전통적 배지 및 완충액
세포 배양 배지 변형은 다양한 포유류 세포 배양을 위한 생리학적 관련 환경을 위한 필요성에 반응하도록 개선되었습니다. 이러한 배지 및 염류는 구성 요소와 함께 세포 배양 애플리케이션에 적격하며 자사의 최첨단 시설에서 제조됩니다. 다음을 포함하는 매개변수를 기반으로 귀하의 애플리케이션에 적합한 배지를 선택하십시오.
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DMEM(Dulbecco 변형 Eagle's 배지)
DMEM(Dulbecco 변형 Eagle's 배지)은 세포 및 조직 배양용으로 정의된 배지 중 많은 부착성 세포 표현형에 대해 가장 광범위하게 적합한 배지입니다. Dulbecco의 변형은 원조 Eagle's 배지의 선택 아미노산과 비타민 함량을 최대 4배까지 향상시키는 강화된 보충 제형입니다. 자사 제품에는 여러 포도당 농도 범위뿐만 아니라 L-글루타민 포함 및 비포함 제형도 포함됩니다. pH 지시약 페놀 레드가 없는 제품은 에스트로겐에 민감한 애플리케이션에 사용할 수 있으며 자사의 포괄적인 제품에는 편리하고 바로 사용할 수 있는 액상 그리고 더 용이한 보관 및 더 긴 저장 수명을 위한 경제적인 분말형 배지가 포함됩니다.
RPMI 1640 배지
Roswell Park 연구소의 이름을 따서 Moore et al이 개발한 RPMI 1640 배지는 림프구 및 기타 혈액 세포와 같은 비부착성 세포 유형의 배양에 최적화되어 있습니다. 제형은 중탄산염 완충 시스템과 변경된 아미노산 및 비타민 양을 활용하는 배지의 RPMI 1630 시리즈를 기반으로 합니다. RPMI 1640 배지는 인간 정상 및 신생물 백혈구의 배양에 사용되었습니다. 적절하게 보충될 때, 이 제형은 72시간 파이토헤마글루티닌(PHA) 자극 분석에서 신선한 인간 림프구를 포함하여 다양한 유형의 배양된 세포 성장을 지원하기 위한 광범위한 적용성을 입증했습니다.
DMEM/F12 배지 제형
최근 몇 년 동안, 연구자들은 혈청을 대체하여 영양소, 성장 인자 및 호르몬을 함유한 무혈청 배지에서 다양한 세포주의 배양을 보고했습니다. Mather와 Sato(BBRC, 1985)는 인슐린, 트랜스페린, 표피 성장 인자, 황체형성 호르몬 또는 난포 자극 호르몬, 소마토메딘 및 성장 호르몬을 함유한 무혈청 배지에서 Leydig 및 Sertoli 세포의 성공적인 배양을 보고했습니다. 호르몬 및 그 농도는 연구 중인 세포 유형에 따라 특이적이지만, 이러한 연구에 최적인 것으로 밝혀진 배지는 Dulbecco의 변형 Eagle's 배지(DMEM)와 Ham의 F-12 영양 혼합물의 1:1 혼합물이었습니다. HEPES 완충액은 혈청을 제거함으로써 발생하는 완충 능력의 손실을 보상하기 위해 15mM의 최종 농도로 제형에 포함될 수 있습니다.
MEM(최소 필수 배지)
NIH에서 근무하는 Harry Eagle이 개발한 MEM(최소 필수 배지)은 여러 종의 요구에 보편적인 필수 아미노산을 포함하며 모든 합성 세포 배양 배지 중 가장 널리 사용되는 배지 중 하나입니다. 정상적인 포유류 섬유아세포와 특정 HeLa 세포 서브클론을 배양하려는 초기 시도에서 Eagle's 기초 배지(BME)로 충족할 수 없는 특이적인 영양 요건이 있음이 밝혀졌습니다. 배양에서 이들 및 다른 세포를 사용한 후속 연구에서 BME에 첨가하여 더욱 다양한 까다로운 세포의 성장을 도울 수 있음이 밝혀졌습니다. 이러한 변형을 포함하는 MEM에는 더 높은 농도의 아미노산이 포함되어 있어 해당 배지는 포유류 세포의 단백질 구성에 더 가깝습니다.
