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Miscela pronta KAPA2G per HotStart rapida

2 ×

• Sinonimo/i: PCR, hotstart PCR
• Codice UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Proprietà

• impiego: sufficient for 100 reactions; sufficient for 500 reactions
• Livello qualitativo: 100
• Durata: ≤18 mo.
• Caratteristiche: Fast PCR; Multiplex PCR; dNTPs included; hotstart
• Confezionamento: pkg of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5603); pkg of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5601)
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Concentrazione: 2 ×
• tecniche: PCR: suitable
• input: purified DNA
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

La DNA polimerasi KAPA2G Fast è un enzima ingegnerizzato di seconda generazione (2G), sviluppato a vantaggio di una processività e velocità più elevate, con velocità di estensione significativamente più alte rispetto alla Taq polimerasi di tipo wild. Oltre alla velocità, la KAPA2G Fast offre rese e sensibilità migliori in confronto ad enzimi concorrenti con un vasto campo di bersagli.
I kit di DNA polimerasi KAPA2G Fast sono progettati per PCR veloci in cui i tempi totali di reazione sono dal 20 al 70% più brevi di quelli della PCR convenzionale condotta con Taq DNA polimerasi di tipo wild. Questo risultato può essere ottenuto senza sacrificare le prestazioni della reazione e non richiede termociclatori o consumabili specializzati per PCR.
La DNA Polimerasi KAPA2G Fast HotStart^® è fornita sotto forma di miscela 2X ReadyMix e contiene tutti i componenti della reazione esclusi primer e bersagli.

Applicazioni

La KAPA2G Fast HotStart^® ReadyMix^™ è usata per:

• PCR di routine
• PCR rapida
• reazione a catena della polimerasi a trascrizione inversa (RT-PCR)
• genotipizzazione e PCR in fluorescenza

Azioni biochim/fisiol

Frammenti di DNA generati da KAPA2G Fast HotStart^® DNA Polimerasi possono essere impiegati per analisi di routine o applicazioni successive come digestione di enzimi di restrizione, clonaggio e sequenziamento. Analogamente alla Taqdi tipo wild, KAPA2G Fast ha polimerasi 5′→3′ e attività di esonucleasi 5′→3′, ma nessuna attività di correzione da esonucleasi 3′→5′. La fedeltà di KAPA2G Fast è paragonabile a quella della Taqdi tipo wild; è soggetta a un tasso d′errore di circa 1 ogni 1,7 x 10⁵ nucleotidi incorporati.

Caratteristiche e vantaggi

Riduzione fino al 75% dei tempi dei cicli:

• Tempi di estensione brevi come 1 secondo per kilobase.
• Copertura ad ampia gamma di bersagli ricchi sia di AT che di GC.

Alta velocità, prestazioni superiori :

• Sensibilità della copia singola da bersagli complessi
• Rese più alte

Note Rapide :

• I kit PCR KAPA2G Fast HotStart ReadyMix contengono la DNA polimerasi Fast HotStart ingegnerizzata KAPA2G e sviluppata per PCR rapide.
• Usare tempo di estensione di 1 secondo per ampliconi <1 kb e 15 secondi per ogni kb per ampliconi più lunghi, risparmiando dal 20 al 70% del tempo totale di reazione.
• Non sono richiesti consumabili PCR o strumentazione speciale.
• Il sistema tampone ottimizzato offre rese, specificità e sensibilità maggiori perché facilita l′ibridizzazione del primer a prescindere dalla sua lunghezza, contenuto in GC e temperature di fusione.
• Per un′alta resa di reazione non superare 25 μL di volume di reazione.
• La miscela pronta KAPA2G Fast HotStart contiene 1,5 mM MgCl₂ a 1x.
• La miscela pronta KAPA2G Fast HotStart con colorante comprende due coloranti indicatori per consentire il caricamento diretto su gel di agarosio. I prodotti di reazione sono a coda 3′-dA e si possono clonare a vettori di clonazione TA.

Qualità

È assicurato che ogni lotto di polimerasi DNA rapida KAPA2G is contiene <2% di proteine contaminanti determinate con Agilent Protein 230. La miscela KAPA2G Fast ReadyMix è sottoposta a rigorosi controlli di qualità, è priva di attività contaminanti da eso e endonucleasi e risponde a stringenti criteri per quanto riguarda la contaminazione del DNA.

Nota sulla preparazione

Assicurarsi sempre che i componenti siano completamente scongelati e amalgamati prima dell′uso. Per l′uso continuo, conservare a 4°C al massimo per un mese. Ritornare a -20 °C per stoccaggio a lungo termine. Se tutti i componenti sono stati maneggiati con cura e non sono stati contaminati, si può prevedere che il kit non sia compromesso se è stato inavvertitamente lasciato a temperatura ambiente per un breve periodo di tempo (fino a 3 giorni). Si raccomanda di non conservare a lungo termine a temperatura ambiente e 4 °C. Tenere conto che i reagenti conservati a temperature sopra i -20 °C sono più esposti alla degradazione quando si contaminano nell′uso, per cui lo stoccaggio a temperatura più alta di -20 °C è a rischio esclusivo dell′utente.

Altre note

Solo per fini di ricerca. Non usare a scopo diagnostico.

Note legali

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Solo come componenti del kit

• KAPA2G Fast HotStart^® DNA Polymerase 0.5 U per 25 µL reaction
• MgCl₂ 1.5mM at 1X
• dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS08
• Avvertenze: Warning
• Indicazioni di pericolo: H371
• Consigli di prudenza: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Classi di pericolo: STOT SE 2
• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash