KK5121

KAPA2G 快速基因分型混合物

suitable for PCR, 2 ×

• 别名: PCR, 基因分型
• 分類程式碼代碼: 41106300
• NACRES: NA.54

属性

• 用途: sufficient for 500 reactions; 25 μL sufficient for 500 reactions
• 品質等級: 100
• 儲存期限: ≤18 mo.
• 特點: dNTPs included; hotstart: no
• 製造商／商標名: Roche
• 濃度: 2 ×
• 技術: PCR: suitable; genotyping: suitable
• 輸入: crude DNA
• 儲存溫度: −20°C

说明

一般說明

KAPA2G 快速基因分型混合物（2X）是一种即用型主混合物，包括除引物和模板之外快速聚合酶链式反应所需的其他所有成分。ReadyMix^™混合物还包含两种惰性染料，可以实现通过琼脂糖凝胶电泳分析PCR反应产物，而无需添加DNA上样溶液。KAPA Express Extract 系统包含一种设计用于快速样品降解的热稳定蛋白酶。KAPA Express Extract（一种新型热稳定蛋白酶和缓冲系统）能够在短短15分钟内从小鼠组织中提取出可立即用于PCR的DNA，带染料的 KAPA2G快速基因分型混合物含有的DNA聚合酶通过定向进化技术改造而具有高持续性和超高速。KAPA Express Extract和KAPA2G快速基因分型混合物的组合可在低至1小时内从小鼠组织中可靠地提取和扩增DNA片段，而传统方案则需要超过1天的时间。

應用

KAPA2G 快速基因分型混合物：

• 已被用于从小鼠尾巴、耳朵和脚趾组织中提取和扩增DNA
• 已被用于从其他动物组织和杂交瘤中提取和扩增DNA
• 适用于聚合酶链式反应（PCR）

生化／生理作用

以KAPA Express Extract提取的DNA使用KAPA2G 快速基因分型混合物和染料进行扩增。KAPA2G 快速基因分型混合物产生的DNA片段进行dA-tailed处理，并可克隆进TA克隆载体，或用于常规下游分析或应用，包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样，KAPA2G Fast 具有 5'→3'聚合酶和 5'→3'核酸外切酶活性，但是没有3'→5'核酸外切酶（校正）活性。KAPA2G Fast 具有类似于野生型 Taq的保真度；它的错误率为大约每结合1.7 x 10⁵个核苷酸出现1次错误。裂解在热循环仪、加热器或水浴中进行，然后将样品离心，以回收含DNA的上清液。然后将上清液稀释10倍，再将其用作PCR模板。和依赖蛋白酶K消化的现有方案不同，采用KAPA Express Extract试剂盒可以在单个试管中方便地进行萃取，无需使用危险的化学物质或多个洗涤步骤。这一点显著降低了样本丢失或污染的风险。该过程可以产生充足的模板用于多种测定，并且易于放大，用于处理 96 孔板中的样品。每次萃取都能得到充足的模板，可用于至少100次基因分型PCR反应。萃取物（稀释的或未稀释的）在-15至-25°C下可稳定保存至少6个月。

特點和優勢

提高生产能力、周转时间和可靠性：

• PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
• 最低限度的处理，从而降低样本丢失或污染的风险
• 有充足模板用于多种测定；易于缩放，以处理 96 孔格式的样本
• 快速可靠地扩增各种扩增子长度和 GC 含量各异的 DNA 片段

优于粗提取方法和商业试剂盒：

• 周转时间增加
• 特异性增加
• 成本降低

快速注释：

• 可以在短短 15 分钟内从小鼠尾巴、耳朵或脚趾组织中提取 PCR-ready DNA。PCR 前在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0-8.5) 中稀释 DNA 提取物 10 倍，用 1 μL DNA/25 μL 反应。
• 提取液在 -20℃ 下可稳定储存 >6 个月。
• KAPA2G 快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G 快速 DNA 聚合酶，以及缓冲液、MgCl₂ (1.5 mM，1X) 和 dNTP (每种 0.2 mM，1X)。
• KAPA2G 快速基因分型混合物中包含电泳上样染料，可将 PCR 产物直接上样到琼脂糖凝胶上进行分析。
• 对于 <1 kb 的扩增子，使用 15 s 退火时间，15 s 延伸时间，对于更长的扩增子，使用 15-30 s/kb 延伸时间。

品質

KAPA 小鼠基因分型试剂盒包含的所有组分都经过严格的质量控制测试，无污染的核酸外切酶和核酸内切酶活性，并且符合严格的 DNA 污染要求。

準備報告

在每次使用前，应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存 4°C 条件下（最长 1 个月）。长期储存时，应将试剂放回 -20°C 环境中。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长 3 天）预计不会受到损害。

其他說明

仅供研究使用。不可用于诊断过程。

法律資訊

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

仅试剂盒组分

• KAPA2G Fast DNA Polymerase
• KAPA2G Buffer A
• dNTPs 0.2 mM each at 1X
• MgCl₂ 1.5 mM at 1X
• stabilizers
• dye

安全信息

• 象形圖: GHS08
• 訊號詞: Warning
• 危險聲明: H371
• 防範說明: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• 危險分類: STOT SE 2
• 儲存類別代碼: 12 - Non Combustible Liquids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 閃點（°F）: does not flash
• 閃點（°C）: does not flash