Descrizione generale
L′istone H3.3 (UniProt: P84243) nell′uomo è codificato dal gene H3FA3 (chiamato anche H3.3A, H3F3, PP781, H3F3B, H3.3B) (Gene ID: 3020). Gli istoni sono proteine basiche nucleari che costituiscono la struttura portante dei nucleosomi nella cromatina degli eucarioti. Due molecole di ciascuno dei quattro istoni del core (H2A, H2B, H3 e H4) formano un ottamero attorno al quale si avvolge il DNA in unità ripetitive, chiamate nucleosomi, che limitano l'accessibilità del DNA ai sistemi di trascrizione cellulari che richiedono il DNA come templato. Gli istoni svolgono quindi un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nel riparo e nella replicazione del DNA, oltre che nel mantenimento della stabilità cromosomica. L′accessibilità al DNA è regolata da una serie complessa di modificazioni post-traduzionali degli istoni, il cosiddetto codice istonico, e di rimodellamento del nucleosoma. L′istone H3.3 è espresso durante tutto il ciclo cellulare, indipendentemente dalla sintesi del DNA. Si tratta di una variante dell′istone H3 che sostituisce quest′ultimo in diversi nucleosomi contenenti geni attivi. Nelle cellule non in divisione è la forma prevalente dell′istone H3 e viene incorporato nella cromatina indipendentemente dalla sintesi del DNA. Anche se H3.3 può funzionare in modo molto simile all′H3 canonico come parte centrale del nucleosoma, durante tutto il ciclo cellulare questo istone viene anche depositato nelle regioni trascrizionalmente attive per sostituire i nucleosomi spiazzati. Nelle cellule tumorali, le mutazioni H3.3K27M e H3.3G34R/V sono espresse in maniera eterozigote, e un allele di H3F3A è il corrispondente wild-type. Nei tumori le mutazioni K27M e G34R/V sono mutualmente esclusive e mostrano profili di espressione genica e pattern di metilazione del DNA distinti. Quasi tutti i tumori portatori di mutazioni G34R/V presentano anche mutazioni ATRX/DAXX e sono caratterizzati da un allungamento alternato dei telomeri, un fenotipo classico delle cellule neoplastiche. (Rif.: Yuen, BT., and Knoepfler PS (2013). Cancer cell 24(5); 567-74).
Specificità
Questo anticorpo policlonale di coniglio rivela specificamente la forma con mutazione G34R dell′istone H3.3 umano. Non rileva l′istone H3.3 wild-type.
Immunogeno
Epitopo: sconosciuto
Peptide lineare coniugato corrispondente a 8 amminoacidi della regione N-terminale dell′istone H3.3 umano con una mutazione G34R.
Applicazioni
Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare
L′anti-istone H3.3 G34R, N° Cat. ABE403, è un anticorpo policlonale di coniglio altamente specifico diretto contro l′istone H3.3 con mutazione G34R ed è stato testato per l′uso nei saggi di immunoistochimica e Western blotting.
Qualità
Valutata mediante Western blotting in cellule Hek293 transfettate con l′istone 3.3 con mutazione G34R.
Saggio di Western blotting: questo anticorpo alla diluizione 1:500 ha permesso di rivelare l′istone H3.3 G34R in cellule Hek293 transfettate con l′istone 3.3 con mutazione G34R.
Descrizione del bersaglio
Visualizzato a ~17 kDa; calcolato a 15,33 kDa. In alcuni lisati possono essere osservate bande non caratterizzate.
Stato fisico
Anticorpo policlonale di coniglio purificato, in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 150 mM e azoturo di sodio 0,05%.
Formato: purificata
Purificato per affinità
Stoccaggio e stabilità
Stabile per 1 anno dalla data di ricezione a 2-8 °C.
Altre note
Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.
Esclusione di responsabilità
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