Amplificazione dell’intero genoma
Avere a disposizione quantità sufficienti di DNA genomico è fondamentale per le numerose analisi necessarie per studio delle patologie umane e animali. In molti casi, la fonte del DNA è limitata o il DNA disponibile è danneggiato o degradato, rendendo impossibile eseguire le analisi fondamentali. La nostra linea di prodotti per l’amplificazione dell’intero genoma (WGA) fornisce un metodo robusto e accurato per amplificare quantità di materiale di partenza nell’ordine dei nanogrammi con rese nell’ordine dei microgrammi e un drop out allelico minimo. Continuiamo ad ampliare la nostra linea di prodotti WGA per offrirvi una vasta gamma di soluzioni per l'amplificazione dell'intero genoma a partire da diversi tipi di materiale, inclusi tamponi orali, campioni di tessuto fresco, campioni di tessuto congelato, blood card, sangue periferico e campioni di tessuto fissati in formalina e inclusi in paraffina (FFPE). La tecnologia WGA consente di espandere un campione presente in quantità limitata, fornendo ai ricercatori la possibilità sottoporlo a tutte le analisi desiderate.
Risorse sui prodotti
Protocollo di estrazione del DNA e amplificazione WGA per campioni di saliva
Protocollo di amplificazione dell'intero genoma per campioni di siero o plasma
Protocollo di estrazione del DNA e amplificazione WGA per tessuti animali
Protocollo di estrazione del DNA e amplificazione WGA per campioni vegetali
Kit di amplificazione dell'intero genoma (WGA)
L’analisi e la caratterizzazione del genoma sono diventati un importante strumento per la comprensione dei sistemi biologici. Spesso questa analisi è ostacolata dal numero di campioni da esaminare e dalla disponibilità di quantità limitate di DNA genomico. Questo è particolarmente vero nel caso di fonti di DNA scarse e archiviate. I kit GenomePlex® WGA per l’amplificazione dell'intero genoma sono stati sviluppati come sistemi ad alta processività per l'amplificazione rapida e altamente rappresentativa del DNA genomico da materiale di partenza in tracce.
I kit GenomePlex® WGA utilizzano una tecnologia di amplificazione brevettata basata sulla frammentazione casuale del DNA genomico e sulla conversione dei piccoli frammenti risultanti in molecole della libreria OmniPlex® affiancate da siti di priming universali e amplificabili tramite PCR. La libreria OmniPlex® viene quindi amplificata utilizzando primer oligonucleotidici universali e un numero limitato di cicli. I kit GenomePlex® WGA richiedono quantità di DNA genomico nell’ordine dei nanogrammi e forniscono rese post PCR di 5-10 µg. Questo sistema è adatto al DNA purificato da una varietà di campioni, inclusi sangue intero, blood card, tamponi orali, campioni di origine vegetale e campioni di tessuto fissati in formalina e inclusi in paraffina.
Strategie di amplificazione dell'intero genoma su singola cellula
Il kit GenomePlex® Single Cell WGA4 è stato ideato per l'amplificazione del genoma intero di una singola cellula e consente un’amplificazione di milioni di volte producendo una quantità di DNA genomico nell’ordine dei microgrammi. I tradizionali metodi di amplificazione dell'intero genoma su singola cellula hanno rese quantitative insufficienti con un rischio significativo di distorsione dei risultati. La tecnologia GenomePlex® consente, invece, un’elevata efficienza di amplificazione grazie alla DNA polimerasi WGA. Il kit Single Cell WGA include tutti i reagenti necessari per la lisi cellulare e la successiva amplificazione dell'intero genoma.
Il kit Single Cell WGA è stato validato per numerose applicazioni a valle ed è adatto per l'amplificazione di una varietà campioni tra cui campioni di origine vegetale, cellule fissate su policarbonato, linfociti, cellule di tumore renale, cellule epiteliali, cellule leucemiche e fibroblasti da liquido amniotico. Il genoma così amplificato è compatibile con molte applicazioni a valle, tra cui l'ibridazione genomica comparativa (CGH), l'analisi di microsatelliti/STR, l'analisi di SNP, la qPCR e altre analisi di genotipizzazione.
Amplificazione dell'intero trascrittoma
I kit di amplificazione dell’intero trascrittoma (WTA) sono stati sviluppati per generare quantità di trascritti target sufficienti, a partire da piccole quantità di RNA. Una WTA efficace richiede la replicazione accurata dei trascritti rappresentativi presenti in un campione, senza dropout o bias di specifici mRNA. I nostri kit per WTA forniscono un metodo accurato, veloce e semplice per amplificare l'RNA totale da una varietà di fonti, tra cui sangue, tessuti fissati e congelati, colture cellulari, cellule selezionate mediante FACS, piante e microrganismi. Inoltre i kit per WTA (WTA1, WTA2, SeqR) forniscono una rapida amplificazione dell'RNA totale in meno di 4 ore senza 3'-bias. L'RNA amplificato (cDNA) è adatto per qPCR, analisi di microarray e per i tradizionali clonaggi. Per ulteriori informazioni visita le pagine dei nostri prodotti WTA1, WTA2 e SeqR.
Kit di amplificazione di DNA e RNA SeqPlex-I per il sequenziamento di nuova generazione Illumina®
I kit di amplificazione di DNA e RNA SeqPlex-I, per l'amplificazione dell'intero genoma (WGA) e dell'intero trascrittoma (WTA), sono progettati per consentire il sequenziamento di nuova generazione (NGS) Illumina® a partire da DNA e RNA presenti in quantità estremamente limitate o degradati/altamente frammentati. Entrambi i kit WGA e WTA utilizzano una tecnologia brevettata basata sul random priming (innesco casuale) del DNA genomico o dell’RNA e sulla conversione dei piccoli frammenti risultanti in una libreria di molecole amplificabili tramite PCR affiancate da siti di priming universali, Per aiutarti di velocizzare la tua prossima grande scoperta, i kit SeqPlex-I WGA e WTA consentono una facile amplificazione di campioni di partenza scarsi, per un comodo input su celle a flusso Illumina® NGS.
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