推荐产品
品質等級
形狀
liquid
製造商/商標名
Chemicon®
技術
cell culture | stem cell: suitable
輸入
sample type mesenchymal stem cell(s)
運輸包裝
dry ice
應用
细胞解冻:
1.在准备推荐的培养基和适当的塑料器皿和/或玻璃器皿之前,请勿解冻细胞。
2.从液氮中取出间充质干细胞小瓶,在37°C水浴中孵育。 密切监测直至细胞完全解冻。 最大的细胞活率取决于冷冻细胞的快速和完全解冻。 重要说明: 不要对细胞进行涡旋!
3.一旦细胞完全解冻,用70%乙醇对小瓶外部进行消毒。 立即进行下一步。
4.在层流罩中,使用1或2 mL移液器将细胞转移到无菌的15 mL锥形管中。 转移过程中注意不要引入任何气泡。
5.使用10 mL移液器,向15 mL锥形管中缓慢滴加9 mL间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)。 重要说明: 不要立即向细胞中加入全部体积的培养基。 由于渗透性休克,这可能导致细胞活率降低。
6.缓慢上下吹打两次,轻轻混匀细胞悬液。 注意不要引入任何气泡。 重要说明: 不要对细胞进行涡旋!
7.将锥形管以300 x g离心2-3分钟,使细胞沉淀。
8.尽可能多地倾去上清液。 步骤4-8是去除残留冷冻保存剂(DMSO)所必需的。
9.将细胞重悬于总体积为10 mL的间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)中。
10.将细胞混合物铺在10-cm组织培养板上。
11.在37°C、5%CO2加湿培养箱中培养细胞。
12.第二天,用新鲜的间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)交换培养基。 此后每两到三天与新鲜培养基交换一次。
13.当细胞约80%融合时,可以用Accutase®将其解离并传代,或者冷冻以备后用。
传代培养:
1.小心地从含有间充质干细胞融合层的10-cm组织培养板中取出培养基。
2.应用3-5 mL Accutase,并在37°C培养箱中培养3分钟。
3.检查平板,用手掌轻轻敲击平板侧面,确保细胞完全分离。4.在平板上应用5 mL间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)。
5.将解离的细胞转移至15 mL锥形管中。
6.将锥形管以300 x g离心2-3分钟,使细胞沉淀。
7.弃去上清液
8.向锥形管中加入2 mL间充质干细胞扩增培养基,彻底重悬细胞。重要说明: 不可涡旋。
9.使用血细胞计数仪计数细胞量。
10.将细胞以所需密度铺板于间充质干细胞扩增中适当的烧瓶、板或孔中。 我们通常以每10厘米平板或T75烧瓶约200万个细胞的速度铺板细胞。
品質
外觀
儲存和穩定性
法律資訊
免責聲明
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
商品
Development of a novel serum-free and xeno-free human mesenchymal stem cell (MSC) osteocyte differentiation media.
Development of a novel serum-free and xeno-free human mesenchymal stem cell (MSC) osteocyte differentiation media.
PLTMax® Human Platelet Lysate (hPL) is a superior serum-free and xeno-free media supplement alternative to fetal bovine serum (FBS) for human mesenchymal stem cell (MSC) cultures.
Frequently asked questions about mesenchymal stem cells including MSC derivation, expansion, differentiation and allogenic stem cell therapy.
实验方案
Information about mesenchyme, specifically mesenchymal stem cell procotols. Step-by-step cell culture protocols for mesenchymal stem cell (MSC) isolation, expansion and differentiation.
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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