Przekształć swój mikroskop
System obrazowania żywych komórek CellASIC® ONIX2
Możliwość hodowania, obserwowania i manipulowania złożonymi kulturami komórkowymi wymaga precyzyjnej kontroli nad środowiskiem hodowli komórkowej. System mikroprzepływowy CellASIC® ONIX2 przekształca istniejący mikroskop w zautomatyzowany system do zaawansowanego obrazowania i analizy żywych komórek.
- Dynamiczne obrazowanie żywych komórek
- Kompatybilny z każdym mikroskopem odwróconym
- Niewielkie rozmiary
- Przyjazny dla użytkownika
- Przezroczyste płytki mikroprzepływowe do wielu zastosowań
- Zintegrowany kontroler mikroinkubatora utrzymuje środowisko hodowli
Jak to działa
System CellASIC® ONIX2 tworzy uszczelnienie próżniowe ze specjalistycznymi płytkami mikroprzepływowymi i kontroluje perfuzję, temperaturę i środowisko gazowe. Komórki adherentne lub zawiesinowe są dodawane bezpośrednio do czterech dołków wlotowych płytki mikroprzepływowej. Napędzane kapilarnie ładowanie komórek automatycznie ładuje komórki do komór hodowlanych w delikatny, dobrze rozprowadzony sposób. Pożywki lub odczynniki są ładowane do studzienek wlotowych roztworu. Poszczególne mikrokanały łączą każdy roztwór z komorami hodowli komórkowej w obszarze obrazowania płytki mikroprzepływowej. Kolektor łączący płytki z systemem można dostosować do dowolnego mikroskopu odwróconego.
Live cell imaging of NK killing mediated by anti-EGFR using the CellASIC® ONIX2 microfluidic platform.
Zastosowania
Różnorodne konstrukcje płytek specyficzne dla aplikacji zapewniają elastyczność w prowadzeniu hodowli i testów, które dostarczają najbardziej istotnych danych. Płytki są zoptymalizowane pod kątem komórek o różnych średnicach, w tym komórek ssaków, drożdży i bakterii.
- Mikroskopowa analiza trójwymiarowych struktur komórkowych
- Chemotaksja/migracja w odpowiedzi na gradienty chemiczne
- Realna i dynamiczna reakcja komórek na dodawanie/odstawianie związków i zmieniające się warunki środowiskowe<
- Pierwotna hodowla neuronów przez 21 dni
- Interakcje gospodarz-patogen
- Reakcja pojedynczej komórki bakteryjnej i tworzenie biofilmu
Płytki mikroprzepływowe CellASIC® ONIX
Płytki do mikroprzepływowej hodowli komórkowej CellASIC® ONIX zostały zaprojektowane z myślą o optymalnym zdrowiu komórek, umożliwiając jednocześnie dynamiczne badania na żywych komórkach z wykorzystaniem komórek ssaków, komórek bakteryjnych i komórek drożdży.
- Pojemności mikroprzepływowe umożliwiają szybkie perturbacje i wymianę płynów środowiskowych
- Mikrobariery perfuzyjne umożliwiają ciągły transport odczynników bez stresu dla komórek
- Dno i komora ze szkła optycznego umożliwiają obrazowanie żywych komórek w wysokiej rozdzielczości
- Elastyczna konstrukcja pozwala na prowadzenie wielu niezależnych eksperymentów jednocześnie
- Komórki mają ciągły dostęp do składników odżywczych, a usuwanie odpadów odbywa się bez zakłóceń
Obrazowanie apoptozy w komórkach odpornościowych na żywo
Obrazowanie hipoksji w komórkach nowotworowych na żywo
Komórki Jurkat zostały najpierw załadowane na płytkę CellASIC® ONIX2 System M04T Pad Trap Plate (M04T-01-5PK), a następnie inkubowane z barwnikiem BioTracker NucView® 488 Green Caspase-3 Dye (SCT101) i aneksyną V Texas Red przez pierwsze 2 godziny w pełnej pożywce RPMI-1640 (SLM-240-B), a następnie poddano działaniu 2.5 µg/ml przeciwciała CD-95 (05-201) (grupa eksperymentalna) lub bez leczenia (kontrola) przez 8 godzin. Obrazowanie poklatkowe wykonano na komórkach w odstępach 10-minutowych pod powiększeniem 400x przy użyciu filtra FITC i Texas-Red do wizualizacji aktywacji kaspazy 3 i wiązania aneksyny, odpowiednio.
.Komórki raka naskórka A431 inkubowano 16 godzin przez noc z 3 µM BioTracker 520 Green Hypoxia Dye (SCT033) w kompletnym DMEM przez perfuzję grawitacyjną w temperaturze 37°C w warunkach normoksycznych (20% O2) przy użyciu systemu CellASIC® ONIX2 z płytką przełączającą M04 (M04S-03-5PK). Po całonocnej inkubacji, komórki poddano perfuzji kompletną pożywką DMEM bez barwnika pod ciśnieniem 1 psi w warunkach hipoksji (0% O2) przez 16 godzin w temperaturze 37°C. Obrazy fluorescencyjne rejestrowano przez 16 godzin. Zielony barwnik hipoksyjny BioTracker 520 zwiększa intensywność fluorescencji wraz ze spadkiem poziomu tlenu (zwiększone warunki hipoksyjne).
