞生长和间充质干细胞的增殖。 无菌测试: 阴性
外觀
间充质干细胞扩增培养基是含有胎牛血清的专有配方。
儲存和穩定性
间充质干细胞扩增培养基应储存于-20°C,直到使用。 解冻后,基础培养基应在2-8°C下储存长达一个月。
法律資訊
Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
分析證明 (COA)
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