MABS157

Anticorpo anti-N-acetilglucosammina O-Linked, clone RL2

clone RL2, from mouse

• Sinonimo/i: O-Linked N-Acetylglucosamine
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: RL2, monoclonal
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): all
• tecniche: affinity binding assay: suitable; electron microscopy: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG1κ
• Condizioni di spedizione: wet ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... OGT(8473)

Descrizione

Descrizione generale

La modifica post-traduzionale delle proteine mediante l′aggiunta di N-acetilglucosammina β-linked (β-GlcNAc) sugli idrossili dei residui di serina o treonina è chiamata β-GlcNAc O-linked o semplicemente O-GlcNAc. O-GlcNAc rappresenta una delle modificazioni post-traduzionali più frequenti all′interno dei compartimenti nucleo-citoplasmatici di tutte le specie animali e vegetali. Diversamente da altri tipi di glicosilazioni proteiche, la modificazione O-GlcNAc avviene esclusivamente all′interno dei compartimenti nucleare e citoplasmatico e generalmente la proteina non subisce ulteriori modifiche che ne allunghino la struttura. Inoltre, la O-GlcNAcilazione è un processo reversibile e altamente dinamico. La O-GlcNAc transferasi (OGT) attacca O-GlcNAc su specifici residui di serina o treonina della proteina, mentre la O-GlcNAcasi catalizza la rimozione/idrolisi di O-GlcNAc dalle proteine. Infatti, la mutua interazione dinamica tra O-GlcNAcilazione e fosforilazione di serina/treonina svolge un ruolo importante nella regolazione della trasduzione del segnale cellulare. Tau e RNA polimerasi II (Pol II) sono due proteine ben note che vanno incontro a O-GlcNAcilazione. Nel cervello di pazienti affetti da malattia di Alzheimer, la proteina tau diventa estensivamente fosforilata e meno O-GlcNAcilata. Analogamente, quando durante la trascrizione inizia la fase dell′allungamento, O-GlcNAc viene rimossa dal dominio C-terminale (CTD) della DNA polimerasi II e sostituita con O-fosfato.

Specificità

La struttura bersaglio non è specie-specifica.

Riconosce in modo specifico i gruppi N-acetilglucosammina O-linked (O-GlcNAc) sulle proteine e sui peptidi O-GlcNAcilati. Si osserva scarsa reattività nei confronti di GIcNAc libera e nessuna reattività nei confronti di GalNac. Il trattamento con galattosiltransferasi delle proteine O-GlcNAcilate determina la galattosilazione di O-GlcNAc attraverso il legame β1-4 e la perdita completa della capacità di legame del clone RL2 (Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157-1164).

Immunogeno

Frazione, costituita da complesso dei pori-lamina, purificata da membrane nucleari di fegato di ratto corrispondente alla N-Acetilglucosammina O-linked di ratto.

Applicazioni

L′uso dell′anticorpo anti-N-acetilglucosammina O-Linked, clone RL2, è convalidato per i saggi di Western Blotting, immunocitochimica, saggio per la valutazione dell′affinità di legame, microscopia elettronica e immunoprecipitazione.

Saggio immunocitochimico: un lotto rappresentativo alla concentrazione di 4,0 µg/mL ha permesso di rivelare la N-acetilglucosammina O-linked in cellule HeLa.
Saggio immunocitochimico: con un lotto rappresentativo è stata osservata immunocolorazione della membrana nucleare, ma non della parte interna del nucleo, di cellule HeLa permeabilizzate con digitonina. Il clone RL2 ha colorato l′interno del nucleo solo delle cellule HeLa permeabilizzate con Triton X-100 prive di membrana nucleare intatta (Adam, S.A., et al. (1990). J. Cell Biol. 111(3):807-816).
Saggio per valutare l′affinità di legame: un lotto rappresentativo è stato radiomarcato con 125I e ne sono state studiate le caratteristiche di legame a membrane nucleari isolate di fegato di ratto (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156).
Microscopia elettronica: con un lotto rappresentativo è stata localizzata l′immunoreattività di O-GlcNAc in membrane nucleari isolate di fegato di ratto (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156).
Saggio di Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare le proteine O-GlcNAcilate in preparazioni di membrane nucleari di fegato di ratto (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156; Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157-1164).
Saggio di immunoprecipitazione: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l′immunoprecipitazione delle proteine O-GlcNAcilate da preparazioni solubilizzate di membrane nucleari di fegato di ratto. Pretrattando le preparazioni di membrane nucleari con galattosiltransferasi, il clone RL2 non è stato in grado di determinare l′immunoprecipitazione delle glicoproteine (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143-1156; Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157-1164).

Qualità

Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule HeLa.

Saggio di Western blotting: questo anticorpo alla concentrazione di 1,0 µg/mL ha permesso di rivelare la N-acetilglucosammina O-linked in 10 µg di lisato di cellule HeLa.

Descrizione del bersaglio

Variabile, dipendente dalle dimensioni della(e) proteina(e) O-GlcNAcilata(e).

Stato fisico

Formato: purificata

Altre note

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable