二抗
图 1.免疫荧光使用Anti-von Wille进行马肉芽组织增生（肉芽增生）的染色。
二级抗体是与一级抗体或抗体片段（如Fc或Fab区域）结合的多克隆或单克隆抗体。它们通常由探针标记后，可用于检测、纯化或分类等应用。
我们可提供来自各种宿主的二级抗体。我们的多克隆二级抗体是从宿主动物如小鼠、兔子、山羊和绵羊等的血清中产生的。而我们的单克隆二级抗体是从小鼠杂交瘤细胞克隆产生的。
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利用我们的Antibody Explorer搜索工具，可根据克隆性、应用、物种反应性、结合物、宿主物种和形式，浏览和比较抗体。
图 2.有丝分裂的蝾螈肺细胞的荧光显微照片。使用Monoclonal Anti-^的微管染色。
图 3.免疫细胞化学。大鼠视神经冰冻切片用小鼠抗神经丝H抗体和CF568山羊抗小鼠抗体（神经元突起，红色），以及高度交叉吸附的兔抗GFAP抗体和CF488A山羊抗兔抗体（神经胶质细胞，绿色）进行染色。细胞核用 RedDot2 （青色）染色。
结合抗体和探针
我们可提供大量的结合抗体产品组合。结合抗体是一种与标签相连的单克隆或多克隆抗体，用于各种各样的分析检测。二级抗体的具体用途取决于其结合的探针类型。探针是辅助各种检测技术的分子。结合二级抗体最常见的检测系统是采用比色法或荧光法的检测。
比色测定通常是基于碱性磷酸酶（ALP）或辣根过氧化物酶（HRP）或其衍生物的使用。生物素-亲和素（链霉亲和素）共轭结合系统常用于放大ALP或HRP的比色信号。最常见的荧光测定是利用异硫氰酸盐荧光素（FITC）、罗丹明或其衍生物、异硫氰酸四甲基罗丹明（TRITC）、青色素（Cy3）或藻红蛋白（R-PE）来进行的。
我们提供与各种比色和荧光标记相连接的结合抗体，可用于检测、纯化、分类和显微镜检查等多项应用。结合抗体在多种宿主动物中产生，故可与广泛的免疫化学试剂相容。对于在研究中需要标记自己的试剂的用户，我们可提供抗体标记试剂盒，以供各种标签（生物素、FITC、CF™标签） 同单克隆和多克隆抗体的结合。
蛋白质A、G和L
来自 金黄色葡萄球菌的蛋白A。来自 链球菌属 的蛋白G。两者都有与哺乳动物IgG的Fc部分相结合的结合位点。这些蛋白质对IgG的亲和力因动物种类而异。蛋白G对大鼠、山羊、绵羊和牛的IgG以及小鼠的IgG1和人的IgG3具有较高的亲和力。蛋白A对猫和豚鼠的IgG具有较高的亲和力(表1)。除了可与IgG的Fc结合位点相结合外，天然蛋白G还可与白蛋白、Igs的Fab区以及细胞膜的结合区相结合，这些可能会导致非特异性染色的发生。我们已通过创造蛋白质重组形式的方式解决了这些问题。重组蛋白G已设计消除了白蛋白结合区，而重组蛋白G′是一种截短的蛋白质，它缺乏对白蛋白、Fab和细胞膜的结合位点，而保留了对Fc的结合位点，因此与其天然形式相比，其对IgG更具特异性。
表1.蛋白质A、G和L对不同物种的结合能力。
蛋白L，来自 大消化链球菌，对来自不同物种的kappa轻链具有亲和力(表 2) 。它可以检测含有kappa轻链的单克隆或多克隆IgG、IgA和IgM以及Fab、F(ab′)2和重组单链Fv(scFv)片段。它也能结合鸡的IgG。注意：像牛、山羊、绵羊和马这样的物种，其Igs几乎只含有lambda链，如果真是这样，它们就不能很好地与蛋白质L结合。
表2.与各种免疫球蛋白轻链结合的蛋白L。
检测试剂
蛋白A和G常用作一种通用的、非物种特异性的试剂，来与哺乳动物组织中的一级抗体或表面IgG相结合。蛋白质G推荐可用于包括小鼠和大鼠在内的大多数物种。蛋白A推荐可用于猫和豚鼠。两者均不建议用于对IgA或IgM、Fab片段或禽类的IgG的检测。当与琼脂糖等树脂结合时，蛋白A和蛋白G或可用于血清或腹水中免疫球蛋白的亲和纯化。
蛋白L常用作一种结合哺乳动物或鸟类的一级抗体或所有物种的表面Igs的通用试剂。它特别适用于对Fab、F(ab′)2 片段和重组scFv片段，以及对与Fc受体结合的Igs，或对在牛Igs存在下的单克隆抗体的检测。其使用仅限于检测带有kappa轻链的Igs。
树脂
蛋白A和蛋白G具有对哺乳动物的IgG的Fc部分的结合位点。这些蛋白质对IgG的结合能力因物种而异。一般来说，IgG对蛋白G的亲和力高于蛋白A，且蛋白G可以结合来自更广泛物种的IgG。各种不同的IgG亚类，尤其来源于小鼠和人的，其对蛋白A的亲和力变化差异大于蛋白G。因此，蛋白A可用于从某些物种中制备同型的纯IgG。蛋白L适合于从无牛的IgG污染的细胞培养上清液中分离小鼠单克隆抗体。
图 4.CF™ 染料HeLa细胞用小鼠抗微管蛋白抗体和CF488A山羊抗小鼠二级抗体（微管，绿色）染色。肌动蛋白丝用CF640R鬼笔环肽（紫色）染色。细胞核用DAPI（蓝色）复染。
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