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一般說明
血小板因子 4(UniProt P02776;也称为 C-X-C 基序趋化因子 4、Iroplact、Oncostatin-A、PF-4)由人的 PF4(也称为 CXCL4、SCYB4)基因(基因 ID 5196)编码。血小板因子 4(PF4)是在血小板聚集过程中从活化血小板的 α 颗粒释放的小型 CXC 趋化因子家族细胞因子,可促进血液凝结。PF4 通过其肝素结合结构域以高亲和力(Kd〜4-20 nM)结合肝素(aa 92-98),并中和了类肝素分子的抗凝血酶活性。PF4 对中性粒细胞、成纤维细胞和单核细胞具有趋化作用,并与趋化因子受体 CXCR3 剪接变体 CXCR3B 相互作用。在患有肝素诱导的血小板减少症(HIT)的个体中,PF4-肝素复合物可以触发免疫反应并生成抗 PF4 抗体,从而形成结合 Fc RIIa(CD32a) 的大分子抗体-肝素-PF4 免疫复合物形成血小板,并诱导血小板活化。血小板活化反过来导致更多的 PF4 释放进入循环,增强了免疫复合物的形成、血小板过度活化和细胞清除。PF4 合成时带有一个信号肽序列(aa1-31),该信号肽序列在经过翻译后修饰去除,从而形成成熟的 PF4(aa32-101),通过另一种蛋白水解形式产生 PF4 的截断形式(aa48-101)。
特異性
克隆 197.2 靶向对肝素结合敏感但对还原剂或 SDS 变性不敏感的线性表位(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
免疫原
纯化的人血小板 PF4(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
應用
使用该小鼠单克隆抗血小板因子 4,克隆 197.2,货号MABS1255,已验证可用于 ELISA、流式细胞术、功能分析、免疫细胞化学和蛋白质印迹。
蛋白质印迹分析:在还原和未还原条件下检测到的代表性批次大肠杆菌表达的重组成熟人 PF4(aa 32-101)(由美国威斯康星州血液中心的 Richard H. Aster 博士,医学博士提供)。
ELISA 分析:代表性批次通过 ELISA 在缺少肝素的情况下检测到 PF4。观察到克隆 197.2 对肝素复合 PF4 的免疫反应性降低(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
功能分析:代表性的批次和 PF4 一起激活了人嗜中性粒细胞(表现为 Mac-1 上调),但克隆 197.2 或 PF4 单独无法激活人嗜中性粒细胞(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
免疫细胞化学分析:与 Alexa Fluor™ 488 预偶联的代表性批次在人嗜中性粒细胞上免疫标记了共处理的 PF4。研究观察到 CD32a(FcγRIIA)与活化的嗜中性粒细胞表面上的 PF4 抗 PF4 免疫复合物共定位(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
蛋白质印迹分析:代表性批次通过识别线性表位在还原和未还原条件下检测到 PF4(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
ELISA 分析:代表性批次通过 ELISA 在缺少肝素的情况下检测到 PF4。观察到克隆 197.2 对肝素复合 PF4 的免疫反应性降低(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
功能分析:代表性的批次和 PF4 一起激活了人嗜中性粒细胞(表现为 Mac-1 上调),但克隆 197.2 或 PF4 单独无法激活人嗜中性粒细胞(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
免疫细胞化学分析:与 Alexa Fluor™ 488 预偶联的代表性批次在人嗜中性粒细胞上免疫标记了共处理的 PF4。研究观察到 CD32a(FcγRIIA)与活化的嗜中性粒细胞表面上的 PF4 抗 PF4 免疫复合物共定位(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
蛋白质印迹分析:代表性批次通过识别线性表位在还原和未还原条件下检测到 PF4(Xiao, Z., et al. (2008).Blood.112(4):1091-1100)。
品質
通过流式细胞术评估人血小板。
流式细胞术分析:1 µg 的该抗体在 100 万个 4% 低聚甲醛固定的,0.2%Triton X-100 透性化处理的人血小板中检测到 PF4。
流式细胞术分析:1 µg 的该抗体在 100 万个 4% 低聚甲醛固定的,0.2%Triton X-100 透性化处理的人血小板中检测到 PF4。
標靶描述
观测值为 ~8 kDa(重组成熟 hPF4)。计算得出的分子量为 10.84 kDa(前体形式),7.769 kDa(成熟形式;aa32-101),6.033 kDa(切割的短形式;aa48-101)。在某些裂解液中可能会观察到未表征的条带。
外觀
在含有 PBS 且不含防腐剂的缓冲液中的纯化的小鼠 IgG1。
形式:纯化的
其他說明
浓度:请参考特定批次的数据表。
法律資訊
ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies
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儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 2
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
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