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生物源
rabbit
品質等級
抗體表格
serum
無性繁殖
polyclonal
物種活性
human, mouse
物種活性(以同源性預測)
mammals
製造商/商標名
ChIPAb+
Upstate®
技術
ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
dry ice
基因資訊
human ... H3F3B(3021)
一般說明
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。 每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+二甲基组蛋白H3(Lys9)组包括抗二甲基组蛋白H3(Lys9)抗体、阴性对照抗体(正常兔血清)和qPCR引物,其可扩增人β珠蛋白基因启动子内的110 bp区域。 二甲基组蛋白H3(Lys9)和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证二甲基组蛋白H3(Lys9)相关染色质的沉淀。
ChIPAb+二甲基组蛋白H3(Lys9)组包括抗二甲基组蛋白H3(Lys9)抗体、阴性对照抗体(正常兔血清)和qPCR引物,其可扩增人β珠蛋白基因启动子内的110 bp区域。 二甲基组蛋白H3(Lys9)和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证二甲基组蛋白H3(Lys9)相关染色质的沉淀。
组蛋白的甲基化可以发生在两个不同的残基上:精氨酸或赖氨酸。组蛋白甲基化可以与转录激活或抑制相关,具体取决于甲基化残基。组蛋白H3的赖氨酸9可以通过不同的组蛋白甲基转移酶(HMTs)(例如,SuvH39H1或G9a)单甲基化、二甲基化或三甲基化。该甲基化的赖氨酸可以通过组蛋白脱甲基酶(如JMJD1A,LSD1或JMJD2C)脱甲基。该残基的甲基化主要与转录抑制有关。
特異性
二甲基组蛋白H3(Lys9)
免疫原
二甲基组蛋白H3(Lys9)兔血清是针对含有序列..Rme2KSTG..的KLH-偶联分支合成肽制备的,其中me2K对应于人组蛋白H3残基9的二甲基赖氨酸
表位:二甲基Lys9
應用
二甲基组蛋白H3(Lys9)ChIP验证的抗体&引物组,包括ChIP级抗体 & 特异性对照PCR引物用于H3K9Me2染色质免疫沉淀。
染色质免疫沉淀:
使用4 μL正常兔抗血清或抗二甲基组蛋白H3(Lys9)血清和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从未处理HeLa细胞制备的超声染色质(1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀(请参见图)。使用位于人β-珠蛋白启动子侧翼的β-珠蛋白ChIP引物或扩增人GAPDH启动子的引物,通过qPCR验证了二甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀,该启动子在HeLa细胞中无转录活性。显示了每个qPCR引物组相对于标准曲线的输入百分比。
请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案以获取实验详细信息。
蛋白质印迹分析和肽抑制:
HeLa酸提取物通过电泳分离,转移到硝酸纤维素膜上,并用抗二甲基组蛋白H3(Lys9)(1:500,泳道1)探测,或与0.4 μM组蛋白H3肽预孵育,并进行以下修饰:
泳道2:线性未修饰
泳道3:分支未修饰
泳道4:分支三甲基
泳道5:线性三甲基
泳道6:分支二甲基
泳道7:线性二甲基
泳道8:分支单甲基
泳道9:线性单甲基
使用与HRP偶联的山羊抗–兔二抗和化学发光检测系统观察蛋白质
使用4 μL正常兔抗血清或抗二甲基组蛋白H3(Lys9)血清和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从未处理HeLa细胞制备的超声染色质(1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀(请参见图)。使用位于人β-珠蛋白启动子侧翼的β-珠蛋白ChIP引物或扩增人GAPDH启动子的引物,通过qPCR验证了二甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀,该启动子在HeLa细胞中无转录活性。显示了每个qPCR引物组相对于标准曲线的输入百分比。
请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案以获取实验详细信息。
蛋白质印迹分析和肽抑制:
HeLa酸提取物通过电泳分离,转移到硝酸纤维素膜上,并用抗二甲基组蛋白H3(Lys9)(1:500,泳道1)探测,或与0.4 μM组蛋白H3肽预孵育,并进行以下修饰:
泳道2:线性未修饰
泳道3:分支未修饰
泳道4:分支三甲基
泳道5:线性三甲基
泳道6:分支二甲基
泳道7:线性二甲基
泳道8:分支单甲基
泳道9:线性单甲基
使用与HRP偶联的山羊抗–兔二抗和化学发光检测系统观察蛋白质
研究子类别
染色质生物学
染色质生物学
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
包裝
25次测定/试剂盒,约4 μL/染色质免疫沉淀
成分
抗二甲基组蛋白H3(Lys9)(兔血清),1小瓶
阴性ChIP对照血清,1小瓶
ChIP引物β-珠蛋白,1小瓶
阴性ChIP对照血清,1小瓶
ChIP引物β-珠蛋白,1小瓶
品質
染色质免疫沉淀:
使用4 μL正常兔抗血清或4 μL抗二甲基组蛋白H3(Lys9)血清和Magna ChIP A(目录号17-610)试剂盒,对未经处理的HeLa细胞(1 X 106细胞当量)制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。
通过qPCR,使用β-珠蛋白人启动子侧翼的对照ChIP引物,验证了二甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
使用4 μL正常兔抗血清或4 μL抗二甲基组蛋白H3(Lys9)血清和Magna ChIP A(目录号17-610)试剂盒,对未经处理的HeLa细胞(1 X 106细胞当量)制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。
通过qPCR,使用β-珠蛋白人启动子侧翼的对照ChIP引物,验证了二甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
標靶描述
17 kDa
外觀
二甲基组蛋白H3(Lys9)(兔多克隆血清)。 一个小瓶含有100 μL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。
正常兔血清。一个小瓶含有100 uL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。
ChIP引物,β-珠蛋白。一个小瓶包含75 μL的5 μM人β-珠蛋白特异性引物。
用于:AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
正常兔血清。一个小瓶含有100 uL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。
ChIP引物,β-珠蛋白。一个小瓶包含75 μL的5 μM人β-珠蛋白特异性引物。
用于:AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
儲存和穩定性
自收到之日起在-20°C可稳定保存1年
分析報告
对照
包括阴性对照抗体正常兔血清和对人β-珠蛋白启动子特异性的对照引物。
包括阴性对照抗体正常兔血清和对人β-珠蛋白启动子特异性的对照引物。
法律資訊
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
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