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Merck

LIG1

Sigma-Aldrich

DNA连接试剂盒

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352204
NACRES:
NA.53

等級

for molecular biology

品質等級

用途

 kit sufficient for 150 ligation reactions

運輸包裝

wet ice

儲存溫度

−20°C

一般說明

Sigma 的 DNA 连接试剂盒包含进行 DNA 连接反应所需的所有试剂。粘性末端连接比平末端连接更有效。加入 PEG 可促进这些反应。

應用

适用于:
  • 将 DNA 片段连接到克隆载体中
  • 诱变
  • 基因分析与结构功能关系

成分

足以进行 150 次反应:
  • 在 250 mM Tris-HCl(pH 7.8),100 mM MgCl2 和 10 mM 二硫苏糖醇中的 300uL 10X 连接缓冲液(D2176)
  • 含有 3 x 100 单位 T4 DNA 连接酶(D2886),10 mM Tris-HCl,pH 7.5,50 mM KCl 和 1 mM 二硫苏糖醇的 50% 甘油溶液
  • 3 x 100 uL 10 mM ATP(A3702)
  • 50μL 对照 pBR322 DNA,HAE III Digest(D9430)浓度为 0.5 ug/ul,溶于 10 mM Tris-HCl(pH 8.0)和 1 mM EDTA 中
  • 1.5 mL 24%(w/v)PEG 溶液,(P 2454)
  • 1.5 mL 分子生物学级水(W4502)

原則

克隆过程中最重要的步骤之一是将线性 DNA 连接到克隆载体中。在缓冲液、ATP 和 DNA 连接酶的存在下,通过将 DNA 片段与适当线性化的克隆载体孵育可进行 DNA 连接。插入物与载体的相对比例、DNA 末端的质量和类型、连接温度和 DNA 浓度等多种参数会影响连接。

象形圖

Exclamation mark

訊號詞

Warning

危險聲明

危險分類

Eye Irrit. 2

儲存類別代碼

10 - Combustible liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 3

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


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Sambrook, J., et al
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2, 1-1 (1989)
Ausubel, F. M.
Current Protocols in Molecular Biology, 1, 3-3 (1994)
Bradley J Eckelmann et al.
NAR cancer, 2(3), zcaa013-zcaa013 (2020-08-11)
Homologous recombination/end joining (HR/HEJ)-deficient cancers with BRCA mutations utilize alternative DNA double-strand break repair pathways, particularly alternative non-homologous end joining or microhomology-mediated end joining (alt-EJ/MMEJ) during S and G2 cell cycle phases. Depletion of alt-EJ factors, including XRCC1, PARP1 and

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