MAB5374

Anticorpo anti-proteina huntingtina, clone mEM48

culture supernatant, clone mEM48, Chemicon^®

• Sinonimo/i: Huntingtin
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: culture supernatant
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: mEM48, monoclonal
• Reattività contro le specie: human
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): mouse, rat
• Produttore/marchio commerciale: Chemicon^®
• tecniche: immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG
• N° accesso NCBI: NM_002111.6
• N° accesso UniProt: P42858
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... HTT(3064) , SLC6A4(6532)

Descrizione

Descrizione generale

La malattia di Huntington (HD) è una patologia neurodegenerativa ereditaria progressiva, caratterizzata da alterazioni della personalità, compromissione motoria e demenza sottocorticale. La causa molecolare della malattia è l′espansione del trinucleotide CAG, codificante la poliglutammina nel primo esone di un gene del cromosoma 4 (4p16.3), che normalmente produce una proteina di 3136 a.a. (circa 350 kDa) ampiamente espressa, detta huntingtina, la cui funzione non è chiara. La proteina è presente nella regione perinucleare insieme ai microtubuli e nella regione centrosomiale insieme alla gamma-tubulina. L′huntingtina è necessaria per la sopravvivenza neuronale ed è coinvolta nel traffico delle vescicole sinaptiche e nel legame dei microtubuli. Potrebbe svolgere anche un ruolo nell′apoptosi. Nella HD, le cellule neuronali con la forma mutante di huntingtina possiedono aggregati intranucleari del frammento N-terminale, che provocano dannose inclusioni nelle sedi perinucleari e la morte cellulare dei neuroni striatali. La forma wild-type dell′huntingtina e l′anti-huntingtina riducono l′aggregazione e la tossicità cellulare della forma mutante di huntingtina nei modelli di HD in cellule di mammifero. È noto che l′huntingtina interagisce con GAPDH, HAP-1, SP1 e TAFII130.

Specificità

Reagisce con la proteina huntingtina umana (sia la proteina nativa che quella ricombinante). MAB5374 reagisce con la huntingtina mutante nei pazienti e negli animali transgenici che esprimono numeri diversi di ripetizioni (da 82 a 150 glutammine). Pertanto, dovrebbe riconoscere diverse forme di huntingtina mutante.

Immunogeno

Proteina di fusione con GST dei primi 256 amminoacidi dell'huntingtina umana con l′eliminazione del tratto poliglutamminico.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Neuroscienze

Immunoistochimica:
Un lotto precedente a una diluizione 1:50-1:100 utilizzando ABC (complesso avidina-biotina) su tessuto fissato con il 4% di paraformaldeide. Il tampone suggerito per la diluizione è PBS contenente il 3% di BSA. L'anticorpo è compatibile con sezioni di tessuto incluse in paraffina.
Il tampone suggerito per la diluizione è PBS contenente il 3% di BSA. L′anticorpo è efficace con sezioni di tessuto incluse in paraffina. Yu, Z et al (2002) Hum. Mole. Genetics 11(8):905-914. (http://hmg.oxfordjournals.org/cgi/content/full/11/8/905) per metodi IHC validi e foto di mEM48 in tessuti di roditori con materiale transgenico umano.

Immunocitochimica
Prima del blocking si suggerisce una fissazione leggera con PFA al 4% seguita da incubazione con triton X-100 allo 0,1%.
Un precedente lotto di questo anticorpo è stato utilizzato in IC.

Western blotting
Diluizione 1:50-1:500 a seconda del livello di proteina mutante, con rivelazione in ECL. Il tampone suggerito per la diluizione è PBS contenente il 3% di BSA o PBS contenente il 5% di latte scremato.
I segnali risultano incrementati utilizzando preparati di frazioni nucleari; proteina monomerica circa 80 kDa; sono comuni gli aggregati che possono avere dimensioni >200 kDa.

Sarà cura dell′utente finale stabilire le diluizioni finali ottimali.

Rivela la proteina huntingtina utilizzando questo anticorpo anti-proteina hungtintina, clone mEM48 convalidato per IC, IH & WB.

Sottocategoria di ricerca
Malattie neurodegenerative

Qualità

Valutata regolarmente con mediante Western blotting su lisati di cellule HEK293.

Saggio di Western blotting:
Questo lotto diluito 1:1.000 ha rivelato la proteina huntingtina su 10 μg di lisati di cellule HEK293.

Descrizione del bersaglio

Maggiore di 200 kDa

Stato fisico

IgG monoclonali di topo in surnatante di coltura, senza conservanti.

Non purificato

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 6 mesi dalla data di ricevimento a -20 ºC in aliquote non diluite.
Raccomandazioni per la manipolazione una volta ricevuto il prodotto, prima di rimuovere il tappo, centrifugare il flaconcino e mescolare delicatamente la soluzione. suddividere in aliquote in provette da microcentrifuga e conservare a -20 °C. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento che potrebbero danneggiare le IgG e compromettere le prestazioni del prodotto.

Risultati analitici

Controllo
Lisato di corteccia cerebrale normale umana, campioni di corteccia cerebrale di topo da topi HD o wild-type

Lisati di cellule HEK293.

Altre note

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.

Note legali

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable