COLLB-RO
Roche
Colagenasa B
from Clostridium histolyticum
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About This Item
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biological source
Clostridium histolyticum
Quality Level
sterility
non-sterile
form
lyophilized
packaging
pkg of 100 mg (11088807001)
pkg of 2.5 g (11088831001)
pkg of 500 mg (11088815001)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
0.5-2.5 mg/mL
optimum pH
6.0-8.0
application(s)
sample preparation
storage temp.
2-8°C
Categorías relacionadas
General description
La colagenasa B se prepara a partir de cultivos de Clostridium histolyticum mediante filtración, precipitación en sulfato de amonio, diálisis y liofilización. La colagenasa de Clostridium histolyticum es una enzima colagenolítica. Interactúa con sustancias parecidas al colágeno y es responsable de la degradación del colágeno en péptidos pequeños. Se utiliza ampliamente para la desagregación de muchos tipos de tejidos (por ejemplo, pulmón, corazón, músculo, hueso, tejido adiposo, hígado, riñón, cartílago, glándula mamaria, placenta, vasos sanguíneos, cerebro, tumores) y para la preparación de suspensiones monocelulares para el establecimiento de sistemas de cultivo celular primario. Se recomienda la colagenasa B cuando el rendimiento, la viabilidad son importantes.
Specificity
La colagenasa degrada el colágeno nativo. La clostripaína, las enzimas tripsinoides y las proteasas neutras degradan también otras proteínas.
Application
La colagenasa de Clostridium de Roche se ha utilizado para preparar células de muchos tipos de tejido, como hepatocitos, adipocitos, islotes pancreáticos, células epiteliales, células musculares, células endoteliales, etc.. Sin embargo, debe determinarse empíricamente la idoneidad de cada lote de la enzima para la ruptura de un tejido concreto.
La colagenasa B se ha utilizado para la preparación de células procedentes de aortas de ratón y de tejido de cáncer colorrectal.
La colagenasa B se ha utilizado para la preparación de células procedentes de aortas de ratón y de tejido de cáncer colorrectal.
Specifications
Actividad enzimática:
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa B tiene una actividad colagenasa de normal a elevada y una actividad clostripaína superior a la media (normalmente >10 unidades/mg).
Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
El suero no inhibe la colagenasa.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de tripsina (clara de huevo, soja)
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa B tiene una actividad colagenasa de normal a elevada y una actividad clostripaína superior a la media (normalmente >10 unidades/mg).
Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
El suero no inhibe la colagenasa.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de tripsina (clara de huevo, soja)
Unit Definition
La colagenasa de Roche se valora en unidades Wünsch (1 μmol de producto formado por minuto a +25 °C con sustrato Wünsch).
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μl de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μl de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).
Preparation Note
Activador: Ca2+
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2,5 mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25 °C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2,5 mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25 °C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.
Reconstitution
Reconstitución en cualquier disolución salina equilibrada (por ejemplo, HBSS)
Other Notes
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos de diagnóstico.
signalword
Danger
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Storage Class
11 - Combustible Solids
wgk_germany
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
Certificados de análisis (COA)
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