MEM은 단층에서 성장하는 다양한 세포의 배양에 사용되었습니다. Hanks' 또는 Earle's 염류를 포함하는 제형에 비필수 아미노산을 선택적으로 보충하여 이 배지의 유용성을 넓혔습니다. 해당 제형은 현탁액에서 세포의 성장을 허용하기 위해 선택적으로 칼슘을 제거함으로써 추가로 수정되었습니다.
Ham’s F-10 및 F-12 배지 제형
Ham의 영양 혼합물은 원래 중국 햄스터 난소(CHO) 세포의 여러 클론 그리고 HeLa 및 마우스 L-세포 클론의 성장을 지원하기 위해 개발되었지만, 간세포 배양, 바이러스 융합 및 독성 분석법에도 적합합니다. 이러한 혼합물은 배양된 세포 유형에 따라 혈청 보충 유무에 관계없이 사용하도록 제형화되었습니다.
- Ham's F-10은 인간 이배체 세포, 백혈구 및 랫트, 토끼 및 닭 조직의 1차 외식편 성장을 지원하는 것으로 나타났습니다.
- Ham's F-12는 일차 랫트 간세포 및 랫트 전립선 상피세포를 위해 사용됐습니다. CHO 세포를 사용한 클론 독성 분석은 최적 pH 범위 7.2 - 7.4에서 보다 효과적인 완충을 제공하는 25mM HEPES와 함께 사용 가능한 Ham's F-12를 사용하는 것으로 보고되었습니다.
- Ham's F-12에 대한 Coon의 변형은 바이러스 융합에 의해 생산된 잡종 세포를 배양하기 위해 개발되었습니다. 이 변형은 아미노산 및 피루브산 표준 농도의 2배 그리고 아스코르브산 및 조정된 염 농도를 포함하여 구성됩니다. Coon의 조제법은 0.863 mg/L 황산아연이 포함되어 있어, 마우스 L 세포 배양에 적합하지 않을 수 있습니다.
- Ham's F-12의 Kaighn 변형(Ham's F-12K라고도 함)은 변형된 염류(Konigsberg 조제법)뿐만 아니라 특정 아미노산과 피루브산의 농도를 증가시켰습니다. 이 배지는 1차 인간 간세포뿐만 아니라 분화된 랫트 및 닭 세포의 성장을 지원하도록 설계되었습니다.
Medium 199(M199)
초기 조직 배양 배지는 주로 동물 제품 및/또는 조직 추출물로 제형화되었습니다. 1950년에 Morgan과 그의 동료들은 세포 배양을 위해 엄격하게 정의된 영양 공급원을 생산하기 위한 노력을 보고했습니다. 비타민, 아미노산 및 기타 요소의 다양한 조합으로 수행된 그들의 실험은 외식 조직의 성장이 현재 바이러스학, 백신 생산, 1차 조직 외식편 배양 그리고 마우스 췌장 상피 및 랫트 수정체 조직의 in vitro 배양에 널리 사용되는 Medium 199(M199)로 알려진 것으로 측정될 수 있다고 밝혔습니다.
연구자들은 결국 세포를 장기간 배양하려면 배양액에 혈청 보충제를 추가해야 한다는 것을 발견했습니다. 적절하게 보충될 경우, Medium 199는 특히 형질전환되지 않은 세포의 배양을 위해 광범위한 종 적용 가능성이 있습니다.
세포 배양을 위한 기초 염류
D-PBS, Hanks', Earle's, Tyrode's ─ 어디에서나 구할 수 있는 가장 완벽한 균형 잡힌 염류 컬렉션에서 귀하의 배양 애플리케이션에 옳바른 제형을 찾을 수 있습니다.
기타 고전적인 세포 배양 배지
Ames', Iscove's 및 Glasgow 변형 그리고 Click's, Fischer's, L-15, McCoy's, NCTC 등을 포함한 전문 제형을 찾아보십시오.
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