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文件

MABS1351

Sigma-Aldrich

抗-N3-磷酸组氨酸(3-pHis)抗体,克隆SC39-6

clone SC39-6, from rabbit

别名:

N3-Phosphohistidine

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物源

rabbit

品質等級

抗體表格

purified antibody

抗體產品種類

primary antibodies

無性繁殖

SC39-6, monoclonal

物種活性

human, E. coli

物種活性(以同源性預測)

all

技術

western blot: suitable

同型

IgG

運輸包裝

wet ice

目標翻譯後修改

phosphorylation (N3-pHis)

一般說明

磷酸化在调节蛋白质活性和细胞中各种细胞信号事件中起重要作用。受磷酸组氨酸(pHis)检测工具的限制,大多数研究集中在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸化上。组氨酸磷酸化可发生在咪唑环的N1(1-pHis)或N3(3-pHis)处。含有1-pHis和3-pHis的稳定的磷酸化三唑基丙氨酸类似物(1-pTza和3-pTza)的肽的开发允许产生用于研究信号事件中组氨酸N1和N3磷酸化的抗体。越来越多的证据表明His激酶与癌症和肿瘤转移有关,第一个鉴定出的转移抑制基因是两种已知的哺乳动物His激酶Nm23-H1(也称为NME1、嘧啶核苷二磷酸激酶或NDPK-A)之一。Nm23-H1/Nme1和密切相关的Nm23-H2(Nme2/NDPK-B)通过1-pHis酶中间体催化磷酸盐从ATP转移到核苷二磷酸(NDP)上。Nm23-H1/-H2也具有His激酶活性,可将磷酸盐从活性位点pHis转移到目标蛋白中的His上。诸如磷酸甘油酸变位酶(PGAM)、琥珀酰辅酶A合酶(SCS)和ATP柠檬酸裂合酶(ACL)之类的代谢酶也使用pHis作为酶中间体。与NME1/2不同,PGAM使用3-pHis作为酶中间体。除真核生物外,组氨酸磷酸化在趋化性涉及的细菌“两组分”信号传导途径中也有充分的文献记载,尽管磷酸盐从受体/传感器蛋白中形成的pHis转移到受体反应调节蛋白的Asp残基上,并且受体/传感器蛋白本质上起天冬氨酸激酶的作用。

特異性

目标修饰不是物种特异性的。
选择性检测咪唑环N3位点组氨酸磷酸化的蛋白(3-pHis),而非1-pHis。

免疫原

含有不可水解的磷酸组氨酸类似物3-pTza的随机肽的KLH偶联文库。
表位:N3-磷酸组氨酸(3-pHis)

應用

抗N3-磷酸组氨酸(3-pHis)抗体(克隆SC39-6)是一种异构体特异性单克隆抗体,可特异性检测N3位点磷酸化的组氨酸。该纯化的mAb得到了已发布数据的支持,该数据证明了其在蛋白质印迹中的性能。
注释:在检测磷酸组氨酸之前,请勿加热样品。组氨酸磷酸化对热和酸不稳定。为生成特异性试验的阴性对照,可将等分样品在95ºC下加热10-15分钟,以逆转组氨酸磷酸化。或者,可以将等分试样的样品在酸化的pH值和37ºC下孵育15分钟,以减少组氨酸的磷酸化。 孵育前用25 µL 1 M HCl酸化各100 µL样品,然后在磷酸组氨酸检测前用25 µL 1 M NaOH中和。
研究子类别
信号神经科学
研究类别
信号传导

品質

通过PGAM催化的2,3-DPG降解反应的蛋白质印迹法进行评估。

蛋白质印迹分析:0.08 µg/mL该抗体在5 µg等分PGAM催化的2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)降解反应中检测到重组人磷酸甘油酸变位酶(PGAM)和N3-磷酸组氨酸(3-pHis)。

標靶描述

根据组氨酸磷酸化蛋白而变化。

外觀

形式:纯化
纯化的兔单克隆抗体,溶于含0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
纯化蛋白A

儲存和穩定性

自接收之日起,在2-8°C下可稳定保存1年。

其他說明

浓度:请参考特定批次的数据表。

免責聲明

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儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


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Monoclonal 1- and 3-Phosphohistidine Antibodies: New Tools to Study Histidine Phosphorylation.
Fuhs, SR; Meisenhelder, J; Aslanian, A; Ma, L; Zagorska, A; Stankova, M; Binnie et al.
Cell null
Imran Khan et al.
Oncotarget, 9(12), 10185-10202 (2018-03-15)
The NM23/NME gene was identified as a metastasis suppressor. It's re-expression inhibited cancer cell motility and suppressed metastasis, without effecting primary tumor size in multiple model systems. The mechanisms of NME suppression of motility and metastasis are incompletely known. Of

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