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一般說明
来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶具有胶原蛋白结合结构域(CBD)和多囊肾病样(PKD样)结构域。它还具有用于钙的Ca 2+结合位点,这对于其功能至关重要。胶原酶用于治疗结缔组织疾病,Dupuytren挛缩。
應用
来自溶组织梭状芽胞杆菌的胶原酶已被用于消化:
- 用于胰岛分离的胰腺样品
- 用于分离肺血管平滑肌细胞(PBMC)的肺动脉样品
- 用于分离软骨细胞的软骨样品
该产品适用于人类肿瘤,小鼠肾脏,人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。 消化浓度范围为0.1至5mg/mL。
生化/生理作用
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物,分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。
注意
本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天,其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品( 10 mg/mL)经快速冷冻可保持稳定,并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时,可保留100%活性。
單位定義
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
準備報告
该产品从Clostridium histolyticum,XI型胶原酶中获得。它具有梭菌蛋白酶,非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。溶液通常是在TESCA缓冲液(含有50mM TES、0.36mM氯化钙,37℃时pH 7.4)中按1-2 mg/mL进行制备。
訊號詞
Danger
危險聲明
危險分類
Resp. Sens. 1
儲存類別代碼
11 - Combustible Solids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
個人防護裝備
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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实验方案
This procedure may be used for Collagenase products.
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