Descrizione generale
La linea cellulare dopaminergica immortalizzata ibrida MN9D è stata generata dalla fusione tra neuroni mesencefalici rostrali di un embrione di topo C57BL/6J di 14 giorni e cellule di neuroblastoma N18TG2, un tumore del sistema nervoso simpatico di origine A/Jax. (1) Le cellule MN9D producono dopamina (DA) ed esprimono la tirosina idrossilasi (TH) e la decarbossilasi degli aminoacidi aromatici (AADC). (2) Le cellule MN9D si aggregano facilmente tra loro o con altre cellule cerebrali embrionali (2) e possono essere trasfettate utilizzando la precipitazione del fosfato di calcio (3) o la lipofectamina (4).Le cellule MN9D indifferenziate o differenziate sono ampiamente utilizzate per modellare i neuroni dopaminergici e per testare i meccanismi e i potenziali terapeutici relativi alla perdita di neuroni DA nel morbo di Parkinson. Differenziate con acido butirrico o fattore neurotrofico derivato dalle cellule gliali (GDNF) seguito da acido butirrico, le cellule MN9D ricapitolano solo parzialmente le proprietà elettrofisiologiche dei neuroni DA del mesencefalo. Ottimizzando ulteriormente la differenziazione di MN9D utilizzando uno o una combinazione di fattori di crescita o altri fattori, si potrebbe ottenere un sistema modello migliore per gli studi sul morbo di Parkinson in vitro. 5
Applicazioni
I meccanismi con cui i neuroni centrali sviluppano gli assoni e stabiliscono connessioni funzionali con le loro cellule bersaglio, nonché il ruolo di tali connessioni nella sopravvivenza cellulare, sono importanti questioni di neurobiologia dello sviluppo studiate utilizzando sistemi di riaggregazione cellulare in vitro, sia per i neuroni centrali dopaminergici sia per quelli colinergici. Le cellule clonali ibride facilitano lo studio delle interazioni trofiche tra i neuroni dopaminergici mesencefalici e le loro cellule bersaglio. Bibliografia1.Choi HK, Won LA, Kontur PJ, Hammond DN, Fox AP, Wainer BH, Hoffmann PC, Heller A. (1991) Immortalization of embryonic mesencephalic dopaminergic neurons by somatic cell fusion. Brain Res 552(1):67–76.2.Choi HK, Won L, Roback JD, Wainer BH, Heller A. (1992) Specific modulation of dopamine expression in neuronal hybrid cells by primary cells from different brain regions. Proc Natl Acad Sci USA 89(19):8943–8947.3.Perez RG, Waymire JC, Lin E, Liu JJ, Guo F, Zigmond MJ. (2002) A role for alpha-synuclein in the regulation of dopamine biosynthesis. J Neurosci 22(8):3090-30994.Cavanaugh JE, Jaumotte JD, Lakoski JM, Zigmond MJ. (2006) Neuroprotective role of ERK1/2 and ERK5 in a dopaminergic cell line under basal conditions and in response to oxidative stress. J Neurosci Res 84(6):1367-13755.Rick CE, Ebert A , Virag T, Bohn MC, Surmeier DJ. (2006) Differentiated dopaminergic MN9D cells only partially recapitulate the electrophysiological properties of midbrain dopaminergic neurons. Dev Neurosci 28(6):528-537.
• Ogni vial contiene ≥ 1X10⁶ cellule vitali.• L′origine murina delle cellule MN9D così come la loro negatività a un′eventuale contaminazione con altre specie, quali ratto, criceto cinese, criceto dorato e primate umano e non umano (NHP), sono accertate tramite il pannello Contamination Clear del Charles River Animal Diagnostic Services.• Le cellule sono risultate negative al test per le malattie infettive eseguito con un pannello Mouse Essential CLEAR di Charles River Animal Diagnostic Services.• Le cellule sono risultate negative alla contaminazione da micoplasmi.
Altre note
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