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生物源
mouse
品質等級
抗體表格
purified antibody
抗體產品種類
primary antibodies
無性繁殖
1.1A, monoclonal
物種活性
human, mouse
技術
ELISA: suitable
dot blot: suitable
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
同型
IgG2bκ
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
wet ice
目標翻譯後修改
unmodified
基因資訊
human ... TOP1(7150)
一般說明
DNA拓扑异构酶1（EC 5.99.1.2；UniProt P11387；也被称为DNA拓扑异构酶I，Topo I）由人TOP1（也称为TOPI）基因（基因ID 7150）编码。Topo I通过在dsDNA的一条链产生切口以允许切断的3′-羟基末端可围绕未切断的链旋转，从而松弛双链DNA（dsDNA）的扭转应变，而有缺口的DNA的5′-磷酰基末端会与Topo I上的酪氨酸残基形成一个共价的磷酸二酯键。有缺口的3′-羟基末端则攻击DNA酶的磷酸酯键，使有缺口的DNA链重新连接。在Topo I催化的切断和重新连接的每一轮过程中，都会去除一个超螺旋。喜树碱被广泛用于癌症治疗，这些药物可在topo I活性位点插入DNA，从而抑制酶的连接步骤，并使平衡朝着共价topo I-DNA复合物而非游离的topo I和DNA方向移动。这些药物稳定的共价topo I-DNA复合物与前进中的复制叉或转录复合物的相互作用会导致DNA进一步损伤并最终导致细胞死亡。
特異性
克隆1.1A可通过检测topo I活性位点Tyr723磷酸化，特异性识别DNA共价复合物中的拓扑异构酶I（Topo I），但不识别非DNA复合的游离Topo I（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
免疫原
KLH缀合的线性肽，对应于具有磷酸化Tyr723的人Topo I靶位点序列。
表位：Topo I pTyr723。
應用
抗拓扑异构酶I-DNA共价复合物抗体，克隆1.1A，是一种抗拓扑异构酶I-DNA共价复合物的抗体，可用于免疫细胞化学、流式细胞术，斑点印迹、ELISA。
流式细胞分析：1.0 µg代表性批次该抗体在拓扑替康处理的HCT116人结肠癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物。
免疫细胞化学分析：10 µg/mL代表性批次产品在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物（由明尼苏达州罗切斯特市梅奥诊所的Scott H. Kaufmann博士提供）。
流式细胞术分析：10 µg/mL代表性批次产品在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物（由明尼苏达州罗切斯特市梅奥诊所的Scott H. Kaufmann博士提供）。
斑点印迹分析：一个代表性批次产品在TPT处理和未处理的A549细胞的CsCl2梯度裂解液中，通过狭缝印迹法检测到了拓扑替康/TPT稳定的拓扑异构酶I/DNA共价复合物，但未检测到游离拓扑异构酶I（非DNA复合）（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
斑点印迹分析：一个代表性批次产品通过狭缝印迹从TPT处理的A549和HCT116细胞的裂解物中，检测到了拓扑替康（TPT）剂量依赖性的TPT稳定的拓扑异构酶I/DNA共价复合物的增加（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
斑点印迹分析：一个代表性批次产品从喜树碱（CPT、SN-38、TPT）或茚并异喹啉（NSC 314622、NSC 725776、NSC 743400）处理的A549细胞的裂解物中检测到稳定的拓扑异构酶I/DNA共价复合物，但未检测到核苷类似物（阿糖胞苷和吉西他滨） （Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826)。
ELISA分析: 一个代表性批次产品通过直接（非夹心形式）ELISA检测到了与磷酸化Tyr723对应的拓扑异构酶I活性位点序列的免疫原肽，但未检测到具有非磷酸化Tyr273的肽（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826)。
免疫细胞化学分析: 一个代表性批次产品在拓扑替康/TPT处理的A549细胞中检测到非核仁拓扑异构酶I/DNA共价复合物基因座的剂量依赖性增加，而未处理细胞中的少数基因座仅在核仁中可见（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
免疫细胞化学分析：一个代表性批次产品在拓扑替康/TPT处理的A549细胞中检测到了与磷酸H2AX和Rad51的拓扑异构酶I/DNA共价复合物在时间和空间上不同的核基因座形成（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
免疫细胞化学分析：10 µg/mL代表性批次产品在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物（由明尼苏达州罗切斯特市梅奥诊所的Scott H. Kaufmann博士提供）。
流式细胞术分析：10 µg/mL代表性批次产品在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物（由明尼苏达州罗切斯特市梅奥诊所的Scott H. Kaufmann博士提供）。
斑点印迹分析：一个代表性批次产品在TPT处理和未处理的A549细胞的CsCl2梯度裂解液中，通过狭缝印迹法检测到了拓扑替康/TPT稳定的拓扑异构酶I/DNA共价复合物，但未检测到游离拓扑异构酶I（非DNA复合）（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
斑点印迹分析：一个代表性批次产品通过狭缝印迹从TPT处理的A549和HCT116细胞的裂解物中，检测到了拓扑替康（TPT）剂量依赖性的TPT稳定的拓扑异构酶I/DNA共价复合物的增加（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
斑点印迹分析：一个代表性批次产品从喜树碱（CPT、SN-38、TPT）或茚并异喹啉（NSC 314622、NSC 725776、NSC 743400）处理的A549细胞的裂解物中检测到稳定的拓扑异构酶I/DNA共价复合物，但未检测到核苷类似物（阿糖胞苷和吉西他滨） （Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826)。
