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MAB5304

Sigma-Aldrich

抗-谷氨酸抗体

Chemicon®, from mouse

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物源

mouse

抗體表格

purified antibody

抗體產品種類

primary antibodies

無性繁殖

monoclonal

物種活性

rat

製造商/商標名

Chemicon®

技術

immunohistochemistry: suitable

同型

IgM

運輸包裝

dry ice

目標翻譯後修改

unmodified

特異性

谷氨酸

通过与以下化合物的竞争实验,使用ELISA试验测定交叉反应性:

化合物 交叉反应性

谷氨酸-G-BSA 1

天冬氨酸-G-BSA 1/100,000

GABA-G-BSA 1/100,000

谷氨酸 1/100,000

缩写:

(G) 戊二醛

(BSA) 牛血清白蛋白

注释:抗体反应性需要戊二醛固定,因此组织固定程序中需要包括一些戊二醛(0.5%-2.0%),以获得适当的反应性。

免疫原

谷氨酸-戊二醛-BSA。

應用

免疫组织化学:1:2,500-1:10,000,通过PAP技术在大鼠海马上使用自由浮动切片。

最佳工作稀释度必须由最终使用者进行确定。

通过免疫组织化学/细胞化学检测谷氨酸的方案。大鼠脑的示例。

1. 待制备溶液 - 必须根据需要制备溶液。

溶液A: 0.1 M甲次砷酸盐,10g/L焦亚硫酸钠,pH 6.2。

溶液B: 0.1 M甲次砷酸盐,10g/L焦亚硫酸钠,3-5%戊二醛,pH 7.5。

2. 大鼠灌注 - 用戊巴比妥钠或戊巴比妥麻醉大鼠,并使用装有溶液A(30 mL)的泵通过主动脉进行心内灌注: 150-300 mL/min,溶液B(500 mL): 150-300 mL/min。

3. 固定后: 在溶液B中15至30分钟,然后在含有8.5 g/L焦亚硫酸钠(pH 7.5)的0.05 M Tris(溶液C)中柔洗4次。

4. 组织切片: 可以使用振动切片机或恒冷箱切片。

5. 还原步骤: 切片用含0.1 M硼氢化钠的溶液C还原10分钟。切片在不含硼氢化钠的溶液C中洗涤4次。

6. 谷氨酸抗体的应用:使用在含有0.1% Triton X100和2%非特异性血清的溶液C中的1:2,500-1:10,000最终稀释液。每2 mL稀释抗体孵育12个切片过夜,+2-8°C。然后将切片在溶液C中洗涤三次,每次10分钟。(注意抗体可能在较高的稀释度下可用。应该探索这一点,以最大程度地减少高背景的可能性。此外,请注意,如方案中所示,缓冲系统的变化可能会改变背景和抗体识别)。然后通过PAP程序揭示特定的反应。

7. 第二抗体:在含有1%非特异性血清的溶液B中用1:50至1:200稀释的山羊抗小鼠孵育切片,在20°C下孵育3小时,或在37°C下孵育1-2小时。然后用溶液C洗涤切片,3次,每次10分钟。

8. PAP:将切片与溶液C中适当稀释的过氧化物酶抗过氧化物酶(自由浮动法)在37°C下孵育1-2小时。然后在溶液C中清洗切片3次,每次10分钟。

9. 可视化:使用在0.05 M Tris中的DAB-4-HCl(25 mg/100 mL)(或其他色原)观察抗原-抗体复合物并过滤;加入0.05%过氧化氢。在室温下孵育切片10分钟。将切片转移至5 mL 0.05 M Tris中终止反应。将切片安装在铬铝涂层载玻片上。37°C干燥过夜。使用常规组织学程序再水化切片。使用快速安装介质的盖玻片。

仅供研究使用;不用作诊断。
抗谷氨酸抗体检测谷氨酸水平,&已发布&验证可用于IH。
研究子类别
神经递质&受体

神经炎症&疼痛
研究类别
神经科学

外觀

含有10mM叠氮化钠的PBS中的液体。
形式:纯化

儲存和穩定性

日期后,在2-8°以未稀释的等分试样可保存6个月。

法律資訊

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責聲明

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儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 2

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


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