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DUO92008

Sigma-Aldrich

Réactifs de détection in situ Duolink® Red

Synonyme(s) :

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

Code UNSPSC :
12352200
Nomenclature NACRES :
NA.32

Gamme de produits

Duolink®

Niveau de qualité

Technique(s)

proximity ligation assay: suitable

Fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31)

Adéquation

suitable for fluorescence

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−20°C

Application

L'essai de ligature de proximité (Proximity Ligation Assay, PLA®) Duolink® permet la détection endogène des interactions entre protéines, des modifications post-traductionnelles et du niveau d'expression des protéines au niveau monomoléculaire, sur des cellules fixées et des échantillons de tissus.

Pour utiliser ce produit, suivez le Protocole Duolink® par fluorescence in situ . Des instructions succinctes sont également disponibles.

Consultez notre Portail d'information sur les essais PLA Duolink® pour en savoir plus sur la façon de réaliser une expérience Duolink®, les applications, la résolution des problèmes et bien plus encore.

Pour réaliser une expérience PLA in situ Duolink® complète, vous avez besoin de deux anticorps primaires (validés par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Il vous faut également une paire de sondes PLA de deux espèces différentes (une sonde positive et une sonde négative), des réactifs de détection, des tampons de lavage et du milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L'analyse se fait sur un équipement d'analyse par immunofluorescence standard.

Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence rouge sont souvent utilisés avec un filtre Texas Red®.

Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (classe IgG, monoclonaux ou polyclonaux) par immunofluorescence (IF), immunohistochimie (IHC) ou immunocytochimie (ICC) standard afin d'identifier les conditions de fixation, de blocage et de titrage idéales. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses dans la paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Cette application ne nécessite pas un nombre de cellules minimal.

Laissez-nous travailler à votre place : découvrez nos services sur mesure pour donner une nouvelle dimension à vos projets Duolink® !

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Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence rouge sont souvent utilisés avec un filtre pour Texas Red®.

Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.

Laissez-nous faire le travail pour vous et découvrez notre Programme de services sur mesure pour accélérer vos projets Duolink®.

Consulter la liste complète des produits Duolink®.

Caractéristiques et avantages

  • Aucune surexpression ou manipulation génétique
  • Grande spécificité (moins de faux positifs)
  • Sensibilité monomoléculaire grâce à l'amplification par cercle roulant
  • Possibilité de quantification relative
  • Aucun équipement spécifique requis
  • Plus rapide et plus simple que la technique FRET
  • Plus précis qu'une co-immunoprécipitation
  • Résultats prêts à être publiés

Composants

Ce produit est constitué des éléments suivants :
  • 5x ligature - contient des oligonucléotides qui s'hybrident aux sondes PLA ainsi que tous les éléments nécessaires à la ligature, hormis la ligase
  • 1x ligase (1 unité/μl)
  • 1x polymérase (10 unités/μl)
5x amplification rouge - contient tous les éléments nécessaires à l'amplification par cercle roulant (RCA), hormis la polymérase Contient également des sondes oligonucléotidiques marquées avec un fluorophore qui s'hybride au produit de RCA.
Se reporter à la fiche technique pour de plus amples informations.

Éléments non inclus dans le kit de détection :

Anticorps primaires, sondes PLA, tampons de lavage, milieu de montage

Informations légales

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

Produit(s) apparenté(s)

Réf. du produit
Description
Tarif

Pictogrammes

Health hazard

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Conseils de prudence

Classification des risques

Resp. Sens. 1

Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids


Certificats d'analyse (COA)

Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".

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H J Wright et al.
Oncogene, 35(36), 4762-4772 (2016-02-16)
Triple-negative breast cancer (TNBC) is a highly aggressive and metastatic form of breast cancer that lacks the estrogen, progesterone and HER2 receptors and is resistant to targeted and hormone therapies. TNBCs express high levels of the transmembrane glycoprotein, complement C1r/C1s
Francesca Gabanella et al.
Journal of cell science, 129(4), 804-816 (2016-01-09)
Disconnection between membrane signalling and actin networks can have catastrophic effects depending on cell size and polarity. The survival motor neuron (SMN) protein is ubiquitously involved in assembly of spliceosomal small nuclear ribonucleoprotein particles. Other SMN functions could, however, affect
Takashi Miyamoto et al.
The Journal of biological chemistry, 291(4), 1719-1734 (2015-11-22)
Diverse lines of evidence suggest that amyloid-β (Aβ) peptides causally contribute to the pathogenesis of Alzheimer disease (AD), the most frequent neurodegenerative disorder. However, the mechanisms by which Aβ impairs neuronal functions remain to be fully elucidated. Previous studies showed
Hyun Jik Lee et al.
Cell death and differentiation, 26(9), 1716-1734 (2018-11-23)
Hypoxia inducible factor 1α (HIF1α) is a master regulator leading to metabolic adaptation, an essential physiological process to maintain the survival of stem cells under hypoxia. However, it is poorly understood how HIF1α translocates into the nucleus in stem cells
Kan V Lu et al.
Cancer cell, 22(1), 21-35 (2012-07-14)
Inhibition of VEGF signaling leads to a proinvasive phenotype in mouse models of glioblastoma multiforme (GBM) and in a subset of GBM patients treated with bevacizumab. Here, we demonstrate that vascular endothelial growth factor (VEGF) directly and negatively regulates tumor

Articles

Proteins are complex biological molecules essential for cellular structure and functions. The majority of proteins commonly interact with various molecules, including other proteins, in order to exert their functions.

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

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Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Protocoles

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

Contenu apparenté

Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay

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