ELISA分析: 一个代表性批次产品通过直接（非夹心形式）ELISA检测到了与磷酸化Tyr723对应的拓扑异构酶I活性位点序列的免疫原肽，但未检测到具有非磷酸化Tyr273的肽（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826)。
免疫细胞化学分析: 一个代表性批次产品在拓扑替康/TPT处理的A549细胞中检测到非核仁拓扑异构酶I/DNA共价复合物基因座的剂量依赖性增加，而未处理细胞中的少数基因座仅在核仁中可见（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
免疫细胞化学分析：一个代表性批次产品在拓扑替康/TPT处理的A549细胞中检测到了与磷酸H2AX和Rad51的拓扑异构酶I/DNA共价复合物在时间和空间上不同的核基因座形成（Patel, A.G., et al, (2016).44(6):2816-2826）。
研究子类别
染色质生物学
染色质生物学
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
品質
已通过免疫细胞化学在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中进行了评估。
免疫细胞化学分析：10 µg/mL的该抗体在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物。
免疫细胞化学分析：10 µg/mL的该抗体在拓扑替康处理的A549人肺癌细胞中检测到拓扑异构酶I/DNA共价复合物。
標靶描述
计算分子量为90.7 kDa。
外觀
形式：纯化
纯化的小鼠IgG2bκ，溶于含有0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4，150 mM NaCl）和0.05％叠氮化钠的缓冲液中。
经蛋白G纯化。
儲存和穩定性
自发运之日起，在 2-8°C 条件下可稳定保存1年
其他說明
浓度：请参考特定批次的数据表。
免責聲明
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儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類（WGK）
WGK 1
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
分析證明 (COA)
輸入產品批次/批號來搜索 分析證明 (COA)。在產品’s標籤上找到批次和批號，寫有 ‘Lot’或‘Batch’.。
Shih-Chieh Chiang et al.
Science advances, 3(4), e1602506-e1602506 (2017-05-17)
Breakage of one strand of DNA is the most common form of DNA damage. Most damaged DNA termini require end-processing in preparation for ligation. The importance of this step is highlighted by the association of defects in the 3'-end processing
Angela M Mabb et al.
PloS one, 11(5), e0156439-e0156439 (2016-05-28)
Topoisomerase 1 (TOP1) inhibitors, including camptothecin and topotecan, covalently trap TOP1 on DNA, creating cleavage complexes (cc's) that must be resolved before gene transcription and DNA replication can proceed. We previously found that topotecan reduces the expression of long (>100
Amy Flor et al.
Cell chemical biology, 28(6), 776-787 (2020-12-23)
Topoisomerase 1 (Top1) reversibly nicks chromosomal DNA to relax strain accumulated during transcription, replication, chromatin assembly, and chromosome condensation. The Top1 poison camptothecin targets cancer cells by trapping the enzyme in the covalent complex Top1cc, tethered to cleaved DNA by
Syed Moiz Ahmed et al.
PloS one, 14(5), e0215696-e0215696 (2019-05-09)
The transient build-up of DNA supercoiling during the translocation of replication forks threatens genome stability and is controlled by DNA topoisomerases (TOPs). This crucial process has been exploited with TOP poisons for cancer chemotherapy. However, pinpointing cellular determinants of the
Laetitia Mouly et al.
Cell death & disease, 9(9), 931-931 (2018-09-14)
RHO GTPases regulate essential functions such as the organization of the actin cytoskeleton. The classic members cycle between an active GTP-bound and an inactive GDP-bound conformation whereas atypical members are predominantly GTP-bound. Besides their well-established role, the classic RHO GTPases
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