MABE343
Anticuerpo anti-puromicina, clon 12D10
clone 12D10, from mouse
Sinónimos:
Anti-Puromycin, Clone 12D10 Anti-Puromycin, Puromycin Detection Antibody
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About This Item
UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Productos recomendados
biological source
mouse
Quality Level
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
12D10, monoclonal
species reactivity
human
species reactivity (predicted by homology)
all
technique(s)
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
isotype
IgG2aκ
shipped in
wet ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... NPEPPS(9520)
General description
La puromicina es un antibiótico aminonucleósido procedente de la bacteria Streptomyces alboniger, que actúa como un inhibidor de la síntesis de proteínas al bloquear la traducción mediante la terminación prematura de la cadena en el ribosoma. Los anticuerpos monoclonales contra la puromicina pueden utilizarse con métodos inmunoquímicos convencionales para controlar directamente la traducción, un método que se conoce como surface sensing of translation (SUnSET). Parte de la molécula se parece al extremo 3′ del ARNt aminoacilado, lo que hace que sea útil para el análisis de la traducción de proteínas. La puromicina induce la fragmentación del ADN en los timocitos y en las células de leucemia humana HL-60.
Specificity
Anticuerpo anti-puromicina, clon 12D10, demostró reaccionar con la muestra problema humana, preincubada con puromicina. Se prevé que reaccionará con todas las especies cuando la muestra problema se incube con puromicina.
Immunogen
Puromicina de Streptomyces alboniger
Application
Análisis de inmunotransferencia Western (tinción de proteínas totales): Los lisados de células HEK293 tratadas con puromicina y cicloheximida o sólo con puromicina se resolvieron utilizando SDS-PAGE y se transfirieron a una membrana. Las proteínas se visualizaron utilizando la tinción Ponceau S.
Análisis mediante inmunocitoquímica: En una dilución 1:10 000 de un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en los lisados de células HeLa tratados con puromicina.
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en el Western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).
Análisis mediante inmunofluorescencia: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en el Western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).
Análisis mediante inmunohistoquímica: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en IHC (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).
Análisis de clasificación de células activadas por fluorescencia: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en el FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Alexa Fluor™ es una marca registrada de Life Technologies.
Análisis mediante inmunocitoquímica: En una dilución 1:10 000 de un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en los lisados de células HeLa tratados con puromicina.
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en el Western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).
Análisis mediante inmunofluorescencia: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en el Western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).
Análisis mediante inmunohistoquímica: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en IHC (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).
Análisis de clasificación de células activadas por fluorescencia: En un lote representativo se detectaron proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en el FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
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Categoría investigación
Epigenética y función nuclear
Epigenética y función nuclear
El anticuerpo anti-puromicina, clon 12D10, detecta la puromicina incorporada en proteínas. Los anticuerpos monoclonales contra la puromicina pueden utilizarse con métodos inmunoquímicos convencionales.
Subcategoría investigación
Proteínas de unión y metabolismo del ARN
Proteínas de unión y metabolismo del ARN
Quality
Evaluado mediante inmunoelectrotransferencia (western blot) en lisados de células HEK293 tratados con puromicina y cicloheximida o sólo con puromicina.
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Una dilución 1:25 000 de este anticuerpo detectó a las proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en los lisados de células HEK293 tratados sólo con puromicina. Este anticuerpo detectó también pequeñas cantidades de proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en las células HEK293 tratadas con puromicina y ciclohexamida.
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Una dilución 1:25 000 de este anticuerpo detectó a las proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en los lisados de células HEK293 tratados sólo con puromicina. Este anticuerpo detectó también pequeñas cantidades de proteínas neosintetizadas con puromicina incorporada en las células HEK293 tratadas con puromicina y ciclohexamida.
Target description
La puromicina se incorpora en las proteínas neosintetizadas Sólo en presencia de puromicina, este anticuerpo detecta las proteínas neosintetizadas de múltiples pesos moleculares con puromicina incorporada. Sin embargo, se observa una señal más débil cuando también está presente la cicloheximida, un inhibidor de la biosíntesis de proteínas en los eucariotas.
Physical form
IgG2bκ monoclonal de ratón purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con acida sódica al 0,05%.
Presentación: Purificada
Proteína G purificada
Storage and Stability
Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.
Analysis Note
Control
Lisados de células HEK293 tratados con puromicina y cicloheximida o con puromicina sólo
Lisados de células HEK293 tratados con puromicina y cicloheximida o con puromicina sólo
Other Notes
Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.
Legal Information
ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies
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Optional
Referencia del producto
Descripción
Precios
Storage Class
12 - Non Combustible Liquids
wgk_germany
WGK 1
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»
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Alexandre David et al.
The Journal of cell biology, 197(1), 45-57 (2012-04-05)
Whether protein translation occurs in the nucleus is contentious. To address this question, we developed the ribopuromycylation method (RPM), which visualizes translation in cells via standard immunofluorescence microscopy. The RPM is based on ribosome-catalyzed puromycylation of nascent chains immobilized on
Chikungunya virus induces IPS-1-dependent innate immune activation and protein kinase R-independent translational shutoff.
White, LK; Sali, T; Alvarado, D; Gatti, E; Pierre, P; Streblow, D; Defilippis, VR
Journal of virology null
SUnSET, a nonradioactive method to monitor protein synthesis.
Schmidt, Enrico K, et al.
Nature Methods, 6, 275-277 (2009)
Imaging of protein synthesis with puromycin.
Goodman, Craig A, et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 109, E989-E989 (2012)
Craig A Goodman et al.
FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 25(3), 1028-1039 (2010-12-15)
In this study, the principles of surface sensing of translation (SUnSET) were used to develop a nonradioactive method for ex vivo and in vivo measurements of protein synthesis (PS). Compared with controls, we first demonstrate excellent agreement between SUnSET and
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