重組細胞
expressed in E. coli
品質等級
化驗
≥90% (SDS-PAGE)
形狀
lyophilized powder
包裝
pkg of 1 kit (3 components)
運輸包裝
ambient
儲存溫度
−20°C
一般說明
来自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes )的重组dCas9-3X FLAG-生物素蛋白(~165KD)是用于基因组工程和基因组DNA检测、分离和成像实验的即用型试剂。当与靶点特异性向导RNA结合时,死亡的酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes )Cas9蛋白作为DNA靶标蛋白,适用于转染细胞培养物、显微注射、DNA下拉、染色质富集、微生物鉴定和原位DNA成像。在C末端,使用SV40大T抗原核定位信号(NLS)标记蛋白质以用于入核转运,使用3XFLAG表位和生物素标记蛋白质以用于基于FLAG抗体®或链霉抗生物素的实验。
應用
功能基因组学/靶标验证/基因组编辑/分子生物学/合成生物学/DNA检测/分离/DNA成像
特點和優勢
- 高特异性
- 适用于基因组DNA检测/分离
- 可立即用于注射/转染
包裝
- 50 μg包装(≥ 300 pmol)
- 250 μg包装(≥ 1500pmol)
成分
每个试剂盒包含:
- 一瓶dCas9重组蛋白
- 一瓶1×稀释缓冲液,1 mL
- 一瓶无核酸酶的水和甘油,1 mL
原則
CRISPR/Cas体系被细菌和古细菌用作抵抗入侵病毒和质粒的防御屏障。最近,来自化脓性链球菌( Streptococcus pyogenes )的II型CRISPR/Cas系统经过设计可用于真核系统,它采用两种分子组分:单个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA)。两个蛋白质结构域RuvC和HnH(分别为D10A和H840A)负责核酸酶活性,它们发生突变会导致Cas9内切核酸酶失活(dCas9)。随后,可以用gRNA对蛋白质进行编程,并指导其与所需的DNA序列结合。
重構
dCas9蛋白冻干粉应使用提供的复原(Reconstitution)溶液重悬,获得所需浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末,在冰上孵育10分钟,然后离心试管以使内容物离心至试管底部。
其他說明
法律資訊
3xFLAG is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
实验方案
Sigma-Aldrich® sgRNA, crRNA and tracrRNA come HPLC purified as standard with our performance guarantee—even for custom designs.
Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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