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MABC604

Sigma-Aldrich

Anticuerpo anti-MLKL, clon 3H1

clone 3H1, from rat

Sinónimos:

Mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL

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About This Item

UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

biological source

rat

Quality Level

antibody form

purified antibody

antibody product type

primary antibodies

clone

3H1, monoclonal

species reactivity

mouse

technique(s)

immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

isotype

IgG

NCBI accession no.

UniProt accession no.

shipped in

wet ice

target post-translational modification

unmodified

Gene Information

mouse ... Mlkl(74568)

General description

La MLKL, también conocida como proteína de tipo dominio de cinasa de linaje mixto, y codificada por el gen MLKL, es una proteína interesante que se requiere para la ejecución de necrosis o necroptosis programadas, por ejemplo en respuesta a la necrosis inducida por TNF-alfa. La MLKL es un componente del “necrosoma”, el complejo multiproteico que desencadena la muerte celular por necroptosis inducida por el factor de necrosis tumoral (TNF). La necrosis programada inducida por TNF-α también requiere las actividades de las serina-treonina cinasas RIP1 y RIP3 que interactúan con los receptores y también interactúan directamente con la proteína de tipo dominio de cinasa de linaje mixto MLKL. RIP3 es una cinasa final esencial en la necroptosis. La pseudocinasa MLKL funciona como un sustrato de RIP3 para intervenir en la señalización posterior y cuando forma un complejo con la MLKL, el complejo RIP3-MLKL es estabilizado por AMP-PNP para adoptar una conformación inactiva.

Immunogen

Epítopo: Región corchete.
Péptido lineal conjugado con KLH que corresponde a una secuencia de la región N-terminal del conector de doble hélice (corchete) hasta el dominio pseudocinasa de la proteína MLKL de ratón (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077; Murphy, J.M., et al. (2013). Inmunidad. 39(3):443-453).

Application

Análisis de inmunocitoquímica: Un lote representativo detectó la MLKL en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF) de ratones naturales, pero no en ratones Mlkl-/- (cortesía del Prof. James M. Murphy, Walter and Eliza Hall Institute, Australia).

Análisis de inmunoprecipitación: Un lote representativo causó inmunoprecipitación de MLKL a partir de un extracto soluble de fibroblastos dérmicos de ratón Mlkl-/- (MDF) que albergan la construcción de expresión de MLKL de ratón natural inducible por doxiciclina solo después del tratamiento con doxiciclina, pero no antes (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó Q-VD-OPh (TSQ; Nº de ref. 551476) la translocación de membrana inducida por el tratamiento del fragmento N-terminal de la MLKL-N murina y equina (a.a. 1-180 y 1-189, respectivamente) expresada exógenamente en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF) de ratones Mlkl-/- (Tanzer, M.C., et al (2016). Cell Death Differ.. En prensa).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó la MLKL células HT-29 y U937 humanas(Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Lotes representativos detectaron translocación de membrana de MLKL en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF) tras tratamiento con Q-VD-OPh (TSQ; Nº de ref. 551476) (Tanzer, M.C., et al. (2015). Biochem. J. 471(2):255-265; Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Lotes representativos detectaron la expresión de MLKL en fibroblastos de ratón L292, así como en fibroblastos dérmicos de ratón (MDF), fibroblastos embrionarios de ratón (MEF) y macrófagos de médula ósea (BMDM) de ratones naturales, pero no Mlkl-/- (Cook, W.D., et al. (2014). Cell Death Differ. 21(10):1600-1612; Murphy, J.M., et al. (2013). Inmunidad. 39(3):443-453).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó la MLKL de longitud completa recombinante de ratón, así como los fragmentos de la MLKL a.a. 1-180 y los a.a. 124-464, pero no los fragmentos de a.a. 1-125 ni a.a. 179-464, (Hildebrand, J.M., et al. (2014). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111(42):15072-15077).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia:: Un lote representativo detectó la expresión de MLKL en todos los tejidos analizados excepto el cerebro de ratones naturales, mientras que no se observó ninguna banda específica en los tejidos de los ratones Mlkl-/- (Murphy, J.M., et al. (2013). Immunity. 39(3):443-453).
Este anticuerpo anti-MLKL, clon 3H1, está validado para utilizar en inmunocitoquímica, inmunoprecipitación e inmunoelectrotransferencia (western blot) para la detección de MLKL.

Quality

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de tejido cardiaco de ratón.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (Western blot): 0,5 µg/ml de este anticuerpo detectaron la MLKL en 10 µg de lisado de tejido cardiaco de ratón.

Target description

~52 kDa observados. 54,48/30,28 (isoforma 1/2 humana) y 54,32/53,38 kDa (isoforma 1/2 de ratón) calculados. En algunos lisados celulares pueden observarse bandas no caracterizadas.

Physical form

IgG de rata purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azida sódica al 0,05 %.
Presentación: Purificada

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

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Optional

Referencia del producto
Descripción
Precios

Storage Class

12 - Non Combustible Liquids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable


Certificados de análisis (COA)

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The pseudokinase MLKL mediates necroptosis via a molecular switch mechanism.
Murphy, James M, et al.
Immunity, 39, 443-453 (2013)
RIPK1- and RIPK3-induced cell death mode is determined by target availability.
Cook, WD; Moujalled, DM; Ralph, TJ; Lock, P; Young, SN; Murphy, JM; Vaux, DL
Cell Death and Differentiation null
Snahel Patel et al.
Cell death and differentiation, 27(1), 161-175 (2019-05-19)
The kinase RIP1 acts in multiple signaling pathways to regulate inflammatory responses and it can trigger both apoptosis and necroptosis. Its kinase activity has been implicated in a range of inflammatory, neurodegenerative, and oncogenic diseases. Here, we explore the effect
Joseph Sarhan et al.
Cell death and differentiation, 26(2), 332-347 (2018-05-23)
Interferons (IFNs) are critical determinants in immune-competence and autoimmunity, and are endogenously regulated by a low-level constitutive feedback loop. However, little is known about the functions and origins of constitutive IFN. Recently, lipopolysaccharide (LPS)-induced IFN was implicated as a driver
Hayley I Muendlein et al.
Cell reports, 30(3), 699-713 (2020-01-23)
Receptor-interacting protein kinase 1 (RIPK1) and 3 (RIPK3) are well known for their capacity to drive necroptosis via mixed-lineage kinase-like domain (MLKL). Recently, RIPK1/3 kinase activity has been shown to drive inflammation via activation of MAPK signaling. However, the regulatory

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