E3132

E-64

protease inhibitor

• Synonyme(s) : trans-Époxysuccinyl-L-leucylamido(4-guanidino)butane, L-trans-3-Carboxyoxiran-2-carbonyl-L-leucylagmatine, N-(trans-Époxysuccinyl)-L-leucine 4-guanidinobutylamide
• Formule empirique (notation de Hill): C₁₅H₂₇N₅O₅
• Numéro CAS: 66701-25-5
• Poids moléculaire : 357.41
• Numéro Beilstein : 1405664
• Numéro MDL: MFCD00080261
• Code UNSPSC : 12352202
• ID de substance PubChem : 24278411
• Nomenclature NACRES : NA.77

Propriétés

• Source biologique: synthetic (organic)
• Pureté: ≥98% (HPLC)
• Forme: powder
• Solubilité: water: 20 mg/mL, clear, colorless to faintly yellow
• Température de stockage: 2-8°C
• Chaîne SMILES: CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H]1O[C@H]1C(O)=O)C(=O)NCCCCNC(N)=N
• InChI: 1S/C15H27N5O5/c1-8(2)7-9(20-13(22)10-11(25-10)14(23)24)12(21)18-5-3-4-6-19-15(16)17/h8-11H,3-7H2,1-2H3,(H,18,21)(H,20,22)(H,23,24)(H4,16,17,19)/t9-,10+,11+/m0/s1
• Clé InChI: LTLYEAJONXGNFG-HBNTYKKESA-N

Description

Description générale

L'E-64 est un inhibiteur de protéases à cystéine qui a été isolé chez le champignon Aspergillus japonicus TPR-64. L'E-64 est également connu sous le nom de N-[N-(L-3-trans-carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl]-agmatine. L'E-64 inhibe efficacement plusieurs protéases à cystéine, en particulier :

• La cathepsine K
• La cathepsine L
• La cathepsine S

L'E-64 est également actif sur d'autres enzymes, par exemple :

• La calpaïne
• La cathepsine B
• La cathepsine H
• La papaïne

Application

Le E-64 est un ligand efficace de purification par affinité des protéases à cystéine. Son couplage à une matrice d′affinité thiolée supprime l′irréversibilité de ses liaisons tout en conservant leur spécificité.

Actions biochimiques/physiologiques

Le E-64 est un inhibiteur de protéases à cystéine irréversible, puissant et hautement sélectif. Il ne réagit pas avec le groupement thiol fonctionnel des enzymes autres que les protéases, telles que la L-lactate déshydrogénase ou la créatine kinase. Le E-64 n′inhibe pas les protéases à sérine (hormis la trypsine) comme d′autres inhibiteurs de protéases à cystéine, la leupeptine et l′antipaïne. Le groupement trans-époxysuccinyl (fraction active) du E-64 se fixe de manière irréversible au groupement thiol actif de nombreuses protéases à cystéine telles que la papaïne, l′actinidase et les cathepsines B, H et L pour former une liaison thioéther. Le E-64 est un inhibiteur de protéases à cystéine particulièrement utile dans les études in vivo du fait de son inhibition spécifique, de sa capacité à pénétrer dans les cellules et les tissus et de sa faible toxicité.

Notes préparatoires

Le E-64 est soluble dans l′eau. Il est possible de préparer une solution à 20 mg/ml dans l′eau (avec chauffage éventuel). Une solution mère peut par exemple être réalisée sous forme de solution aqueuse 1 mM. L′inhibition des protéases est effective aux concentrations de 1 à10 μM. Les solutions mères en milieu aqueux sont stables plusieurs mois à -20 °C. Les solutions diluées sont stables plusieurs jours à pH neutre. Le E-64 est stable de pH 2 à pH 10, mais est instable dans l′ammoniac ou HCl. Le E-64 est également soluble dans le DMSO ; une solution 10 mM peut être préparée dans du DMSO sec et stockée à -20 °C. Les dilutions ultérieures peuvent être réalisées dans du milieu de culture. Des solutions pour injection ont été préparées en dissolvant du E-64 dans du chlorure de solution à 0,9 % ou dans une quantité minimale de solution saturée en bicarbonate de sodium puis par dilution avec du chlorure de solution à 0,9 % (après ajustement du pH à 7,0 avec de l′acide acétique).

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 3
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable
• Équipement de protection individuelle: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)