포유류 세포 배양
포유류 세포 배양은 연구, 임상 및 제약 애플리케이션을 위해 중요한 도구입니다. 동물 조직에서 분리된 세포는 세포 생물학 그리고 질병을 연구하기 위해 배양에서 증폭되거나 항체, 단백질 및 백신 생산을 위해 이용될 수 있습니다. 불멸화된 세포주는 in vitro에서 장기간 성장할 수 있으며 복합체 생물학을 위한 단순 모델로 자주 사용됩니다.
포유류 세포 In Vitro 성장
세포 성장은 당, 아미노산, 알부민, 비타민, 무기물 및 성장 요소를 포함한 영양소의 복합체 혼합물이 필요합니다. 세포 배양 배지는 in vitro 포유류 세포 배양을 위해 이러한 필수 영양소를 공급합니다. 포유류 세포 배양은 최적 온도(37 °C) 및 5% CO2에서 성장을 위한 멸균 환경을 제공하는 배양기에서 성장하며 포유류 혈액과 유사한 pH 수준을 유지합니다.
부유물에서 배양될 수 있는 특정 종류의 혈액 세포를 제외하고, 포유류 조직에서 유래한 대부분 세포는 적절한 세포 분열 및 성장을 위해 표면에 부착되어야 합니다. 세포 배양 표면은 처리된 폴리스틸렌 또는 유리 플라스크, 플레이트 및 세포 부착을 위해 디자인된 필터로 공급합니다. 세포 부착은 poly-D-lysine(PDL)과 같은 합성 폴리머 및 접착을 위한 부착 구조를 제공하는 콜라젠과 같은 세포외 기질 단백질을 사용하여 촉진할 수 있습니다.
포유류 세포 배양 기법
세포 성장 in vitro의 오염을 방지하기 위해 무균 기법을 사용합니다. 포유류 세포 배양은 계대배양 또는 대이음배양을 필요로 하며, 세포의 건강과 증식을 위해 포화에 도달한 세포의 희석 및 소진된 배양 배지의 교체를 포함합니다. 부착성 세포 배양을 계대배양하려면, 재부착을 위해 새로운 배양 플라스크 또는 플레이트로 이전하기 전에 세포는 트립신처리와 같은 효소적 방법이나 긁기와 같은 기계적 방법을 사용하여 배양 표면에서 분리되어야 합니다. 혈구계(hemacytometer) 및 자동화된 세포 계수기를 이용하는 세포 계수법은 세포의 생존성을 평가하며 계대배양을 위한 파종 밀도 및 다운스트림 공정을 위해 적절한 세포 밀도를 결정하도록 돕습니다. 배양된 세포는 액체질소에 보관하여 냉동보존될 수 있으며, 작업용 균주액이 다시 필요하면 보존용 균주액을 해동할 수 있습니다.
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