Obrazowanie odpowiedzi wapniowej na żywo
Obrazowanie na żywo bijących kardiomiocytów
Komórki HeLa zostały umieszczone na płytce CellASIC® ONIX2 System M04 Switching Plate (M04S-03-5PK). Po całonocnej hodowli, fluorescencyjny barwnik wskaźnikowy wapnia Fluo-4AM został załadowany do komórek HeLa, a receptory P2Y zostały aktywowane za pomocą ATP w celu wywołania zwiększonego wewnątrzkomórkowego wapnia. Obrazowanie poklatkowe wykonywano w odstępach 1 sekundy.
.KardiomiocytyHL-1 zostały umieszczone na płytce przełączającej CellASIC® ONIX2 System M04 (M04S-03-5PK). Po całonocnej hodowli do komórek wprowadzono fluorescencyjny barwnik wskaźnikowy wapnia Fluo-4AM w celu wizualizacji spontanicznego bicia. Na wybranych komórkach przeprowadzono również śledzenie pojedynczych komórek w czasie rzeczywistym w celu wizualizacji przepływu wapnia na poziomie pojedynczej komórki. Obrazowanie poklatkowe wykonywano w odstępach 1 sekundy.
Obrazowanie na żywo tworzenia synaps immunologicznych
Obrazowanie internalizacji EGFR na żywo
Komórki T i B (odpowiednio Jurkat i Raji) zostały najpierw załadowane na płytkę pułapkową CellASIC® ONIX2 System M04T Pad Trap Plate (M04T-01-5PK). Komórki B zostały obciążone SEE (Staphylococcus Enterotoxin E) poprzez perfuzję, a obrazowanie poklatkowe wykonywano w odstępach 30-sekundowych. Kwadratowy element w środku reprezentuje pułapkę komórkową z pionowym ograniczeniem wysokości 12 mikronów. Formacje synaps immunologicznych można wyraźnie wizualizować na poziomie pojedynczej komórki podczas całego obrazowania pod pułapką komórkową, ponieważ ograniczenie wysokości pułapki zapobiega przemieszczaniu się nieadherentnych limfocytów zawiesiny poza płaszczyznę ogniskową.
.Komórki raka płuca A549 wyrażające GFP-EGFR (CLL1141) zostały umieszczone na płytce przełączającej CellASIC® ONIX2 System M04 (M04S-03-5PK). Po całonocnej hodowli komórki perfundowano przeciwciałem anty-EGFR w celu wywołania aktywacji EFGR i jego późniejszej internalizacji. Obrazowanie poklatkowe wykonywano w odstępach 30-sekundowych.
.Obrazowanie depolaryzacji mitochondriów na żywo
Obrazowanie chemotaksji na żywo
Komórki HeLa zostały najpierw załadowane na płytkę CellASIC® ONIX2 System M04 Switching Plate (M04S-03-5PK). Po całonocnej hodowli komórki obciążono barwnikiem BioTracker 488 Mitochondria (SCT136) w celu wizualizacji sieci mitochondriów. Depolaryzacja sieci mitochondrialnej została wywołana przez perfuzję CCCP (3-chlorofenylohydrazon cyjanku karbonylu). Obrazowanie poklatkowe wykonywano w odstępach 30-sekundowych.
Komórki ludzkiego włókniakomięsakaHT-1080 zostały najpierw załadowane na płytkę gradientową CellASIC® ONIX2 System M04 (M04G-02-5PK). Po całonocnej hodowli utworzono gradient chemotaktyczny poprzez perfuzję sąsiednich równoległych kanałów przepływowych z chemoatraktantem (płodowa surowica bydlęca) i bez niego. Obrazowanie poklatkowe wykonywano w odstępach 20-minutowych.
.Obrazowanie autofagosomów na żywo
Obrazowanie sferoidów nowotworowych na żywo
Komórki HT-1080 transdukowane cząsteczkami lentiwirusowymi GFP-LC3 (17-10193) zostały najpierw umieszczone na płytce CellASIC® ONIX2 System M04 Switching Plate (M04S-03-5PK). Po całonocnej hodowli, komórki poddano perfuzji inhibitorem lizosomów w warunkach niedotlenienia w celu wywołania autofagii i punkcikowatych autofagosomów.
.Komórki MCF-10A zmieszano z zimnym żelem ECM i umieszczono na wstępnie schłodzonej płytce CellASIC® ONIX2 System M04 Switching Plate (M04S-03-5PK). Po całonocnej hodowli sferoidy 3D obrazowano w odstępach 10-minutowych przez 18 godzin.
.Wiodący biolodzy przejmują kontrolę dzięki technologii CellASIC® ONIX
Posłuchaj, jak laboratorium na Uniwersytecie Harvarda wykorzystuje system CellASIC® ONIX do badania wzrostu bakterii i identyfikowania nowych celów dla antybiotyków.
Wykorzystanie platformy CellASIC® ONIX2 do badania biofizyki komórek bakteryjnych
Dowiedz się, jak laboratorium na NYU wykorzystuje system CellASIC® ONIX2 do badania biofizyki komórek bakteryjnych.
Życie jest dynamiczne
Zapoznaj się z naszymi artykułami technicznymi i protokołami obrazowania żywych komórek przy użyciu systemu CellASIC® ONIX2.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?